羟基积雪草苷对离体动脉条的舒张作用及其机制

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1、羟基积雪草苷对离体动脉条的舒张作用及其机制作者：白纪红赵日红吕秋军马宪梅【摘要】目的探讨羟基积雪草苷（madecassoside，MC）的舒张血管作用及其机制。方法采用离体大鼠胸主动脉张力实验观察MC的舒张血管作用。结果MC使去甲肾上腺素（NE）和氯化钾（KCl）收缩动脉条的量效曲线右移，最大收缩力降低；并对NE诱导的细胞内Ca2+释放所引起的收缩有明显的抑制作用；但去除血管内皮细胞后MC反而使动脉条收缩进一步增强；在有一氧化氮合酶(NOS)抑制剂存在的情况下，其抑制NE收缩的效应消失；对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）收缩动脉条的量效曲线无明显影响。结论MC有明显的舒张血管

2、作用，表现为钙拮抗活性，以抑制细胞内Ca2+释放为主；且通过内皮细胞发挥作用，并与一氧化氮（NO）合成通路有密切的关系。【关键词】羟基积雪草苷去甲肾上腺素一氧化氮合酶抑制剂内皮细胞胸主动脉中药积雪草是伞形科植物积雪草Centellaasiatica(L.)Urban的干燥全草，为各版《中国药典》收载品种，其主要活性成分为三萜皂苷类。有报道积雪草总苷具有抗溃疡［1］、治疗皮肤疾病［2］、抗焦虑［3］、免疫调节和诱导凋亡［4，5］等多种作用。　　羟基积雪草苷(madecassoside，MC)是积雪草三萜皂苷类的主要成分之一。有关MC单体对心血管方面的作用未见报道。在本实

3、验室前期研究中发现MC对NE预收缩的离体大鼠胸主动脉条有一定的舒张作用，但其作用机制尚不明确。利用离体动脉条模型，进一步探讨MC舒张血管的作用及其机制，为开发此类化合物提供一定的实验依据。　　1材料　　MC（军事医学科学院放射与辐射医学研究所样品库）；重酒石酸去甲肾上腺素注射液（天津金耀氨基酸有限公司，批号0403311）；氯化乙酰胆碱（AcetylcholineChloride，ACh，Sigma公司分装）；血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ，Sigma公司，批号064K51201）；L-N-硝基精氨酸甲酯（Nω-Nitro-L-argininemethyles

4、terhydrocholoride，L-NAME，Sigma公司，批号124K1212）；其它试剂均为分析纯，由军事医学科学院供应科提供。Krebs-HenselEit（K-H）液（mmol·L-1）配方：NaCl133，KCl4.75，MgCl21.25，CaCl21.5，NaHCO325，葡萄糖11.1，pH值7.4；无钙K-H液为正常的K-H液无CaCl2成分，加入0.01mol·L-1EGTA。　　清洁级adLab生物医学信号采集处理系统（南京美易科技有限公司）。　　2方法　　2.1大鼠胸主动脉条的制备［6］取大鼠，麻醉后开胸迅速取出胸主动脉，将其剪成4～9m

5、m的环段，置于含10mlK-H液的浴槽内，保持37℃并持续通入体积分数为95%O2和5%CO2的混合气体，前负荷为1.0g，平衡1～2h后开始实验，肌条张力通过张力换能器记录于生物医学信号采集处理系统。　　2.2对NE，KCl和AngⅡ收缩曲线的影响累积浓度法作NE（10-9～10-5mol·L-1）量效曲线，K-H液反复冲洗动脉条至张力恢复正常，加入MC作用10min，在有MC存在的情况下重复上述NE的量效曲线，前后对照统计，MC分为0.02，0.04，0.08，0.16mmol·L-1剂量组。同法作KCl（0.01～0.16mol·L-1）和AngⅡ（10-11～

6、10-6mol·L-1）量效曲线。　　2.3对NE诱导动脉条两相收缩的影响标本于K-H液中平衡1～2h，无钙K-H液反复冲洗30min后，加入NE10-7mol·L-1引起动脉条第一相收缩，收缩稳定后加入CaCl2，以恢复无钙K-H液中的Ca2+浓度（1.5mmol·L-1），引起第二相收缩，直至收缩达高峰坪值，两相收缩幅度之和作为100%，分别计算两相收缩所占收缩率。无钙K-H液反复冲洗标本，待其张力恢复正常后，加入MC作用10min，在有MC存在的情况下重复上述过程，前后对照统计。MC分为0.02，0.04，0.08mmol·L-1剂量组。　　2.4对内皮完整动脉

7、条及去内皮动脉条作用的比较机械摩擦法去除动脉条内皮细胞，加入ACh10-6～10-4mol·L-1检测内皮细胞活性，无内皮动脉条加入ACh后，无舒张效应。同一动物获得的动脉条分别制作保留内皮与去内皮两组标本，作为平行对照。两组标本分别加入NE（10-7mol·L-1）使动脉条收缩达高峰坪值（Emax），累积浓度法加入MC0.02，0.04，0.08mmol·L-1，记录各浓度所对应的收缩幅度（E），采用(Emax-E）/Emax×100%分别计算各浓度MC的收缩抑制率。　　2.5一氧化氮合酶抑制剂对MC舒血管作用的影响［7］加入NE（10-6mol·