大网膜移植治疗股骨头坏死的实验研究论文

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1、大网膜移植治疗股骨头坏死的实验研究论文林垂聪沈权陈荣华吴云刚周光伟叶澄宇【摘要】目的：探讨带蒂大网膜移植治疗激素性股骨头缺血性坏死的疗效。方法：杂种犬9只，应用肌注甲基强的松龙诱导出股骨头缺血坏死动物模型，于第8周在C臂机下行带蒂大网膜移植右侧股骨头术为实验组，将未行任何处理的对侧（左侧）为各自的对照侧。对比两侧股骨头形态、骨小梁结构、骨细胞、骨髓脂肪细胞、骨陷窝，以及毛细血管数、血管直径和超微结构的变化。结果：实验组非手术侧股骨头密度不均匀，有囊性透亮区，出现股骨头变形、股骨头塌陷、股骨头碎裂及髋关节脱位；可见大量空骨陷

2、窝，血管数目相对减少.freeloralhead，ANFH)是骨科领域较为棘手的难题之一，病因及发病机制尚未完全明了，治疗方法的选择及其疗效也存在很大争议1。血供障碍是股骨头缺血坏死最根本的问题，也是临床治疗首要解决的问题。笔者通过制备激素性股骨头坏死动物模型，观察C臂机下行带蒂多束的大网膜植入以建立网络状的血管再生后对股骨头的修复作用。1实验材料1．1实验动物12～14个月龄健康成年杂种犬12只，体重10～13kg，雌雄不限，由温州医学院实验动物中心提供并饲养，动物使用许可证编号SYXK（浙20030025）。1．2药

3、物与试剂甲基强的松龙注射液(辉瑞制药公司，批号：R02159)。10%福尔马林溶液、5%硝酸脱钙、系列酒精、2.5%戊二醛、2%多聚甲醛、5%EDTA、10%锇酸、醋酸钠、柠檬酸均由温州医学院化学实验室提供。1．3实验仪器普通手术器械、上海华科小型C臂X线机、HB2型奥林帕斯显微镜、重庆CS1011型干燥箱、CBQⅡ型硬质材料超薄切片机及日立H600型透视电镜，由温州医学院和附一医院提供。2实验方法2．1造模与分组12只杂种犬按随机方法分成正常组、模型组、实验1组、实验2组四组，每组3只。正常组肌注生理盐水2ml；其

4、余三组肌注甲基强的松龙16mg/kg，均臀肌注射给药，每周2次，连续8周。正常组、模型组造模第8周麻醉后行X线检查，处死动物后经股骨头病理学观察，证明造模成功。两实验组在第8周行C臂机下带蒂大网膜移植右侧股骨头术，实验1组、实验2组分别在移植术后第2、4周麻醉后行X线检查，处死动物后经股骨头病理学观察。2．2带蒂大网膜移植术将实验犬腹部、右髋部脱毛清洁后，按100mg/kg氯氨酮肌注麻醉，麻醉满意后，仰卧位固定于手术台上，清毒铺巾，腹正中切口，长5cm，切开皮肤、皮下、腹直肌鞘以及腹膜，在无血管区将大网膜与横结肠分离，由左

5、向右逐个切断结扎胃大弯和胃网膜动脉弓之间的血管，按大网膜血管分布类型裁剪大网膜，游离足够到达右侧股骨头的长度，并分为2束，每束内必须有一条血管弓，此时大网膜主要由右胃网膜动脉供血。以右侧大转子下为中心，切开2cm纵形切口达大转子下外侧，剥离骨膜。在C臂X线机定位下，用3mm钻在皮质上钻孔，方向对准股骨头的中心，钻孔2个至软骨下。用长钳在两切口间打通皮下隧道。将大网膜用牵引线通过皮下隧道牵引达右髋部切口，并将大网膜固定于腹膜上，注意避免缝合过紧影响大网膜的血液供应，切忌大网膜扭转或过分强力拖拉，否则易损伤大网膜，甚至发生血栓

6、形成，严重者可因缺血而致部分坏死。将分束的大网膜分别用细克氏针送入骨孔至软骨下，逐层缝合腹部及右髋部创口，固定敷料。术后分笼饲养。术后3天每天肌肉注射青霉素针40万u。2．3大体观察术后观察动物饮食、活动及切口情况。取材后观察股骨头有无塌陷变形。再沿股骨头冠状面剖开，肉眼观察原缺损区修复情况。2．4影像学观察各组动物实验到期麻醉后，同等条件下摄髋关节X线平片（额定电压55kV），观察股骨头形态、骨质密度、骨小梁。2．5光镜观察处死动物，取出两侧股骨头，沿冠状面剖开，10%福尔马林溶液固定，5%硝酸脱钙，系列酒精脱水，常规石

7、蜡包埋，切片厚4μm，HE染色，光镜下观察股骨头下区骨小梁结构、骨细胞、骨髓脂肪细胞、骨陷窝的变化，高倍镜下任选5个高倍视野，每个视野计数50个骨陷窝，计数空缺的骨陷窝数(表示骨细胞已坏死)占正常骨陷窝的百分比，求出空骨陷窝率。观察血管数、血管直径，并求出平均值。2．6电镜检查从股骨头冠状面取1mm3左右的骨组织2～3块，置于2.5%戊二醛和2%多聚甲醛混合液中预固定，5%EDTA脱钙，10%锇酸固定，Epon812包埋，制超薄切片，片厚600μｍ，醋酸钠、柠檬酸铅染色，透射电镜观察骨组织内的超微结构。2．7统计学方法数据

8、采用（±s）表示，t检验。3实验结果3.1一般情况所有动物术后当天开始进食，切口无感染，无动物死亡。模型组、实验1组、实验2组三组犬体形未见明显变化，但较正常组犬消瘦，皮下脂肪变薄，毛枯而无光泽。两实验手术组动物伤口均Ⅰ期愈合。3.2股骨头标本大体情况模型组股骨头较正常组骨质松脆，易于凿切，骨质明显疏松