大鼠心肌肥厚时血管活性物质的变化与拳参正丁醇提取物的关系

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1、大鼠心肌肥厚时血管活性物质的变化与拳参正丁醇提取物的关系作者：李良东，周琴，黄志华，曾靖*，张乡城，汪有彪【摘要】目的观察拳参正丁醇提取物对异丙肾上腺素（Iso）所致大鼠心肌肥厚的保护作用及其对ANGⅡ、ANP及ET含量的影响。方法采用Iso1mg·kg-1·d-1，背部皮下注射，连续10d，建立大鼠心肌肥厚模型。造模第2天开始给予不同浓度的拳参正丁醇提取物或NS，连续14d，末次给药后禁食12h，称重，麻醉后断头取血，取心脏称重后计算左心重量参数；放免法测定血浆ANGⅡ及心肌组织ANP和ET的含量。

2、结果模型组左心室重量参数明显提高，血浆ANGⅡ及心肌组织ET含量升高、心肌组织ANP含量降低；与模型组相比，拳参正丁醇提取物治疗组左心室重量指数下降，血浆ANGⅡ及心肌组织ET含量下降、心肌组织ANP含量升高。结论拳参正丁醇提取物对Iso所致大鼠心肌肥厚具有保护作用，其作用机制与升高扩血管物质ANP及降低收缩血管的活性物质ET和ANGⅡ的水平有关。【关键词】拳参正丁醇提取物；异丙肾上腺素；心肌肥厚；血管活性物质拳参具有清热、镇惊、理湿等疗效。拳参通过95%的乙醇提取后，再依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇

3、萃取，其正丁醇萃取部分即得拳参正丁醇提取物（PolygonumBistorlaL.n-ButylAlcoholExtract，PBNA），主要成分为丁香苷、芦丁、儿茶素及MururinA［1］。有实验表明，PBNA具有抗心律失常［2］、镇痛［3］、中枢抑制［4］、心肌缺血保护［5］等作用。心肌肥厚是以心肌细胞体积增大和蛋白含量增多为主要特征的代偿反应，是对各种心血管刺激因子的适应反应，但持续的心肌肥厚导致心衰而威胁生命。心肌肥厚的发生是许多因素共同参与的结果，其中血管活性物质就起着非常重要的作用。本实

4、验利用Iso背部皮下注射构建大鼠心肌肥厚模型，研究拳参正丁醇提取物对Iso所致大鼠心肌肥厚的保护作用及其与血管活性物质ANGⅡ、ANP及ET含量变化的关系。　　1材料与仪器　　1.1动物清洁级SD大鼠，雄性，体质量200～250g，购自江西中医学院，动物合格证号：SCXK（赣）2006-0001。　　1.2药品和试剂拳参正丁醇提取物（由沈阳药科大学中医药学院植化教研室提供）；盐酸异丙肾上腺素（Iso）注射针剂（上海禾丰制药有限公司，批号：H31021344）。ANGⅡ、ET及ANP放免试剂盒购自北京福

5、瑞生物工程公司。　　1.3仪器SN-695型智能放免测量仪（上海核福光电仪器有限公司），ZS83-1型内切式组织匀浆器（浙西机械厂），赛多利斯BS224S型电子天平(北京赛多利斯仪器有限公司)。　　2方法　　2.1动物分组雄性SD大鼠32只，随机分成4组，每组8只，分别为：对照组,心肌肥厚模型组,0.5mg/kgPBNA组,1mg/kgPBNA组。　　2.2造模与给药方法大鼠背部皮下注射Iso1mg·kg-1·d-1，连续10d，制作心肌肥厚模型，对照组给予等体积生理盐水。PBNA组于造模后第2天开始

6、分别灌胃给以1mg/kg，0.5mg/kg的PBNA，连续14d，对照组和心肌肥厚模型组大鼠给予相同体积的NS灌胃。　　2.3左心室重量参数的测定末次给药后禁食12h，称体质量，水合氯醛(0.35g/kg)麻醉，取出心脏，去除结缔组织、心房和右心室，用生理盐水洗净，吸干后称左心室重量，计算,左心室重量参数=左心室重(mg)／体质量(g)。　　2.4血浆ANGⅡ、心肌组织ET和ANP含量测定大鼠麻醉后，腹腔静脉取血5ml，迅速注入放在冰水浴的酶抑制剂抗凝管中，混匀，4℃，2000r·min-1，离心5m

7、in，分离血浆，于-80℃保存。取500mg左心室心肌组织冰浴下制成10%匀浆，4℃，3500r·min-1，离心10min，取上清于-80℃保存。严格按试剂盒说明，用放免法测定血浆ANGⅡ、心肌组织ET和ANP含量。　　2.5统计学分析实验数据采用Graphpadprism4.0软件进行单因素方差分析,结果以柱状图表示，P<0.05认为有统计学意义。　　3结果　　如表1所示，Iso模型组与对照组相比，左心室重量参数明显增加(P<0.001)，血浆ANGⅡ(P<0.01)及心肌组织E

8、T(P<0.001)含量升高、心肌组织ANP含量降低(P<0.01)。与模型组相比，PBNA治疗组左心室重量指数下降，其中高剂量组有统计学差异(P<0.05)；血浆ANGⅡ含量下降，低剂量组(P<0.001)及高剂量组（P<0.01）均有统计学差异；心肌组织ANP含量升高，低剂量组有统计学差异(P<0.05)；心肌组织ET含量下降，低剂量组(P<0.001)及高剂量组（P<0.01）均有统计学差异。表1PB