榛花对四氧嘧啶性糖尿病小鼠肝糖原含量的影响

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1、榛花对四氧嘧啶性糖尿病小鼠肝糖原含量的影响【关键词】糖尿病,实验性;肝糖原;植物,药用;小鼠榛花具有降低血糖作用,目前已被证实的降低血糖作用机制有促进胰岛B细胞的分泌功能,提高血清胰岛素水平;作用于受体或受体后水平,增加胰岛素受体数目或提高亲合力;抑制胰高血糖素分泌;促进周围组织及靶器官对糖的利用;清除自由基及抗脂质过氧化等[1,2].前期实验结果表明,榛花具有清除自由基及抗脂质过氧化作用,而对受损胰岛B细胞的再生和修复作用不明显.本实验通过组织化学方法观察了榛花对糖尿病小鼠肝糖原含量的影响,为探讨榛花的降低血糖机制提供实验依据.1材料1.1实验动物取昆明种雄性小鼠,体重为(20±2)g,由延

2、边大学医学部实验动物科提供.1.2药品与试剂榛花采集于长白山地区,采用水提取法提取,具体方法为取榛花780g,加蒸馏水1500mL煮沸30min~1h,过滤后浓缩至200mL,灌封备用.盐酸二甲双胍片为贵州圣济堂制药有限公司产品,批号为20020109;四氧嘧啶为香港FARCO化学供应公司产品.1.3仪器Leica820型组织切片机为德国产,OLYMPUSVANOX型万能显微镜为日本产,TD-2000型真彩病理细胞显微分析系统为北京天地百年科技有限责任公司产品.2方法2.1四氧嘧啶性糖尿病小鼠模型的制作取雄性小鼠,先适应性喂养1周,禁食24h,自由饮水.将四氧嘧啶用生理盐水配制成7g/L注射液

3、,每只小鼠按70mg/kg剂量尾静脉1次性注射给药.注射后第5日测定空腹血糖,将空腹血糖值大于10.00mmol/L者判定为糖尿病模型制作成功[3,4].2.2分组及处理取正常小鼠10只为正常对照组,取糖尿病小鼠50只,随机分为5个组,分别为糖尿病对照组、药物对照组及榛花大、中、小剂量实验组.实验期间各组小鼠均给予块料喂养,大、中、小剂量实验组每日分别灌服给予榛花浓缩液5.00,2.50,1.25mL/kg;药物对照组每日灌服给予盐酸二甲双胍1g/kg;糖尿病对照组和正常对照组每日灌服给予相应体积的蒸馏水.实验周期为3周.2.4数据处理应用SPSS10.0统计软件进行方差分析.3结果肝糖原经P

4、AS反应染色后,在光学显微镜下呈紫红色颗粒.正常对照组肝糖原颗粒含量丰富,染色深(图1);糖尿病对照组肝细胞糖原颗粒含量明显减少,染色浅(图2);药物对照组与大、中、小剂量实验组肝细胞糖原颗粒含量明显增多,染色较深(图3~图6),其中以大剂量实验组的变化最为明显,接近正常对照组.肝糖原定量统计分析结果表明,大、中、小剂量实验组肝糖原面积百分比与糖尿病对照组比较明显升高,有显著性差异(P<0.01,表1).表1肝糖原定量分析结果4讨论肝脏是糖代谢的主要器官,主要通过促进糖原合成、葡萄糖利用及抑制糖异生等途径使血糖降低,而肝脏的糖代谢主要是在胰岛素的诱导下完成的.四氧嘧啶性糖尿病小鼠体内胰岛

5、素水平明显下降,肝脏糖代谢出现紊乱,糖原合成降低,葡萄糖利用减少,糖异生加强,导致血糖升高.本实验组织化学染色结果表明,糖尿病对照组小鼠肝细胞内糖原颗粒含量明显减少,着色浅,提示糖尿病小鼠肝细胞合成糖原功能明显减弱,与文献报道相符[6].3周实验周期后,药物对照组及大、中、小剂量实验组肝糖原含量与糖尿病对照组相比较明显增多,着色也较深,其中大剂量实验组变化最为明显,接近于正常对照组,提示榛花能够改善糖尿病小鼠肝内糖代谢紊乱,增强肝细胞合成糖原的功能,从而降低血糖.【参考文献】[1]林兰,魏军平.中西医结合防治糖尿病回顾与展望[J].医学研究通讯,2000,29(6):49.[2]杨晓晖,张力,

6、吕仁和.中药降低血糖复方治疗实验性糖尿病研究进展[J].中国中西医结合杂志,1998,18(3):85.[3]朱愉,多秀瀛.实验动物的疾病模型[M].天津:科技翻译出版社,1997.252.[4]徐淑云.药理实验方法学[M].第2版.北京:人民卫生出版社,1991.1274.[5]陈啸梅,周文郁,彭俊云.组织化学手册[M].北京:人民卫生出版社,1982.72.[6]闵清,舒思洁,洪爱蓉,等.山茱萸对糖尿病小鼠血糖和组织糖原含量的影响[J].咸宁医学院学报,1999,13(1):12.

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