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1、不同采收期合欢皮与山合欢皮中总皂苷含量比较【摘要】:目的比较不同采收期合欢皮与山合欢皮中总皂苷的含量。方法采用分光光度法对不同采收期的合欢皮与山合欢皮中总皂苷含量进行测定。结果一年生合欢皮与二年生合欢皮总皂苷含量比较,P<0.05;二年生合欢皮与多年生合欢皮总皂苷含量比较,P>0.05;多年生合欢皮与多年生山合欢皮总皂苷含量比较,P<0.05。结论不同采收期合欢皮与山合欢皮中总皂苷的含量差异明显。【关键词】采收期 合欢皮 山合欢皮 总皂苷Abstract:ObjectiveToparethecontentofsaponininBarkofSilktreeAlbi
2、zziaeandBarkofSilktreeAlbizziaekaldoraderivedfromdifferentcollectionperiods.MethodSpectrophotometryinethecontentsofsaponin.ResultThecontentsofsaponininone-yearBarkofSilktreeAlbizziaeisdifferentfromteasmulti-yearBarkofSilktreeAlbizziae(P>0.05).Thecontentsofsaponininmulti-yearBarkofSilktreeA
3、lbizziaeisdifferentfrommulti-yearBarkofSilktreeAlbizziaekaldora(P<0.05).ConclusionThecontentofsaponininBarkofSilktreeAlbizziaeandBarkofSilktreeAlbizziaekaldoraderivedfromdifferentcollectionperiodsisquitedifferent. Key处显示最大吸收波长。由于合欢皮与山合欢皮所含皂苷均为三萜皂苷,且为齐墩果烷型[2],与香草醛浓硫酸加热反应生成物的最大吸收波长与齐墩果酸一致,故选
4、定齐墩果酸为标准对照品,540nm为测定波长。 2.2供试品溶液的制备 合欢皮与山合欢皮粉碎过40目筛,60℃恒温烘2h,置干燥器中备用。精密称取样品各2g,置索氏提取器中,加甲醇适量,回流提取至无皂苷反应(约7h),减压回收甲醇,用适量水溶解残渣,转移至分液漏斗中,乙醚脱脂,用水饱和的正丁醇萃取4次,合并正丁醇萃取液,减压回收正丁醇,残渣用少量甲醇溶解,过滤,滤液置10mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液。 2.3对照品溶液的制备 精密称定干燥至恒重的齐墩果酸适量,用甲醇制成每1mL含1.22mg的溶液,作为对照品溶液。 2.4标准曲线的制备 精密量取齐墩果酸
5、对照品溶液20、40、60、80、100μL,分别置于试管中,挥干;精密加入8%香草醛乙醇溶液0.5mL和72%硫酸溶液5mL,摇匀,置恒温水浴60℃加热10min,取出试管,置冰水浴中冷却15min。分别于540nm处测吸收光度值。以吸光度值为纵坐标,取样量为横坐标绘制标准曲线。其回归方程为:Y=7.52×10-3X-0.0244,r=0.9993。 2.5回收率测定 称取合欢皮样品2份,其中1份加齐墩果酸一定量,并依上法处理与测定,重复5次,其平均回收率为96.9%,RSD=1.69%,结果见表1。表1回收率试验结果(略) 2.6样品含量的测定 吸取合欢皮、山合欢皮供
6、试品溶液各50μL和对照品溶液40μL,分别置于试管中,挥干,各精密加入8%香草醛乙醇溶液0.5mL,72%硫酸5mL,摇匀,置60℃恒温水浴加热10min,取出试管,置冰水浴中冷却15min,以溶剂50μL代替供试品溶液的同样操作制备液为空白对照,在波长540nm处测定吸收度,计算,即得。结果见表2。表2不同采收期合欢皮与山合欢皮中总皂苷含量测定结果(略)注:与二年生合欢皮比较,*P<0.05;与多年生山合欢皮比较,#P<0.05 3讨论 本试验含量测定方法的选择是根据文献[2-3],利用合欢皮总皂苷均为三萜皂苷,且为齐墩果烷型,故采用硫酸-香草醛比色法测定合欢
7、皮总皂苷的含量,经检测,合欢皮总皂苷的最大吸收波长与齐墩果酸一致,故选定齐墩果酸为标准对照品。样品提取方法的选择是根据查阅的文献并结合一定的预试验,采用提取皂苷的通法,用甲醇提取、乙醚脱脂、正丁醇少量多次萃取得总皂苷。本试验采用比色法测定合欢皮中总皂苷的含量,操作简便,且具有较好的稳定性和重现性。 针对目前商品药材中合欢皮与山合欢皮混用的现象,采用比色法来测定合欢皮、山合欢皮总皂苷的含量。结果山东产二年生合欢皮与二年生山合欢皮、多年生合欢皮与多年生山合欢皮比较总皂苷含量均有显著差