逐痰通络汤对急性期脑出血大鼠血il1β、il6表达的影响

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1、逐痰通络汤对急性期脑出血大鼠血IL1β、IL6表达的影响【摘要】探讨中药逐痰通络汤对脑出血损伤的保护作用。[方法]将大鼠随机分为正常对照组(N组)、假手术组(K组)、模型组(C组)和给药组(Z组),采用胶原酶诱导法建立大鼠脑出血模型,观察各组动物神经功能缺损并评分,ELISA法检测血清IL1β、IL6的表达。[结果]①通过神经功能评分,Z组与C组比较,第1、2d无明显统计学差异,第3d有差异(P<0.05),评分较低,第7d有显著差异(P<0.01);②与K组比较,C组IL1β、IL6含量在

2、第1d时开始升高(P<0.05),第2、3d到达高值(P<0.001),第7d接近正常范围;③给药后,第2d,Z组IL1β、IL6含量较C组明显下降(P<0.05),第3d,显著下降(P<0.001)。[结论]逐痰通络汤能抑制IL1β、IL6的表达和释放,从而减轻炎症反应,对脑出血后的继发性神经元损伤起保护作用。【关键词】逐痰通络汤;脑出血(ICH);白细胞介素1β;白细胞介素6ChinaAbstract:[Objective]ToinvestigatetheeffectofZh

3、utanTongluoTangontheexpressionofinterleukin1β(IL1β)andinterleukin6(IL6)andchangesofnervefunctioninacutecerebralhemorrhagerat.[Methods]Ratslydividedintofourgroups:normalcontrolgroup(N),shamoperativegroup(K),modelgroup(C)andZhutanTongluoTanggroup(Z),Collage

4、naseodelofintracerebralhemorrhage,eachgroupofanimalnervefunctiondamageethodetonormalrangeon7d;3.Afteradministration,paredmationresponse,orrhageinrats.  Keyorrhage;IL1β;IL6  急性期脑出血(ICH)是临床上多发病、常见病。逐痰通络汤是刘时觉教授经验方,针对中风病急性期痰瘀互结、气血瘀阻的病机,辨证施治,具有较好的临床疗效。本实验观察逐痰通络汤对

5、急性期ICH大鼠血IL1β、IL6表达的影响,探讨其可能机制。  1实验材料  1.1实验动物及分组  清洁级雄性SD大鼠,体重(250±20)g,温州医学院实验动物中心提供。根据随机原则,将116只大鼠分为4组:正常对照组(N)、假手术组(K)、模型组(C)、给药组(Z)。对照组6只,后3组设术后6h、24h、48h、72h、7d共5个时间点,各时间点8只大鼠(K组各时间点6只)。  1.2药物及其制备  逐痰通络汤:大黄10g、胆南星10g、地龙10g、全蝎6g、天麻10g、郁金10g、石菖蒲6g、天竹黄1

6、0g,于常压100℃煎煮30min去渣,8层纱布过滤,浓缩成生药1.25g/ml,4℃保存备用。  1.3主要试剂及仪器  大鼠脑立体定向仪,Ⅶ型胶原酶由美国Sigma公司提供,IL1β、IL6检测试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司。电子天平,离心沉淀机,550型酶标仪,摇床,烤箱等。  2实验方法  2.1ICH模型的建立  (胶原酶诱导法)将大鼠麻醉后俯卧位固定于立体定位仪上,于前囟前0.2mm,中线旁开3mm钻一直径1mm的孔,以微量进样器沿钻孔进针深6mm(尾状核),然后缓慢注入含0.5UⅦ型胶原酶的

7、生理盐水2μl,时间2min,留针5min,退针0.5mm,再留针5min,缓慢拔出针头,骨蜡封窗,缝合皮肤。  2.2给药方法  给药组于造模后6h、24h、48h、72h、7d,5个时间点给予逐痰通络汤灌胃,(大鼠灌胃量按10ml/(kg·d),假手术组、模型组给予等量生理盐水,正常组按常规饲养。  2.4标本的收取及处理  各组大鼠在上述时间点神经功能评分后2h(即给药组灌胃后2h),用3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后,直视下行右心室穿刺抽血,分别用EDTA抗凝管及促凝管装取动脉血,制备血清。血清制备:将促凝血静

8、置0.5h后,以3000r/min离心10min,取上清液,置于-80℃冰箱保存。  2.5IL1β、IL6的测定  采用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA),具体步骤严格按照试剂盒说明书进行,最后用全自动酶标仪在450nm处读取吸光度值(OD值),根据样品的OD值在标准曲线上查出其浓度。  2.6统计学处理  采用SPSS13.0统计软件包进行统计学处理

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