资源描述：
《hplc法测定五黄膏中没食子酸的含量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、HPLC法测定五黄膏中没食子酸的含量【关键词】五黄膏;没食子酸;高效液相色谱法;含量测定 Abstract：ObjectiveTosetupamethodfordeterminingthecontentofgallicacidinethodsHPLCseparationedbygradientelutingethanol-0.1%phosphoricacidatthefloL/min.Thedetection.ResultsThelinearrangeofgallicacidethodishighlyeffective,quickandsensitive,andsuit
2、ableforqualitycontrolof20A检测器,SIL-20AC自动进样器,CTO-20A柱温箱,LC-Solution化学工作站。 没食子酸对照品(批号110831-200302,纯度为99.1%)由中国药品生物制品检定所提供;五黄膏(批号060832、060833、060834、060835、060836、060837)由北京双吉制药有限公司提供。甲醇为色谱纯;其他试剂均为分析纯。 2方法与结果 2.1色谱条件 SHISEIDOCAPCELLPAKC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按表1
3、中的规定进行梯度洗脱。检测波长为270nm,流速1.0mL/min,进样量10?L。表1梯度洗脱表 2.2空白试验 按处方中药味比例,配制不含五倍子的群药,按其工艺制成空白制剂(由北京双吉制药有限公司提供),再按供试品溶液的制备方法制备并测定,色谱图见图1。表明阴性样品溶液在与没食子酸对照品相同保留时间处未显色谱峰,故认为无干扰。 2.3对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对照品适量,加50%甲醇制成每1mL含60?g的溶液,作为对照品溶液。 范围内线性关系良好。 2.6精密度试验 精密吸取同一供试品溶液(批号060832)10?L,注入液相色谱仪,按上述色谱
4、条件测定。重复测定6次,没食子酸峰面积RSD=0.25%。 2.7稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液(批号060832)10?L,分别于配制后0、4、8、12、24h测定,测得峰面积RSD=0.27%,表明供试品溶液在24h内基本稳定。 2.8重复性试验 取同一批样品(批号060832)6份,分别按样品测定法测定,求得RSD=0.94%,结果表明方法重复性良好。 2.9加样回收率试验 精密称取已知含量的同一批样品(批号060832,6.317mg/g)0.25g,分别精密加入没食子酸对照品溶液(0.06072mg/mL)25mL,再精密加入50%甲醇25mL,
5、按上述供试品溶液的制备方法制备及上述色谱条件测定,计算回收率。结果见表2。 2.10样品的测定 在批号为060833、060834、060835、060836、060837的5批样品中没食子酸含量分别为6.6、6.6、5.3、6.4、6.4mg/g。 表2加样回收率试验结果 3讨论 因为五黄膏中的五倍子为原粉入药,直接发挥药效,所以供试品溶液提取方法未选择测定水解后的没食子酸,而选择直接提取进行测定。又因是软膏剂,基质较多,影响色谱峰的重现性,故选择了梯度洗脱的方法。 供试品溶液的提取方法,考察了甲醇和50%甲醇为溶剂,超声和回流提取30、60、90min,结果
6、表明,采用50%甲醇为溶剂,回流提取60min的方法,提取较为完全。【参考文献】[1]国家药典委员会.国家药品标准——新药转正标准(第10册)[S].北京：人民卫生出版社,1997.40.
