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1、丙泊酚瑞芬太尼对大鼠缺血再灌注损伤肺泡细胞凋亡的影响作者：郭晓军曹定睿*郭晶宇杨春艳张文颉【摘要】 目的：探讨麻醉药丙泊酚(propofol)和瑞芬太尼(remifentanil)对大鼠缺血再灌注损伤(ischemiareperfusioninjury,IR)后肺泡细胞凋亡的影响。方法：建立大鼠原位热缺血再灌注模型，于结扎前、缺血30min、再灌注1h、2h、4h给予药物干预，采取肺组织及右房血标本,测定血氧分压，肺组织湿/干重比,并作光镜和透射电镜观察组织细胞形态及超微结构,确定凋亡发生，流式细胞仪测定肺组织中凋亡情况
2、。结果：缺血再灌注组与假手术组比较，血氧分压降低，肺组织湿/干重比增高，肺泡细胞凋亡指数增高，丙泊酚组、瑞芬太尼组与缺血再灌注组比较，血氧分压增高，肺组织湿/干重比降低，肺泡细胞凋亡指数下降。结论：丙泊酚和瑞芬太尼对IR后肺泡细胞凋亡有抑制作用。【关键词】丙泊酚瑞芬太尼IR肺泡细胞凋亡 AbstractObjective:Theexperimentifentanilagainsttheapoptosisofalveolarcellsinducedbyischemiareperfusioninjury.Methods:Af
3、tertheestablishmentoftheischemiareperfusioninsitumodels,allratsaceuticalintervention.Beforetheligation,after30minoftheischemiaandafter1h,2h,4hrepectivelyofthereperfusion,plesoftherightatrium,thendetectthepartialpressureofbloodoxygen,thethattheapoptosishappensandde
4、tectapoptosisofalveolarcellseter.Results:paredegroup，Ischemia-reperfusiongroupshoia-reperfusiongroup，propofoltreatmentgroupandremifentaniltreatmentgroupshoifentanilhavesuppressiontotheapoptosisofalveolarcellsinducedbyischemiareperfusioninjury. Keyifentanil；IR；Apo
5、ptosisofalveolarcells 肺IR可在多种临床情况下发生,是肺移植早期和心肺转流术后肺功能障碍的重要原因，有报道在肝脏、心脏、肾脏、神经系统、视网膜等多种脏器IR损伤过程中均出现细胞凋亡,并对IR损伤的发展和该脏器预后具有重大意义。目前国内外关于麻醉药物对肺IR中肺泡细胞凋亡的研究较少,为此,我们研究了麻醉药物丙泊酚和瑞芬太尼对肺IR中肺泡细胞凋亡过程中的影响。 1材料和方法 1.1实验动物分组与肺缺血再灌注损伤模型的制备 雄性健康in、再灌注1h、2h、4h五个时点取材待检。 活结阻断法阻断右肺
6、静脉和右主支气管，使右肺处于萎陷状态，同时将潮气量减少1/3，热缺血1h后依次开放右肺静脉、右主支气管和右肺动脉，使右肺充分膨胀。 1.2实验方法 大鼠麻醉诱导用戊巴比妥钠(30mg/kg)，用戊巴比妥钠(15mg/kg)追加维持麻醉。气管插管机械通气，建立静脉通道供输液用。动物缺血30min后丙泊酚组给予5mg/(kg·h)。瑞芬太尼组给予0.5μg/(kg·min)。实验结束时即采左心房血测定血氧分压,测定肺组织湿/干重比,并结合光镜观察评价肺损伤。通过电镜观察细胞形态及超微结构,从形态学角度确定凋亡发生。采用流式
7、细胞仪对右肺中叶凋亡细胞进行定量检测,按细胞凋亡检测试剂盒(AnnexinV杭州联科公司)说明书操作，取右肺中叶组织,置于无菌培养皿中,剪碎,置于过滤离心管(滤过直径35μm,BectonDickinson,美国)中,4℃,1000转离心5min,去上清后加入PBS（磷酸盐缓冲液）,混匀成细胞悬液。左、右肺组织细胞凋亡率检测使用AnnexinV/PI试剂盒,将细胞悬液计数调整成1×106/mL的浓度,用Bindingbuffer液冲洗,4℃,1000转离心5min,去上清后依次加入250μLBindingbuffer、5μ
8、LFITCAnnexinV和5μLPI,混匀,冰浴反应10min后,上流式细胞仪(Coulter.elite.esp,美国)检测。激发光波长为488nm,FITC发射波长为525nm,PI发射波长为610nm。正常细胞FITC及PI均低染(FITC-PI-),凋亡细胞FITC高染而PI低染(FITC+P
