135hz极低频电磁场对hep g论文

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1、135Hz极低频电磁场对HepG论文黄小军，杨家骥，王春梅，黄晓峰，李珍，曹云新，于华，王爽.freelelyloagicfield【Abstract】AIM:Toinvestigatetheeffectsofexposuretoextremelyloagicfield(ELF)onthegroeasuredrespectivelybymethethiazolyltetrazolium(MTT)reductionassayandfloetry.Theultrastructuralchangesissi

2、onelectronmicroscopy.RESULTS:Theabsorbentvalue（A）arkablydecreasede(P0.01).TheG1stageoftheHepG2cellsexposedtoELFe.Asshoissionelectronmicroscopy,thetreatedcellsorphologies:apoptoticcellsshrank,formedblebs,amembraneandcellularorganellesremainedintact.Inthe

3、nucleus,thechromatincondensedatthenuclearmembrane.Thecellsdisintegratedintoapoptoticbodies.CONCLUSION:Exposureto135HzELFcaninhibittheviabilityofHepG2cellsandinducecellapoptosis.【Keyelyloagicfields;apoptosis;HepG2cells【摘要】目的：观察135Hz极低频电磁场（ELF）照射对HepG2细胞生

4、长及凋亡的影响.方法：用MTT比色法、流式细胞仪，检测经135HzELF照射6,12,24h后相应时间点细胞的活性、细胞周期、凋亡细胞的比例，并用扫描电镜以及透射电镜观察细胞超微结构变化.结果：ELF磁场暴露后，与相应对照组相比其A值均下降（P0.01），细胞活性随照射时间延长而下降（P0.01）；使HepG2细胞G1期阻滞，凋亡率随照射时间延长逐渐增高.扫描电镜以及透射电镜观察到实验组细胞几种特殊的形态学特征：凋亡细胞收缩，出泡，质膜及细胞器保持完整.染色质浓缩于核膜，最后，细胞解离成凋亡小体.结论

5、：135Hz的ELF照射抑制HepG2细胞生长并促进其凋亡.【关键词】极低频电磁场；细胞凋亡；HepG2细胞0引言手提电话、计算机等家用电器方便人们生活的同时所产生的极低频电磁场(ELF)越来越引起人们的广泛关注.如何诱导肿瘤细胞发生凋亡，成为治疗肿瘤的主要研究思路之一［2］.Simko等［3］报道ELF持续照射可诱导肿瘤细胞凋亡.研究表明细胞内游离Ca2+的浓度与细胞凋亡密切相关［4］，胞内高浓度的Ca2+可以激活内源性核酸内切酶从而导致细胞发生凋亡［5］.我们采用流式细胞仪技术、MTT法、扫描电镜

6、以及透射电子显微镜对细胞周期、细胞活性、凋亡率及细胞超微结构进行观测.1材料和方法1.1材料人肝癌HepG2细胞，由病理教研室隋延仿教授惠赠.主要试剂：10mL/L四氧化锇（美国FISHERSCIENTIFIC.CO），丙酮（天津化学试剂有限公司），EPON812（天津化学试剂有限公司），乙腈（天津博迪化工有限公司），醋酸双氧铀（LKBProdukterAB,Bromma）.主要仪器：流式细胞仪（美国CouterELITEESP型），JEE4X真空蒸发仪（日本电子公司），JFC1100离子溅射仪（日本

7、电子公司），S520扫描电子显微镜（日本Hitachi），LKBNova超薄切片机（瑞典），JEM2000EX透射电子显微镜（日本电子光学公司）.1.2方法1.2.1HepG2细胞培养将HepG2细胞按照2.5×108/L密度接种于带孔的培养皿以及培养瓶中，以完全培养基(10mL/L胎牛血清，青、链霉素1×105U/L)送入50mL/LCO2的培养箱，37℃常规培养.1.2.2实验分组将细胞随机分为6组，实验组为3组，分别是6,12,.freelagiccell，横电磁波传输小室)中，小室内温度被控制

8、在（35.2±0.2）℃，并保持恒温.将频率调至135Hz，电场强度为80V/m，分6,12,24h,37℃进行辐照.1.2.4MTT法检测细胞活性将HepG2细胞均匀接种于96孔板，每组10个样本，细胞密度为1×107/mL，分别照射6,12,24h后实验组以及对应时间点对照组弃去培养液，96孔板每孔加入MTT（5g/L）20μL,37℃继续培养4h，吸弃上清液，每孔加入150μL二甲亚砜（DMSO），振荡10min，使结晶充分溶解，选取A490nm波