拳参正丁醇提取物对大鼠心肌肥厚时钠钾及钙atp酶活性的影响

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1、拳参正丁醇提取物对大鼠心肌肥厚时钠钾及钙ATP酶活性的影响作者：黄志华，李良东，曾靖，林怀明，黄贤华【摘要】目的观察拳参正丁醇提取物对异丙肾上腺素(Iso)所致大鼠心肌肥厚的保护作用及其对Na+-K+-ATPase，Ca2+-ATPase，CK，LDH活性的影响。方法采用Iso1mg·kg-1·d-1，背部皮下注射，连续10d，建立大鼠心肌肥厚模型。造模第2天开始给予不同浓度的拳参正丁醇提取物或NS，连续14d，末次给药后禁食12h，称重，麻醉后断头取血，测定血清LDH的活性、心肌组织Na+-K+-ATPase，Ca2+-ATPase，CK及LDH的活性

2、。结果模型血清LDH的活性升高，心肌组织Na+-K+-ATPase，Ca2+-ATPase，CK及LDH的活性降低；与模型组相比，拳参正丁醇提取物治疗组血清LDH的活性降低，心肌组织Na+-K+-ATPase，Ca2+ATPase，CK及LDH的活性升高。结论拳参正丁醇提取物可通过提高Na+-K+-ATPase，Ca2+-ATPase的活性起抗心肌肥厚作用。【关键词】拳参正丁醇提取物；心肌肥厚；钠钾ATP酶；钙ATP酶拳参具有清热、镇惊、理湿等疗效。拳参通过95%的乙醇提取后，再依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，其正丁醇萃取部分即得拳参正丁醇提取物（P

3、olygonumBistorlaL.n-ButylAlcoholExtract，PBNA），主要成分为丁香苷、芦丁、儿茶素及MururinA［1］。有实验表明，拳参提取物具有抗心律失常［2］、镇痛［3］、中枢抑制［4］、心肌缺血保护［5］等作用。心肌肥厚是以心肌细胞体积增大和蛋白含量增多为主要特征的代偿反应，是对各种心血管刺激因子的适应反应，但持续的心肌肥厚会导致心衰而威胁生命。心肌肥厚的发生是许多因素共同参与的结果。本课题组前期研究表明，PBNA可通过增强抗氧化作用及改变血管活性物质合成而起抗心肌肥厚作用［6，7］。本实验在此基础上进一步探讨PBNA的

4、抗心肌肥厚机制是否与Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性及细胞代谢有关。　　1材料与仪器　　1.1动物　　清洁级SD大鼠，雄性，体质量200～250g，购自江西中医学院［动物合格证号：SCXK（赣）2005-0001］。　　1.2药品和试剂　　拳参正丁醇提取物（由沈阳药科大学中医药学院植化教研室提供）；盐酸异丙肾上腺素（Iso）注射针剂（上海禾丰制药有限公司，批号：H31021344），Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、CK、LDH检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。　　1.3仪器　　ZS83-1型内切式组织匀浆器（

5、浙西机械厂），赛多利斯BS224S型电子天平(北京赛多利斯仪器有限公司)。　　2方法　　2.1造模与给药方法　　雄性SD大鼠32只，体质量200～250g，随机分成4组，每组8只，分别为：对照组、心肌肥厚模型组、0.5mg/kgPBNA组、1mg/kgPBNA组。大鼠背部皮下注射Iso1mg/kg/d，连续10d，制作心肌肥厚模型，对照组给予等体积生理盐水。于造模后第2天开始分别灌胃给以1mg/kg，0.5mg/kg的PBNA，连续14d，对照组和心肌肥厚模型组大鼠给予相同体积的NS灌胃。　　2.2Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、CK

6、、LDH活性测定　　末次给药后禁食12h，水合氯醛(0.35g/kg)麻醉，腹腔静脉取血2ml，室温静置1h，4℃，2000r/min，离心10min，分离血清，于-80℃保存。取出心脏，称取500mg左心室心肌组织冰浴下制成10%匀浆，4℃，3500r/min，离心10min，取上清于-80℃保存。严格按试剂盒说明，ATPase活性测定采用定磷法，以每克蛋白每小时分解ATP产生的无机磷量表示酶活性，产生1mmolPi为1个活性单位U，蛋白定量采用考马斯亮蓝法，以牛血清白蛋白为标准。比色法测定血清CK及心肌组织CK、LDH的活性。　　2.3统计学分析　　

7、实验数据采用Graphpadprism4.0软件进行单因素方差分析，结果以柱状图表示，P<0.05认为有统计学意义。　　3结果Iso模型组与对照组相比，血清LDH的活性升高（P<0.001），心肌组织Na+-K+-ATPase（P<0.05）、Ca2+-ATPase（P<0.01）、CK（P<0.001）及LDH（P<0.001）的活性降低；与模型组相比，拳参正丁醇提取物治疗组血清LDH的活性降低（P<0.01），心肌组织Na+-K+-ATPase（P<0.05）、Ca2+-ATPase（P<0.00

8、1）、CK（P<0.01）及LDH（P<0.05）的活性升高。结果见