中药抗氧化的作用机理及评价方法研究进展论文

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1、中药抗氧化的作用机理及评价方法研究进展论文李秋红，李廷利，黄莉莉，李飞【摘要】综述了中药抗氧化作用的可能机理和中药抗氧化作用的评价方法；重点介绍了二苯代苦味酰基自由基(DPPH)法、硫代巴比妥酸（TBA）法、Fe3+还原/抗氧化能力（FRAP）法和生物化学发光法4种目前常用的中药抗氧化作用评价方法及采用这些方法所取得的研究结果。【关键词】中药；抗氧化作用；机理；评价方法Abstract:ThisarticleovervieechanismofantioxidationandtheevaluationmethodofChinesemedicine;Fo

2、urkindsoffrequentlyusedevauationmethodsforChinesemedicineatpresentareintroducedmainlyinthisarticle,includingDPPH,TBA,FRAPandbiochemileminescence.Someresearchresultsusingthesemethodsarealsointroduced.Keyedicine;Antioxidentactivity;Mechanism;Evaluationmethod衰老的自由基(freeradical)学说是

3、英国的Harman于1956年最早提出的，该学说认为自由基攻击生命大分子造成组织损伤，是引起机体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的重要原因［1］。近年来，新的抗氧化机制不断被发现.freel有强吸收。有自由基清除剂存在时，DPPH·的单电子被配对而使其颜色变浅，在最大吸收波长处的吸光度变小，而且这种颜色变浅的程度与配对电子数成化学剂量关系，从而用于评价实验样品的抗氧化能力。该反应必须在避光条件下进行，另外反应体系的pH值应调至7.4左右，最好在缓冲液体系中进行。柳艳等［11］利用自由基反应模型观察丹酚酸B对DPPH自由基的淬灭效应，并结合高效液

4、相色谱(HPLC)技术分别研究温度和pH值对丹酚酸B清除DPPH能力的影响。为丹酚酸B抗氧化能力的另一作用途径及其影响因素的研究提供依据。胡博路等［12］采用DPPH法测定30种中草药乙醇提取液中的抗氧化活性。结果表明五倍子、诃子、大黄、槐花米等9种中药具有很强的抗氧化活性。康文艺等［13］采用DPPH自由基体系对茜草提取部位进行抗氧化筛选。结果从有活性的氯仿部位分离得到11个化合物,其中3个化合物具有抗氧化活性。2.2硫代巴比妥酸（TBA）法TBA法是测量脂肪酸，细胞膜和生物组织脂质过氧化的最古老也是应用最多的方法，它还是最容易应用于粗提生物体系的

5、方法，氧化的油脂多生成丙二醛，一分子的丙二醛可同两分子的硫代巴比妥酸（TBA）作用生成有色化合物，该有色化合物在吸光度530nm左右有吸收。因此，可通过测定丙二醛的量来评价油脂的氧化程度。夏晓凯等［14］通过TBA法测定大鼠肝匀浆自发和诱导的脂质过氧化产物MDA含量，研究黄精多糖(PSP)体外抗氧化作用。邓胜国等［15］采用ＴＢＡ法测定和评价荷叶黄酮的抗氧化效果。结果表明荷叶黄酮具有良好的清除自由基能力，能有效抑制亚油酸的氧化。2.3Fe3+还原/抗氧化能力（FRAP）法FRAP法原理为在较低pＨ环境下，Fe3+－三吡啶三吖嗪（tripyridyl-

6、triazine,.freel处具有最大光吸收，根据吸光度大小计算样品抗氧化活性强弱［16］。吴青等［17］采用Folin-Ciocalteu方法测定15种中草药不同提取物总酚含量；用ＤＰＰＨ和ＦＲＡＰ法评估了不同提取物的抗氧化活性。结果表明大花紫薇叶的抗氧化活性最高，其甲醇提取物中酚类物质的含量最高。李云峰等(2004军事医学科学院博士论文《石榴皮抗氧化物质提取及其抗氧化抗动脉粥样硬化作用研究》）以FRAP值为评价指标，按正交设计原则，确定了石榴皮抗氧化物质提取的最佳溶剂和提取条件。另采用细胞培养的方法研究石榴皮提取物抗氧化能力，结果显示石榴皮提取

7、物能够提高氧化损伤VEC(Ox-LDL,诱导)的细胞活力，提高细胞抗氧化防御功能。2.4生物化学发光法清除氧自由基能力评价生物化学发光法测定氧自由基清除作用时，一定浓度范围内发光强度(CL)与氧自由基数量呈量效关系。清除氧自由基的物质则可以降低CL，根据CL的下降则可以判断某物质清除氧自由基的能力［18］。流动注射化学发光技术是一种简单、快速和灵敏度高的方法，可对药物和植物性食物中活性成分含量及抗氧化性进行测定。刘泽敏等［19］采用反相流动注射化学发光法研究了旱芹、西芹的抗氧化性。实验结果表明旱芹和西芹提取液均能有效抑制超氧自由基诱导的鲁米诺化学发光

8、，并随着发光体系中提取液浓度的增大，发光强度呈现下降趋势，且具有较强的抗氧化性，并对旱芹和西芹抗氧化性能进行