跟腱切断法诱导大鼠异位骨化动物模型的建立

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1、跟腱切断法诱导大鼠异位骨化动物模型的建立.L.编辑。作者：徐俊昌，吴涛，吴桂华，钟招明，汤勇智，赵成毅，陈建庭【摘要】［目的］探讨建立一种异位骨化（heterotopieossification,HO）动物模型，并初步研究其形成机制。［方法］36只雄性SpragueDa）、跟腱半切组（partialAchilles’tenotomy,PAT)、跟腱全切断组（Achilles’tenotomy,AT），于术后6、10周分别行跟腱X线和组织学检查，观察异位骨形成情况。［结果］(1)sham和PAT组6、10周均未发生HO；(2)AT组：术后6周，3只大鼠

2、X线片可见异位骨，3只组织学检查发现有软骨形成；术后10周，6只大鼠均出现HO。这种异位骨具有骨小梁和骨髓结构，是通过软骨化骨形成。［结论］跟腱切断术能有效诱导大鼠HO，该方法简单、有效、易行，结果稳定。【关键词】跟腱；异位骨化；模型；大鼠Abstract：［Objective］Toestablishananimalmodelofheterotopieossification(HO)inducedbyAchilles’tenotomyinSpragueDaechanism.［Method］ThirtysixmaleSDratsgroup,incisi

3、onandsuturationedonlyintheleftleg.PartialtenotomyedintheleftAchillestendonsinPATgroup.InATgroup,tenotomyedintheleftAchillestendonstoestablishanimalmodelofHO.Xrayandhistologicalexaminationsadeat6and10andPATgroups.(2)InATgroup,3ratsshoationonXraysaining3ratsshoinationat6ationyis

4、asimple,effectiveandfeasiblemethodtoinduceHO.Keyalmodel;rat近年来，随着人工关节的广泛应用及骨折切开复位内固定术的普及，HO的发病率显著增高。由于其发病机制不明，缺乏理想的预防和治疗方法，致残率很高，其病因和发病机制受到广泛关注。因缺乏与临床密切相关的动物模型，目前对HO的研究大多集中在临床预防和治疗上。动物模型是研究骨的形态结构及生长代谢特点的有利工具，本研究旨在建立一种有效诱导HO动物模型的方法，并初步探讨其形成机制。1材料与方法1.1实验动物　　SD大鼠，雄性，体重120～150g，平均1

5、40g。由广州中医药大学实验动物中心提供。1.2实验设计36只大鼠随机分为3组：sham、PAT、AT组。大鼠腹腔注射戊巴比妥(30mg/kg)麻醉后，无菌条件下，取左小腿后外侧入路。sham组：切开皮肤，显露跟腱后缝合；PAT组：跟腱中点处横断1/2，缝合皮肤；AT组：跟腱中点处完全横断,在断裂跟腱两端，用血管钳反复钳夹5次，造成一定的创伤，跟腱不予缝合，缝合皮肤切口。术后常规饲养、观察。1.3观测指标1.3.1X线检查分别于术后第6、10周大鼠麻醉后行手术部位跟腱X线检查，观察有无异位骨形成。1.3.2跟腱的肉眼观察与组织学检查大鼠进行X线检查完毕

6、后，断颈法处死，跟腱部位取材。观察大鼠跟腱的颜色、厚度、弹性、坚硬度及异位骨位置。然后用10％的中性甲醛固定24h，15%的EDTA脱钙1周，脱钙完全后梯度乙醇脱水，透明石蜡包埋，制成5μm厚切片，HE、Masson染色，光镜观察。2结果2.1大鼠一般情况术后第1dAT组死亡2只、PAT组死亡1只，及时予以补充。余大鼠情况良好，切口无感染，愈合良好。2.2跟腱肉眼观察结果sham组：术后6、10周时跟腱呈白色，约2～4mm宽，1mm厚。PAT组：术后6周，跟腱断裂处颜色变暗，稍肿大变粗；10周由增生的纤维结缔组织相连，质地变硬。AT组：术后6周，跟腱颜

7、色变暗，呈米黄色，断端肿大变粗，质地变硬，断端之间有增生组织相连，柔软度、弹性下降；术后10周，异位骨化发生于断端处，逐渐向两端延伸，与周围组织粘连。2.3X线检查结果术后6周，sham、PAT组未见HO(图1a、b)；AT组有3只大鼠出现HO，在跟腱部位可见2个圆形的高密度影，中间有间隙分隔(图1c)。术后10周，sham、PAT组未见HO；AT组全部出现HO，跟腱部位可见线性高密度影(图1d)。图1X线检查结果图1asham组术后10周X线片图1bPAT组术后10周X线片图1cAT组术后6周，X线片在跟腱部位出现2个高密度影图1dAT组术后10周，

8、X线片出现高密度线性影2.4组织学检查结果术后6、10周，sham、PAT组切片未见软骨和骨形