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1、结肠癌皮下移植瘤模型方法的优化#张文斌,王理,依里牙尔·依里哈木,高华*(新疆医科大学第一附属医院胃肠外科新疆乌鲁木齐830000)510152025303540摘要:目的:通过分组筛选建立结肠癌皮下移植瘤模型的最优条件,并以此为瘤源建立结肠癌皮下移植瘤模型。方法:根据细胞介质和注射部位的不同,将人结肠癌细胞株HT29分别用PBS和无血清培养基重悬后注射在BALB/C小鼠腋下和颈部皮下,建立第1代皮下移植瘤模型,以此为移植瘤源,利用插块法、酶解法及匀浆法,建立第2代皮下移植瘤模型,选择筛选后最优选的方法建立第3代皮下移植
2、瘤模型,通过观察肿瘤生长及转移等情况,组织病理学、免疫组织化学、流式细胞技术对移植瘤进行检测。结果:成功筛选建立了具有可操作性,高重复性的人结肠癌皮下移植瘤模型。移植瘤组织切片观察显示肿瘤为腺癌I~Ⅱ级。免疫组化显示CK19和P53呈阳性至强阳性表达。流式细胞术检查分析DNA倍体为异倍体。结论:本实验利用人结肠癌细胞株HT29成功筛选并建立了合适的结肠癌皮下移植瘤模型,该模型为结肠癌转移的下一步生物学研究提供了一个良好的技术平台。关键词:结肠癌;HT29;皮下移植瘤;动物模型中图分类号:R735.3+5Optimization
3、ofcoloncancerxenograftmodelestablishmentmethodZhangWenbin,Wangli,Eliyar`Elham,GaoHua(TheFirstClinicalMedicalSchoolofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi,830000,China)Abstract:Objective:Toestablishacoloncancerxenograftmodelthroughthepacketfilteringoptimumconditions.Metho
4、ds:Accordingtodifferentcellmediaandtheinjectionsite,theHT29humancoloncancercelllineswerewashedwithPBSandresuspendedinserum-freemediumafterinjectioninBALB/Cmicearmpitandneckskin,buildfirst-generationxenograftmodel,asaxenograftsource,usinginterpolationblockmethod,andh
5、omogenizedenzymaticmethod,asecond-generationxenograftmodel,choosethemostpreferredmethodofscreeningaftertheestablishmentofthethirdgenerationofsubcutaneousxenograftmodel,byobservingtumorgrowthconditionsandmetastasis,histopathology,immunohistochemistry,flowcytometrytod
6、etecttransplantedtumor.Results:Thesuccessofestablishedoperability,highrepeatabilitycoloncancerxenograftmodel.ObservedtumorbiopsyshowedthatthetumorwasadenocarcinomaI~Ⅱgrade.ImmunohistochemistryshowedpositiveexpressionofCK19andP53.FlowcytometryanalysisofDNAploidycheck
7、aneuploid.Conclusion:Inthisstudy,wesuccessfullyestablishedaproperscreeningandcoloncancerxenograftmodelusehumancoloncancercelllineHT29withBALB/Cmice,andprovidesagoodtechnicalplatformforthenextstepinthebiologicalresearchofcoloncancermetastasismodel.Keywords:Coloncance
8、r;HT29;Xenograft;Animalmodel0引言恶性肿瘤已经成为我国疾病导致死亡的主要原因,病死率居第1位,其中结直肠癌病死率占恶性肿瘤的第5位[1].建立一个简单、合适的动物模型对于研究结肠癌的生物学行为、癌细胞的异质性、肿瘤转移机制是必须的.经过几十年的研究