经皮冠状动脉内支架植入术对外周血单核细胞nf

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1、经皮冠状动脉内支架植入术对外周血单核细胞NF作者：王晖，杨志健，黄峻，朱铁兵，王连生，曹克将【关键词】,外周血单核细胞ActivationofNFκBinducedbycoronarystentplacementinperipheralbloodmononuclearcells　　【Abstract】AIM:ToinvestigatetheeffectofcoronarystentingontheactivationofNFκBinperipheralbloodmononuclearcells(PBMC).METHODS:Fiftypatientsentgroupand22

2、incoronaryangiography(CAG).ThelevelsofNFκBactivitypreproceduralandduringthedaysafterstentplacementinedusingelectrophoresismobilityshiftassay(EMSA).RESULTS:ThelevelsofNFκBactivityinstenttreatmentgroupfrompreproceduraltothe4thhour,1st,2ndand3rddaysafterstentplacementaybeinvolvedinthestentinj

3、uryofthetargetedvesselononuclearcells;NFkappaB;stents　　【摘要】目的：探讨经皮冠状动脉内支架植入术是否激活外周血单核细胞(PBMCs)中核因子κB(NFκB)活性的表达.方法：选择NFκB基线时呈阴性反应的稳定型心绞痛患者50例，其中单纯造影组22例，支架治疗组28例.分别于冠脉造影或支架术后4h及术后第1，2，3d留取全血抗凝标本；采用凝胶电泳迁移率实验(EMSA)测定PBMCs中NFκB的活性.结果：支架术程中NFκB活性呈动态变化，于术后1dNFκB活性显著性升高呈阳性反应，术后2dNFκB活性达峰值，术后3dNF

4、κB活性有下降，但仍保持在高水平表达状态.而造影组患者则没有NFκB活性变化.结论：冠状动脉内支架术激活外周血单核细胞NFκB活性.　　【关键词】外周血单核细胞；NFκB；支架　　0引言　　经皮冠状动脉介入治疗(percutaneouscoronaryintervention,PCI)能迅速开通罪犯血管，恢复心肌供血、挽救心肌、挽救生命；但对于不同病例仍有30%~50%的再狭窄率［1］.病理研究发现支架内再狭窄发生率与PCI术后靶血管处异常增多的炎症介质和炎细胞浸润相关［2］.而细胞因子、趋化因子等炎症介质的合成、分泌受核因子κB(NFκB)等转录因子调控［3］.因而了解P

5、CI术程中NFκB的活性变化，可能对阐明PCI的炎症机制具重要意义.为此，我们探讨了冠状动脉内支架术血管急性损伤期周围血单核细胞(PBMC)NFκB的活性变化.　　1对象和方法　　1.1对象　　选择在我院冠心病诊治中心行冠状动脉造影术或支架术的稳定型心绞痛患者50例.按是否行冠状动脉内支架植入术分为支架治疗组和单纯造影组.所有患者于冠状动脉造影术前NFκB活性测定呈阴性.排除标准：①急性心肌梗死、不稳定性心绞痛伴肌钙蛋白水平升高；②严重的心脏瓣膜疾病及风湿、类风湿活动；③心肌炎，心肌病，明显的肝脏和肾脏疾病伴肝或肾功能不全；④近期感染性疾病.　　1.2方法　　1.2.1冠状

6、动脉造影和支架术采用Judkins法经右股动脉按常规方法进行.术前24h口服氯吡格雷（波立维）300mg.支架术前即刻静脉推注或股动脉套管内注射肝素6000～8000U(按公斤体质量计算)；本研究中所有患者均经球囊预扩张后植入支架.手术成功标准：残余狭窄＜30%，TIMI3级.　　1.2.2血液标本收集分别于冠状动脉造影和支架术术前，术后即刻，4h，1，2，3d留取全血抗凝标本，进行PBMC提取.　　1.2.3PBMCNFκB活性测定　　1.2.3.1主要试剂［γ32P］ATP放射性摩尔活度:185PBq/mol，体积活度370GBq/L，2)，NFκBconsensuso

7、ligo及T4多核苷酸激酶(Promega公司提供).　　1.2.3.2核蛋白提取及浓度测定参照SchrEiber等［4］方法.简述如下：初步提取的PBMCs经PBS洗涤后，加缓冲液A(bufferA)，冰上静置20min，加入NP40裂解离心，取沉淀再加缓冲液C(bufferC)悬浮混匀，高速离心收集上清液中的核蛋白并进行蛋白浓度测定.　　1.2.3.3凝胶电泳迁移率实验(EMSA)①在T4激酶作用下，37℃将［γ32P］ATP标记于NFκB寡核苷酸上；②加入核蛋白提取物(10g/L)室温20℃下孵育20min；