肌氨酸氧化酶法检测血清中肌酐含量的方法学评价

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1、肌氨酸氧化酶法检测血清中肌酐含量的方法学评价关键词：肌酐；酶学测定；苦味酸法；血清　　［摘要］目的：评价肌氨酸氧化酶法(简称酶法)检测血清中肌酐含量的准确度、特异性和精确度。方法：在设制好参数的前提下，取样本，于日立7170全自动生化分析仪上，进行重复、回收、干扰等一系列试验，同时用苦味酸法(Jaffe法)进行相同实验，对比其结果。结果：酶法测定肌酐的批内变异系数(CV)为0.67%，批间CV为0.83%，线性范围0μmol/L～8840μmol/L，胆红素(≥165.5μmol/L)和溶血(Hb<1g/L)干扰

2、接近零，回收率为101.7%。准确度、精确度和特异性均较Jaffe法高。结论:酶法抗黄疸干扰力强，操作简单、准确、重复性好，可作为常规测定方法。　　［关键词］肌酐；酶学测定；苦味酸法；血清　　ToEvaluatetheEnzymaticMethodforAssayingCreatinineinSerum　　　　Abstract：ObjectiveToevaluatetheprecise、accurateandspecificofenzymaticmethodforassayingcreatinineinserum.Me

3、thodsBothEnzymaticmethodandJaffe’smethodaticanalyzr.Aftertheparemeterofitparedthoseresults.ResultsThemethodaffordsasimple.Rapidandsensitiveassayuchbetterinclinicalneeds.ConclusionThemethodiseasilyautomatedandissuitableforroutineaticassay;Jaffe’sassay;Serum　　肌酐是肌

4、酸代谢的最终产物，它是由磷酸肌酸通过脱磷酸基并闭合成环而形成的内脱水物。肌酐是肌肉组织代谢产物的废物，它仅仅由肾小球排泄，不被肾小管重吸收。因此，测定血清肌酐浓度及根据血清肌酐与尿酐浓度计算所得的肌酐清除率，是既简单又可靠的肾小球滤过功能的指标，深受临床重视。本实验采用酶法进行肌酐含量的检测，并与苦味酸法(Jaffe法)比较，前者所受干扰较小，准确性、重复性等较好。现将实验结果报告如下。　　1　材料和方法　　1.1　材料　研究对象,本院住院及门诊患者共100例，日立7170A全自动生化分析仪，胆红素标准液8840μmo

5、l/L、肌酐酶法和Jaffe法试剂盒，由四川迈克科技公司提供，按说明书操作。　　1.2　方法　　1.2.1　取血样本　按《全国临床检验操作规程》中介绍的常规法制备好血清。　　1.2.2　酶法　按日立7170A仪器操作规程进行，将试验样本放检测盘，检测参数：T37.0℃；分析方法：二点终止法；测定点：14~34；测定波长：(次/主)700nm/505nm；样本量：10μl；稀释液：水。完成后，结果直接由打印机输出。　　1.2.3　Jaffe法　按日立7170A仪器操作规程进行，将试验样本放检测盘，检测参数：T37.0℃；

6、样本量：20μl；试剂量：试剂1120μl；测定波长：(次/主)700nm/520nm；测定方法：速率法；反应斜率：“+”；反应线性:30%；测定点：11~14；校正系数：1.0。完成后，结果直接由打印机输出。　　2　结果　　2.1　重复实验结果　见表1。　　表1　酶法与Jaffe法重复实验结果（略）　　2.2　回收实验　基础物质：1.8ml血清、0.2ml水，分析物质1为1.8ml血清、0.2ml676.6μmol/L肌酐，分析物质2为1.8ml血清、0.2ml233.3μmol/L肌酐，分别用酶法和Jaffe法检测

7、，其结果为：酶法总回收率101.7%，Jaffe法总回收率95.4%。　　2.3　干扰实验　　2.3.1　胆红素干扰　基础物质S0.9ml血清、0.1ml水，分析物A1∶0.9ml血清、0.1ml862μmol/L总胆红素，分析物A2∶0.9ml血清、0.1ml1308.μmol/L总胆红素，分析物A3∶0.9ml血清、0.1ml1655.2μmol/L总胆红素，分析物A4∶0.9ml血清、0.1ml2159.3μmol/L总胆红素，分析物A5∶0.9ml血清、0.1ml2635.0μmol/L总胆红素。检测结果见表2

8、。　　表2　酶法与Jaffe法干扰实验测定结果（略）　　2.3.2　酮体干扰　当血清酮体效价1∶32稀释阳性时，Jaffe法检测肌酐值偏高27μmol/L～35μmol/L［1］，而酶法不受干扰。　　2.3.3　溶血干扰　标本机械溶血前后肌酐检测:中度溶血(Hb<1g/L)对酶法无影响［2］。　　2.4　准确度测定　取肌酐校