不同产地刺五加中刺五加苷e含量的高效液相色谱测定论文

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1、不同产地刺五加中刺五加苷E含量的高效液相色谱测定论文吴少杰，邢朝斌，劳凤云，赵宝瑞【摘要】目的建立刺五加中刺五加苷E含量的测定方法，并比较不同产地的刺五加中刺五加苷E含量，为进一步研究不同品系的刺五加中刺五加苷E的含量与其遗传学的关系奠定基础。方法刺五加苷E的提取采用超声提取法;选用YMCODS色谱柱(150mm×4.6mm,.freel)，检测波长220nm，以0.1%磷酸水溶液-乙腈(89∶11)为流动相.freell/min。结果超声波提取法对刺五加苷E提取率稍低于溶剂提取法，但操作简便，耗时较短。刺五加苷E的

2、线性范围为0.625～10.004μg(r=0.99992);平均回收率为100.64%，RSD为2.97%。结论建立的刺五加苷E提取和测定方法适合于快速准确地分析大量样品。【关键词】刺五加;刺五加苷E;高效液相色谱法Abstract：ObjectiveToestablishamethodfordeterminationofEleutherosideEcontentinEleutherococcussenticosusfromdifferentprovenances,ethodinationconditionsn(1

3、50mm×4.6mm,5μm),obilephase,l/min,andUVdetect.ResultsAsparedethod,supersonicextractingmethode-saving,despiteitsslightlyloinationmethodissuitableforthepreciselyanalysisofEleutherosideE.Key.)Harms。1.3试剂磷酸(天津市微通化学试剂有限公司)，色谱纯乙腈(天津市四友生物医学技术有限公司出品，高效液相色谱专用)。2方法与结果2.1色

4、谱条件YMCODS液相色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);柱温30℃，检测波长220nm，体积流量1.0ml/min，流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈(89∶11)。此条件下，样品中刺五加苷E与两侧相邻色谱峰的分离度分别为2.94和2.98，分离效果良好;对刺五加苷E分离的理论塔板数为2.14×104，色谱图见图1。*-刺五加苷E图1刺五加苷E对照品(A)和刺五加(B)的HPLC图2.2对照品溶液配制精密称取0.5mg对照品，用50%甲醇定容至10ml，于4℃冰箱中保存。精密吸取一定量上述溶液置于另一10ml容

5、量瓶中并用50%的甲醇定容;按照此方法依次配制不同浓度的的刺五加苷E标准溶液。2.3样品处理与刺五加苷E的提取刺五加植株洗净，根和茎分开，阴干后将根和茎分别切成薄片，置于烘箱中60℃烘干至恒重后粉碎，粉末过20目筛。实验比较了两种提取方法——回流提取法和超声提取法：精确称取刺五加根和茎的粉末2.5g各2份，一份用50%的甲醇溶液85℃回流提取2h后过滤，滤液用旋转蒸发仪蒸干，残渣用50%甲醇溶解转移至10ml容量瓶中定容;另一份超声(频率40kHz，功率100in，然后过滤、滤液蒸干并按同法配成溶液。HPLC测定刺五

6、加苷E的含量。通过比较，发现二者提取效果相差不大，但由于超声提取法速简便，因此本研究采用超声提取方法。2.4线性关系考察精密吸取不同浓度的对照品溶液20μl，HPLC测定刺五加苷E的峰面积。采用Origin7.0数据处理软件，以峰面积为纵坐标，进样量(μg)为横坐标，得到直线拟合方程为Y=1920.52925X+250.70722，r=0.99992，在所测量的范围内(0.625～10.004μg)，线性关系理想。2.5精密度实验精密吸取刺五加苷E的对照品溶液20μl，连续进样5次，测定其峰面积;得到RSD为1.02

7、%，精密度良好。2.6稳定性实验精密吸取刺五加根样品(本溪产)溶液20μl，每隔2h进样1次，连续测定6次，测定刺五加苷E的含量，计算RSD=1.07%，表明在10h内刺五加苷E稳定性良好。2.7重复性实验精密称取1.0g刺五加根(本溪产)粉末6份，按“2.3”中超声提取法制备供试品溶液。测定结果的RSD为2.03%，重复性较好。2.8加样回收率实验精密称取1.0g刺五加茎(本溪产)粉末5份，精密加入一定量刺五加苷E对照品，然后按照“2.3”中超声提取法制备供试品溶液。经测定，平均回收率为100.64%，RSD=2.

8、97%，回收率较好。2.9样品测定精密称取各样品药材粉末2.5g，按照“2.3”中超声提取法提取各样品中的刺五加苷E，并测定其含量。测定结果见表1。表1刺五加中刺五加苷E的测定3讨论本研究比较了超声提取和回流提取两种方法对刺五加中的刺五加苷E的提取效果，发现回流提取法提取率略高于超声提取法，但两者相差不大。由于回流提取法操作繁琐、耗时较长，而超