前列腺癌组织中pten蛋白的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系论文

前列腺癌组织中pten蛋白的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系论文

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时间:2018-11-18

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1、前列腺癌组织中PTEN蛋白的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系论文【关键词】前列腺肿瘤【Abstract】AIM:ToinvestigatetheexpressionofPTENproteinintissuesofprostaticcarcinoma(Pca)anditscorrelationmunohistochemicalandterminaldeoxynucleotidyltransferasemediateddUTPbiotinnickendlabeling(TUNEL)techniquein42casesofPcaan

2、d10casesofnormalprostate(NP).TherelationshipbetphmetastasisinPca(P0.05),butithadnocorrelationayplayanimportantroleinthegenesisanddevelopmentofsomePcaandresultinthereductionofcellapoptosisinPca.DetectionofPTENproteinandAIinPcamaybehelpfultoevaluatethedegreeofcelldi

3、fferentiation,decideontherapeuticstrategiesanddeduceprognosis.【Keys;immunohistochemistry【摘要】目的:探讨抑癌基因PTEN蛋白在前列腺癌(Pca)组织中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系.方法:采用免疫组织化学SP法和DNA原位末端标记TUNEL法分别测定42例Pca及10例正常前列腺组织(NP)中PTEN蛋白的表达和肿瘤细胞凋亡,并分析PTEN基因表达缺失与肿瘤细胞凋亡的关系.结果:NP组织中PTEN蛋白全部阳性表达;而Pca中PTEN基

4、因表达缺失率达64.3%,且与肿瘤细胞分化程度、临床分期和有否淋巴结转移密切相关;PTEN基因表达缺失与肿瘤细胞凋亡成负相关(r=-0.746,P0.001).结论:前列腺癌组织中PTEN表达缺失率较高;PTEN基因失活在Pca的发生发展中起重要作用,且导致肿瘤细胞凋亡减少;联合检测PTEN蛋白和凋亡指数,有助于对肿瘤细胞的分化程度作出正确评价,以指导临床治疗及估计预后.【关键词】PTEN蛋白;前列腺肿瘤;免疫组织化学0引言前列腺癌(prostaticcarcinoma,Pca)高发于老年男性,是最多见的恶性肿瘤之一.p2

5、1,p53及p16基因的异常表达与前列腺癌的发病密切相关[1,2].freeloreJe厚连续切片,分别行复查诊断、PTEN蛋白免疫组化和细胞凋亡检测.1.2方法1.2.1免疫组化采用超高敏SP法一抗为鼠抗人PTENmAb(1∶100),二抗为羊抗鼠IgG,以上抗体及SP试剂盒均购自福州迈新公司.石蜡切片脱蜡入水,30mL/LH2O2阻断内源性过氧化物酶,高温高压修复抗原,小牛血清封闭10min,加一抗后4℃过夜,生物素标记的二抗孵育10min,链酶亲和素过氧化氢酶孵育10min,DAB显色,苏木精复染,脱水封片.以该公司

6、提供的良性前列腺增生组织片作为阳性对照,以PBS液代替一抗作为阴性对照.1.2.2细胞凋亡检测采用DNA原位末端标记(TUNEL法)TUNEL试剂盒为德国宝灵曼公司产品,检测程序参照试剂盒说明书,方法简略为:常规脱蜡入水,20mg/L蛋白酶K37℃消化15min,.freelL/LH2O2阻断内源性过氧化物酶10min,1∶10小牛血清封闭非特异性反应,滴加末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)反应液,室温孵育60min,DAB显色.以乳腺癌标本作为阳性对照,以PBS液代替TdT反应液作为阴性对照.1.2.3结果判断①染色程度:组

7、织切片中胞质出现黄至棕黄色颗粒者为阳性细胞标志,将阳性细胞按其数量及显色程度分为3级:表达弱阳性(+),即阳性细胞数<10%、显色强度为淡黄色或个别细胞呈黄至棕黄色;表达强阳性(),即阳性细胞数>60%、多数细胞呈黄至棕黄色.表达中度阳性(),即阳性细胞数及显色强度介于弱阳性与强阳性之间.凡显色强度与背景无明显差异者为阴性;②凋亡细胞计数:细胞核上有黄至棕色颗粒着色为阳性标志,光镜下随机观察5~10个视野,计数每高倍视野(×400)中平均阳性凋亡细胞数,其阳性细胞数的百分比为凋亡指数(apoptosisindex,AI).

8、统计学处理:计量资料结果以x±s表示,采用t检验;计数资料采用χ2检验.2结果2.1PTEN蛋白在前列腺组织中的表达组织切片中胞质出现黄至棕黄色颗粒者为阳性细胞标志.NP组织中均有PTEN不同程度的表达(Fig1);而Pca中PTEN基因表达缺失率为64.3%,二者之间差异有极显著意义(P0.01).P

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