前列腺癌组织中pten蛋白的表达及其与肿瘤细胞凋

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1、前列腺癌组织中PTEN蛋白的表达及其与肿瘤细胞凋【关键词】前列腺肿瘤　　【Abstract】AIM:ToinvestigatetheexpressionofPTENproteinintissuesofprostaticcarcinoma(Pca)anditscorrelationmunohistochemicalandterminaldeoxynucleotidyltransferasemediateddUTPbiotinnickendlabeling(TUNEL)techniquein42casesofPcaand10casesofnormalprostate

2、(NP).TherelationshipbetphmetastasisinPca(P<0.05),butithadnocorrelationayplayanimportantroleinthegenesisanddevelopmentofsomePcaandresultinthereductionofcellapoptosisinPca.DetectionofPTENproteinandAIinPcamaybehelpfultoevaluatethedegreeofcelldifferentiation,decideontherapeuticstrateg

3、iesanddeduceprognosis.　　【Keys;immunohistochemistry　　【摘要】目的：探讨抑癌基因PTEN蛋白在前列腺癌(Pca)组织中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系.方法：采用免疫组织化学SP法和DNA原位末端标记TUNEL法分别测定42例Pca及10例正常前列腺组织(NP)中PTEN蛋白的表达和肿瘤细胞凋亡，并分析PTEN基因表达缺失与肿瘤细胞凋亡的关系.结果：NP组织中PTEN蛋白全部阳性表达；而Pca中PTEN基因表达缺失率达64.3%，且与肿瘤细胞分化程度、临床分期和有否淋巴结转移密切相关；PTEN基因表达缺失与肿瘤细胞

4、凋亡成负相关(r=-0.746,P<0.001).结论：前列腺癌组织中PTEN表达缺失率较高；PTEN基因失活在Pca的发生发展中起重要作用，且导致肿瘤细胞凋亡减少；联合检测PTEN蛋白和凋亡指数，有助于对肿瘤细胞的分化程度作出正确评价，以指导临床治疗及估计预后.　　【关键词】PTEN蛋白；前列腺肿瘤；免疫组织化学　　0引言　　前列腺癌(prostaticcarcinoma,Pca)高发于老年男性，是最多见的恶性肿瘤之一.p21,p53及p16基因的异常表达与前列腺癌的发病密切相关［1，2］，表明Pca的发生是多基因调控的.PTEN(也称MMACI或TEP

5、I)是1997年发现的一种抑癌基因,通过使PIP3(3,4,5三磷酸脂酰肌醇)去磷酸化，从而抑制细胞增殖、促进其凋亡.Li等［3］应用RTPCRSSCP方法检测多种肿瘤细胞系和移植瘤中PTEN基因的突变率，发现多形性胶质母细胞瘤为31%，前列腺癌为100%，乳腺癌为6%，而原发性胶质母细胞瘤为17%.研究表明PTEN基因突变在Pca的发生、发展和转移中起重要作用［4］.为此，我们检测前列腺癌组织中PTEN蛋白的表达及肿瘤细胞的凋亡情况，探讨其临床意义.　　1材料和方法　　1.1材料　　1990/2002我院42例开放性前列腺切除术的Pca石蜡包埋标本(年龄49～

6、73岁，平均61岁),和10例正常前列腺(NP)标本(为尸体解剖标本，年龄23~48岁，平均32岁)，均为40g/L甲醛固定.所有患者术前均未接受任何治疗.以上标本全部经苏木精伊红(HE)染色，病理诊断明确.Pca参照Gleason的分级标准，按腺体分化程度将Pca分为：高分化腺癌12例、中分化腺癌17例、低分化腺癌13例.按oreJe厚连续切片，分别行复查诊断、PTEN蛋白免疫组化和细胞凋亡检测.　　1.2方法　　1.2.1免疫组化采用超高敏SP法一抗为鼠抗人PTENmAb(1∶100)，二抗为羊抗鼠IgG，以上抗体及SP试剂盒均购自福州迈新公司.石蜡切片脱蜡

7、入水，30mL/LH2O2阻断内源性过氧化物酶，高温高压修复抗原，小牛血清封闭10min，加一抗后4℃过夜，生物素标记的二抗孵育10min，链酶亲和素过氧化氢酶孵育10min，DAB显色，苏木精复染，脱水封片.以该公司提供的良性前列腺增生组织片作为阳性对照，以PBS液代替一抗作为阴性对照.　　1.2.2细胞凋亡检测采用DNA原位末端标记(TUNEL法)TUNEL试剂盒为德国宝灵曼公司产品，检测程序参照试剂盒说明书，方法简略为：常规脱蜡入水，20mg/L蛋白酶K37℃消化15min,30mL/LH2O2阻断内源性过氧化物酶10min，1∶10小牛血清封闭非特异性反

8、应，滴加末端脱氧核苷酸转