二甲苯对正常人外周血淋巴细胞sce频率的影响

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1、二甲苯对正常人外周血淋巴细胞SCE频率的影响【关键词】二甲苯类;淋巴细胞;姐妹染色单体交换　　［摘要］目的探讨二甲苯对正常人外周血淋巴细胞DNA的损伤作用。方法采用染色体分析技术，对体外培养的外周血淋巴细胞姊妹染色单体交换（SCE）频率进行观察。结果3.0、6.0mmol/L二甲苯组淋巴细胞中的SCE计数平均值分别为7.533±0.234、10.933±0.325，与对照组（2.800±0.242）比较，差异具有极显著性（t=14.084、20.085，P<0.001）。结论二甲苯对正常人外

2、周血淋巴细胞DNA有显著损伤作用。　　［关键词］二甲苯类;淋巴细胞;姐妹染色单体交换　　　　［ABSTRACT］ObjectiveToinvestigatethedamageofxyleneonDNAofhumanperipheralbloodlymphocytes.MethodsChromosomeanalysistechniqueatidexchange（SCE）frequenciesofin-vitro-culturebloodlympho-cyte.ResultsThefrequencie

3、sofSCEinxylenegroups（3.0mmol/L，6.0mmol/L）anperipheralbloodlymphocytesissignificant.　　［KEYI1640培养液（体积分数为0.10的小牛血清，10g/L庆大霉素，2mmol/LL-精氨酸，1mmol/L的丙酮酸钠）中连续培养4h后按照设定二甲苯浓度染毒培养。加入二甲苯后培养至24h，加入10mg/L5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU），继续避光培养48h，制片前3h加入PHA（终浓度为0.2mg/L）。常规气干法制片。

4、　　1.2.2分化染色及SCE计数采用夏家辉等［2］的方法进行姊妹染色单体分化染色。选择BrdU掺入后第二细胞周期分裂象［4］，油镜下进行SCE计数。每例样本随机分析30个中期分裂象，计算SCE平均频率，每一末端的交换算作一次交换，长臂或短臂中间的交换算作两次交换。采用SPSS12.0软件对结果进行t检验。　2结果　　对照组、二甲苯染毒各组SCE计数值分别为2.800±0.242，3.100±0.147，3.200±0.139，7.533±0.234，10.933±0.325。0.5、1.5mmo

5、l/L二甲苯染毒组与对照组相比差异无显著意义（t=1.061、1.435，P>0.05）;3.0、6.0mmol/L二甲苯染毒组与对照组相比SCE计数明显升高，差异具有极显著性（t=14.084、20.085，P<0.001）。　　3讨论　　二甲苯作为一种有机溶剂，在工业生产和实验室里有着广泛的应用，以往的动物实验研究结果表明，二甲苯的血液毒性和致突变性较小，这一结果是基于动物整体水平，主要观察染毒后动物行为改变及生理、生化指标的改变而得出［3］。随着检测技术的不断改进，实验水平的提高

6、，人们对于二甲苯的毒性作用有了新的认识，其对于造血系统、神经系统、生殖系统毒性作用的研究也在逐步深入。目前，二甲苯对外周血淋巴细胞毒性研究还未见报道，SCE频率可用来反映某个体细胞DNA损伤与修复的情况，是染色体不稳定性和早期染色体变化的灵敏指标［4］。本实验通过体外培养外周血淋巴细胞，在染色体水平上直接观察二甲苯对淋巴细胞的毒性作用。实验结果显示，即使在较低浓度（3.0mmol/L）下，二甲苯对体外培养的外周血淋巴细胞SCE频率的影响也很显著，而且随二甲苯浓度升高，淋巴细胞中SCE频率明显增加。

7、二甲苯对外周血淋巴细胞毒性作用机制尚未阐明，其是否与DNA共价结合形成加合物，在核酸内切酶的作用下进行切除修复，增加DNA的不稳定性从而导致SCE频率升高，或染色体畸变有关，还有待深入研究。此外，本实验研究的是二甲苯对体外培养细胞的毒性作用，没有涉及到体内代谢系统，二甲苯代谢产物对细胞毒性作用也尚待研究;由于二甲苯的脂溶性，其对细胞膜以及信号转导的影响也需要深入探讨。　　［