免疫重建荷人卵巢癌

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1、免疫重建荷人卵巢癌作者：赵卫东　张爱君　凌斌　王群华　陈峥峥　姚凤球　周颖　申震【摘要】　　［目的］探讨建立具有人免疫学特征的卵巢癌-SCID鼠模型的可行性。［方法］将16只雌性SCID小鼠随机分为4组。A组：磷酸盐缓冲液(PBS)0.5ml；B组为荷HO-8910组：HO-8910细胞1×106个/只；C组为人免疫重建组：PBL细胞4×107个/只，进行免疫重建；D组为荷HO-8910免疫重建组：PBL细胞4×107个/只，24h后腹腔注射HO-8910细胞1×106个/只，观察各组小鼠的生物学及免疫学

2、特性。［结果］免疫重建鼠的骨髓、肝脏、脾脏、胸腺、淋巴结、外周血、腹腔液中检测到人源性细胞；荷HO-8910细胞免疫重建组小鼠移植瘤体积小于荷HO-8910组小鼠；各组均无移植物抗宿主病(GVHD)发生。［结论］初步建立免疫重建荷人卵巢癌-SCID鼠模型，为卵巢癌治疗的临床前研究提供了理想动物模型。【关键词】卵巢肿瘤　SCID小鼠　疾病模型　动物EstablishmentofHu-PBL-SCIDMiceModelofOvarianCarcinomaAbstract:［Purpose］Toinvestig

3、atethefeasibilityofestablishahumanovariancarcinomamodelinhumanlymphocyte-engraftedtoseverebinedimmunodeficient(hu-PBL-SCID)mice.［Methods］SixteenSCIDmicelydividedinto4groups:groupAleachmouse),groupBanovariancarcinomacellsHO-8910(1×106eachmouse),groupCanper

4、ipheralbloodlymphocyte(PBL)(4×107eachmouse)forimmunereconstruction,andgroupDouse)andHO-8910(1×106eachmouse)cells.Thebiologicalandimmunologicalfeaturesofeachgroupsanimmunologicalcellsarrous,lymphoidnode,peripheralbloodandperitonealfluidofhu-PBL-SCIDmice.Th

5、evolumeoftumoranimmunsystemgroup.Nograft-versus-hostdisease(GVHD)anovariancarcinomamodelhasbeenestablishedinhu-PBL-SCIDmicealmodelforpreclinicalresearchandtreatmentforovariancarcinoma.Keys;mice,SCID;diseasemodel,animal卵巢恶性肿瘤发病率占妇科恶性肿瘤第3位，而其死亡率却位居首位，对卵巢癌的研

6、究已成为妇科恶性肿瘤主要的研究方向。本研究通过建立免疫重建荷人卵巢癌严重联合免疫缺陷(SCID)鼠模型，观察其生物学、免疫学特性，为进一步研究卵巢癌的生物学行为，寻找新的、更有效的免疫治疗方法提供一种更能模拟人体免疫环境下的荷瘤动物模型。1材料与方法1.1材料SCID鼠：购自中山医科大学实验动物中心，雌性，4~5周龄，体重20g~25g，共16只。在本实验室屏障系统内饲养，一切进入屏障系统的人、动物、饲料、水、空气、铺垫物及各种用品均须经过严格的微生物控制。肿瘤细胞系：人卵巢癌细胞系HO-8910购自中科

7、院上海细胞所。人外周血淋巴细胞(PBL)：来源于健康女性志愿者的外周静脉血，由我院血库提供。试剂及仪器：RPMI-1640培养基购自美国GIBCO公司，淋巴细胞分离液购自上海华精生物有限公司，鼠抗人单克隆抗体CD3-CY、CD19-FITC、HLA-ABC-PE购自BDPharMingen公司，流式细胞仪购自美国BectonDickinson公司。1.2方法1.2.1细胞培养HO-8910细胞培养于RPMI-1640完全培养基（10％热灭活新生牛血清），置于37℃、5％CO2孵箱中培养，根据细胞生长状态换

8、液传代。HO-8910细胞是贴壁细胞，传代及试验前需用0.25％胰蛋白酶溶液消化。1.2.2分离人外周血淋巴细胞(hu-PBL)用淋巴细胞分离液按常规方法分离后，PBS液悬浮细胞并计数，调整细胞浓度为8×107/ml。1.2.3动物分组、肿瘤移植及免疫重建A组即空白组：磷酸盐缓冲液(PBS)0.5ml；B组即荷HO-8910组：HO-8910细胞1×106个/只；C组即免疫重建组：PBL细胞4×107个/只，进行免疫重建；D组