碱性磷酸酶km值得测定(1)

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1、碱性磷酸酶Km值得测定原理在适宜条件下，酶促反应的初速度随底物浓度【S】增大而增大，当底物浓度达一定时则反应趋于稳定，反应速度最大。关系可用米氏方程表示Km是酶的特征性常数。将米氏方程变形为双倒数方程，以1/V对1/S作图可算出Km步骤1/A510结果由y=9.2961x+1.1465算出当y=0时x=-0.233，继而算出Km值=8.11mmol/L讨论计算出来的Km值与查资料所得到的值有一定的差距。实验是粗测，本身存在实验误差，我们在操作过程中也造成误差，所以导致与实际值差距较大。尿蛋白定性检测原理加热可以使蛋白质变性，溶液pH等于pI时溶解度最小。步骤1.取大试管一支

2、，加入5ml澄清尿液。2.用试管夹持试管上端，酒精灯加热尿液斜面至沸。3.滴加5%乙酸2~3滴于尿液表面，轻轻混匀局部，加热。结果未加热部分是澄清，加热部分浑浊明显讨论正常尿液中不会出现浑浊，本实验尿液加入了蛋白质。尿液中如果出现沉淀则说明出现了病症。分子筛层析（凝胶过滤法）原理多孔凝胶对不同大小分子的排阻效应，使不同分子分离。大分子先出，小分子后出。步骤1.取5~8滴4mg/ml蓝色葡萄聚糖液和4滴2mg/ml重铬酸钾液混匀。2.将层析柱出水口打开，缓放柱内液体至凝胶柱表面加入混匀的待层析液。3.从上口缓加蒸馏水，成2~3cm高水柱，出水口用小试管接水。4.在上口加洗脱液

3、洗脱。每支小试管接1cm液体，并编号。5.观察不同小试管的液体颜色的变化。结果黄讨论分子筛层析能够大致的分离分子量不同的物质，但是分离的物质不纯有杂质，实验时间也相对较长，操作复杂。