dna固定在纳米颗粒表面的方法

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1、磷酸化的DNABiotin-DNA炔基修饰的DNA巯基修饰的DNA氨基修饰的DNA金银纳米颗粒碳纳米管、石墨烯二氧化硅纳米颗粒量子点上转换纳米颗粒磷酸化的DNA与TiO2π-π堆积,如单链DNA与石墨烯,碳纳米管静电吸附1、Biotin-DNA2、炔基修饰的DNA及其他生物分子3、NH2-DNA氨基羧基氨基羧基氨基氨基1)EDC和NHSForbestresultsintwo-stepreactions,performthefirstreactioninMESbuffer(orothernon-amine,non

2、-carboxylatebuffer)atpH5-6,thenraisethepHto7.2-7.5withphosphatebuffer(orothernon-aminebuffer)immediatelybeforereactiontotheamine-containingmolecule氨基羧基DCC(N,N′-Dicyclohexylcarbodiimide)氨基-氨基1)BS(PEG)nPEGCrosslinkers-AmineReactive2)TSAT(Tris-succinimidylamino

3、triacetate)WaterWaterNHSesters:pH7-93)DSS(disuccinimidylsuberate)4)BSOCOES(bis[2-(succinimidyloxycarbonyloxy)ethyl]sulfone)5)DSG(disuccinimidylglutarate)6)DTSSP(3,3´-Dithiobis[sulfosuccinimidylpropionate])WaterWaterWaterDMSOorDMF8)BS³(Bis[sulfosuccinimidyl]s

4、uberate)9)EGS[ethyleneglycolbis(succinimidylsuccinate)]10)Sulfo-EGS[ethyleneglycolbis(sulfosuccinimidylsuccinate)]7)DST(disuccinimidyltartrate)WaterWaterDMSOorDMFDMSOorDMF4、巯基化的DNA1Au-SAg-S2巯基氨基3巯基羧基4巯基羟基5巯基巯基巯基-氨基1)AMAS(N-[α-maleimidoacetoxy]succinimideeste

5、r)NHSesters:pH7-9;Maleimides:pH6.5-7.5;Usually7.2-7.5。TwostepsreactionDMSOorDMF2)BMPS(N-[β-maleimidopropyloxy]succinimideester)DMSOorDMF3)EMCS(N-[ε-maleimidocaproyloxy]succinimideester)DMSOorDMF4)Sulfo-EMCS(N-[ε-maleimidocaproyloxy]sulfosuccinimideester)Wate

6、r6)Sulfo-GMBS(N-[γ-maleimidobutyryloxy]sulfosuccinimideester)5)GMBS(N-[γ-maleimidobutyryloxy]succinimideester)DMSOorDMFWater7)BMPA(N-β-maleimidopropionicacid)EDC,0.1molMESpH4.7Maleimidesreactwithsulfhydryls(–SH)atpH6.5-7.58)LC-SMCC(Succinimidyl-4-[N-maleimid

7、omethyl]cyclohexane-1-carboxy-[6-amidocaproate])DMSOorDMF10)Sulfo-SMPB(sulfosuccinimidyl4-[p-maleimidophenyl]butyrate)9)SMPB(succinimidyl4-[p-maleimidophenyl]butyrate)DMSOorDMFWater11)Sulfo-LC-SPDP,LC-SPDP,SPDP巯基-羧基巯基-羟基异氰酸脂在水溶液中很容易水解,所以最好用有机溶剂如DMSO、DMF等。如在水

8、相中,则要使用pH8.5的碱性缓冲溶液,避免使用含羟基的缓冲液如tris缓冲液,且要注意含羟基的分子不能有氨基和巯基,因为pH>7.5顺丁烯二酰亚胺失去对巯基的特异性,会同时与氨基和巯基发生反应。巯基-巯基pH6.5-7.5表征:1、定性(红外表征,如交联剂的特征峰;测颗粒的在260纳米处的紫外吸收,跑电泳,电位,粒径变化)2、定量(测颗粒或上清的紫外吸收,荧光,热重力分析)谢谢大家

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