胡芦巴降脂活性部位的筛选

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1、胡芦巴降脂活性部位的筛选【摘要】目的对传统中药胡芦巴的降血脂有效活性部位进行初步分离和筛选,初步确认胡芦巴降血脂作用的活性部位。方法采用喂饲高脂饲料的方法建立大鼠高血脂模型;采用乙醇回流提取法分离得到胡芦巴总皂苷供试液;残渣挥干乙醇,加水采用超声波提取法得到胡芦巴多糖供试液;以胡芦巴水提液、总皂苷、多糖、辛伐他汀灌胃治疗;各给药组于第21天摘除眼球采血,测定高血脂大鼠的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。结果与模型组比较,胡芦巴水提液组、总皂苷组和多糖组的TG,TC,LDL-C明显降低(P<0.05~0.01),HDL-C

2、变化不大;胡芦巴水提液组的TG,TC,LDL-C降低更显著(P<0.01)。结论胡芦巴总皂苷和总多糖均有一定的降血脂作用,水提液降脂效果更为显著。【关键词】胡芦巴;高血脂;活性部位;总皂苷;多糖  高脂血症是动脉粥样硬化及心脑血管疾病的最重要的危险因素[1],极大危害着人类的健康。目前西药降血脂药物仍存在一定的副作用,例如肝脏功能损害、胃肠道功能紊乱、肌肉痛、横纹肌溶解症等[2]。因此,寻找一种安全有效的降血脂药是国内外心脑血管研究人员关注的焦点。  胡芦巴Trigonellafoenum-graecum系豆科蝶形花亚科植物胡芦巴的成熟干燥种子,又名香豆子,胡芦巴是一种集食用、药用

3、、香料、饲料、工业原料于一体的经济作物,是宁夏地道药材。国内外研究表明胡芦巴的水提物有很好的降血脂效果,但其降低血脂的活性部位还不明确。  因此,本课题主要是采用SD大鼠建立高血脂模型,初步考察并确定胡芦巴降低血脂的主要活性部位,为胡芦巴的深入研究和产品开发奠定基础[3]。  1材料与仪器  1.1动物清洁级SD大鼠60只,体质量180~220g,雌雄各30只,由宁夏医科大学动物实验中心提供,合格证号:SCXK(宁)2005-001。  1.2饲料基础饲料(由宁夏医科大学动物实验中心提供);高脂饲料由猪油10%,蛋黄15%,奶粉10%,黄豆15%,鱼肝油10滴/100g)与基础饲料配制而

4、成。  1.3试剂与仪器OLYMPUS.AU2700型全自动生化分析仪(日本),UV-2550型紫外可见分光光度计(日本岛津),AEu-210型电子分析天平(日本岛津),KQ-500E型超声波清洁器,RE-52AA型旋转蒸发仪。  1.4药物胡芦巴种子(由宁夏伊雪莲大药房提供),经宁夏医科大学药学院生药教研室鉴定为胡芦巴Trigonellafoenum-graecum的成熟干燥种子。辛伐他汀片剂(20mg,山东鑫齐药业有限公司,20090104,由宁夏银川胜利街古方药品超市提供)。  2方法  2.1供试液的制备  2.1.1胡芦巴种子的处理将胡芦巴种子洗净,文火炒至深褐色,粗粉碎后,过

5、10目筛。  2.1.2胡芦巴水提液供试液的制备取炒制的胡芦巴粗粉,用水煎煮3次,分别为60,45,30min,4层纱布过滤,合并滤液,水浴浓缩成640ml的药液,冷藏备用。  2.1.3总皂苷供试液的制备根据本课题组前期实验,选用总皂苷提取的优化工艺制备总皂苷供试液。取炒制的胡芦巴粗粉,加入11倍的75%乙醇,回流提取3次,120min/次,滤纸过滤,合并滤液,水浴浓缩至600ml,冷藏备用。  2.1.4多糖供试液的制备根据本课题组前期实验,选用多糖提取的优化工艺制备多糖供实液。取以上醇提后的残渣,挥干乙醇,加入25倍的水,在70℃下超声提取3次,45min/次,四层纱布过滤,合并滤

6、液,水浴浓缩至600ml,冷藏备用。  2.2动物分组将60只SD大鼠适应性喂养1周,称重并随机分为6组:正常对照组(对照组)8只,高脂饲料组(模型组)12只,胡芦巴水提液组(水提液组)10只,胡芦巴总皂苷组(总皂苷组)10只,胡芦巴多糖组(多糖组)10只,辛伐他汀组(阳性药组)10只。每组雌雄鼠各半。  2.3大鼠高血脂模型的建立阴性对照组以普通饲料喂养,其余5组以高脂饲料喂养。连续喂养4周后,每组随机抽取2只,摘除眼球取血,确定建模成功。  2.4治疗方法高脂模型建立成功后,各组采用灌胃法给药。于第30天起开始灌胃给药,连续治疗28d。  2.5血液标本的制备及检测于第28天,全部大

7、鼠摘除眼球取血,应用OLYMPUS.AU2700型全自动生化仪酶法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C),低密度脂蛋白(LDL-C)按Friede.

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