无醛固定液在病理技术中的应用价值

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1、无醛固定液在病理技术中的应用价值聂贵军(吉林省敦化市中医院病理科133700)【摘要】目的探究无醛固定液在病理技术中的应用价值。方法随机在我院肿瘤科室选取6例肿瘤病人的肿瘤组织和正常组织块，装入埋盒中，放入甲醛固定液和无醛固定液中进行固定，脱水、埋、切片、染色。其中3例乳腺癌病例应用原位杂交。结果无醛固定液固定的6例标木，在切片中感觉切片厚薄均匀，组织块软硬适中，连续性比有醛固定液好。常规HE染色效果良好，细胞核浆相对于有醛固定液其形态清晰完整，对比明显。结论无醛固定液在病理技术中的应用价值比甲醛固定液要高，值得在临床检查中进行应用。【关键词】无醛固定液病理技术组织固定技术【中图分类号】R

2、452【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2014)06-0007-02组织固定是病理技术工作的关键步骤，直接决定分子病理检测和常规染色效果项目的实验结果［1］。以前我们的病理科普遍都一直使用4%中性甲醛作为常规组织固定液，然而，我们都知道甲醛是一种具有强烈刺激性的挥发性液体，不仅污染环境，而且对我们人体的健康存在着很大的危害。因此我们也一直探寻者能够找到一种固定液能够替代甲醛固定液，并且在病理技术上比甲醛固定液的效果更好，经过多年的努力我们研制出一种无醛固定液。无醛固定液是一种新型的组织固定液，因其不含甲醛，对人体无伤害、环境无污染，是病理技术工作中理想的固定液。木文就无醛固

3、定液对不同组织的固定效果进行分析，以验证其取代甲醛的可行性。1.资料和方法1.1一般资料随机选取我院肿瘤手术室送检的新鲜标木6例，其中乜括1例结肠癌患者，2例乳腺癌患者，2例淋巴瘤患者以及1例肝癌患者。我院使用的是由哈尔滨格林标本技术开发有限公司研发的无醛固定液。抗体包括:PR、ER及HER2（Roche公司），CK18、CD20、CDX2、LCA、CD79a及由福州迈新生物技术开发冇限公司提供的bcl-2,HER2探针和Vvsis原位杂交试剂盒。1.2方法1.2.1检测方法分别切取肿瘤组织及瘤旁正常组织各2份，将其切成2cm×lcm×0.32cm人小的组织块，放入

4、包埋盒中，分别用无酸固定液（实验组）和4%中性甲醛固定液（对照组）固定50d,后进行常规脱水、透明、浸蜡和包埋，苏中环保型无醛固定液固定的组织用生物组织标本制备套液中的生物组织标本制备脱水液、生物组织标本制备无苯透明液、生物组织标本制备脱水液进行脱水和透明。待所有标本制备完成之后，统一切片进行免疫组化染色，两组均O.Olmol/L柠檬酸盐缓冲液抗原修复5min,1.2.2免疫组化检测乳腺浸润性都导管癌进行PR和ER检测；结肠腺癌进行CK20和CEA检测；肝腺癌进行Her-2和CK8/18检测；淋巴瘤癌进行CK5/6检测；正常淋巴结进行LCA和CD20检测。反应结果判断标准参照许良中等[2]

5、建议，采取单盲法由2位初级病理医师初步比较，最后由2位高级职称病理医师审核，1.3统计方法将笔者在实验过程中获得的数据输入spssl6.0统计学软件中进行处理。其中计数资料采用卡方检验。若检验结果p<O.O5,说明两种不同的病例技术之间差异具有统计学意义。1.结果在实验过程中发现，无醛固定液固定的6例标本，在切片中感觉切片厚薄均匀，组织块软硬适中，连续性比有醛固定液好。常规HE染色效果良好，细胞核浆相对于甲醛固定液其形态清晰完整，对比明显。结肠癌病例（CK18、CDX2和LCA）、乳腺癌病例（ER、PR和HER2）、淋巴瘤病例以及肝癌病例行免疫组化染色。染色结果显示无醛固定液固定的标

6、本组织细胞要比有醛组织液固定的标本组织抗原性保存要好，阳性结果定位准确，背景较为清晰。淋巴瘤病例均行FISH检测HER2基因扩增状态，检测结果显示细胞核结构完整排列紧密，红色和绿色荧光信号较好。表1比较两组标本中经1、5、10、15、20d染色较好的结果比较（例，％）分组n1〜20d20〜50d>50无醛固定液固定法6366冇醛固定液固定法6345P值->0.05<0.05<0.051.讨论随着医学技术的飞速发展,学科之间相互渗透和影响，很多新的病理仪器和技术不断涌现，我国病理技术有着明显的变化,大量新方法、新技术、新仪器的成用极人提高了病理技术水平，使我们对病理的

7、认识更加透彻。根据不同固定液会对组织的穿透能力不同，会使细胞内的低分子质量物质、蛋白质、脂类、黏多糖和核酸物质的丢失，而良好的固定液可以避免这一情况的出现增人伸缩性和弹性度、使组织细胞的抗原性得到冇例的保存。在过去一段吋间甲醛一直是用于固定组织的标准固定液。甲醛固定液具奋能长期保存组织，价格低廉，能进行各种特殊染色，保存的组织形态良好，进行抗原修复后的免疫组化染色结果可靠等优点临床上多用于其进行固定。但随着医学的进步和科