离心洗涤对精子形态的影响

《离心洗涤对精子形态的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、离心洗涤对精子形态的影响.L.编辑。作者：梁琳，赵晓曦，王丽岩，宋静慧，陈秀娟【摘要】目的探讨常规精子形态学染色中离心洗涤步骤对分析结果的影响。方法47例人精液标本进行常规检测密度及活力后，分别在离心前后涂片，应用快速苏木素-伊红染色法进行染色，检测精子头部、体部、尾部畸形率。对比精子畸形指数(SDI)和畸形精子指数(TZI)是否受到离心洗涤的影响。结果离心洗涤后的精子头部畸形率和正常精子率较离心前直接涂片无显著差异，体部畸形率、尾部畸形率、SDI、TZI各指数在离心前后的差异均有统计学意义。不经过离心洗涤精浆而直接采用ethodsSem

2、enanalysesanualfor47subfertilemen，filmpreparationbeforeandaftercentrifugateityratioofspermhead,body,tailandSDI,TZI.ResultsThediversityratioofdeformedheadandnormalspermhavenosignificantdifferencebeforeandaftertheity，SDI，TZIhavedisparity，andthedifferencehavestatisticalsigni

3、ficance.Thedirectfilmpreparationremendbyatterafterstaining,butdidn’tinfluenceanalyses.ConclusionTheseresultsindicatethatspermorphologyanalyseshasimpactonSDIandTZI.Buthavenoinfluenceontheratioofeumorphismsperm.Thedirectfilmpreparationisapplicableforthenon-severityoligosper

4、matismandthespecimenofhypo-viscidity.　　[Key;centrifugate;orphology;staining　　在不孕夫妇中，男性因素导致的不孕约为25%～40%。常规精液分析在评价精子质量方面应用广泛，精子形态作为精液参数的组成部分，是反映精液质量的重要指标[1]。精子功能与精子的正常形态密切相关。而畸形精子的增加，也是男性生育力受损的标志之一。正常形态率越低精子凋亡率越高。将精液常规与精子形态学分析相结合，有助于提高男性不育症的诊断率[2]。　　精子形态在评估精子受精能力及预测辅助生殖技术治疗

5、结局方面，也发挥了很大作用。精子形态越差，其自然妊娠的能力就越低。由于各实验人员所采用的标准及判断不一致，在对精子形态分析方面结果出入颇大[3]。但是对精子形态做出准确的评估，对需要采用辅助生殖技术来满足其生育要求的畸形精子症患者非常重要，有助于找到适合的精液处理方法及行辅助生殖技术治疗时选择最佳的受精方式[4]。本研究通过统计精子化验中各项畸形指标，为其形态学检测的标准化提供思路。　　1资料与方法　　1.1精液标本47例来自本中心就诊的男性不育患者，年龄在24～39岁，禁欲2～7天，手淫法取精。精液常规检查参考世界卫生组织《精液分析手册

6、》(第4版)。入选标本的精子密度在(59.42±39.67)×106/ml。　　1.2实验方法　　1.2.1标本制备精液标本在常规分析后直接涂片，若密度检查小于20×106/ml，取10～20μl精液直接涂片;若密度高于20×106/ml，取5μl精液在载玻片上拉薄，空气中自然干燥。同份标本加入5倍体积的生理盐水，在800g下离心10min去除精浆，轻弹试管使离心后的精子团重新悬浮于盐水中，取20～40μl涂片。光镜下观察精子密度，以无精子重叠为准，过稀或过密需重新涂片。　　1.2.2标本染色方法采用快速苏木素-伊红染色法(HE)染色[5

7、]，干燥后的涂片在90%酒精中固定30min，流水冲洗后将涂片在苏木素中染5min，再次冲洗后在伊红溶液中染色5min，流水冲洗玻片后室温干燥。在油镜视野下观察并进行计数。　　1.2.3分类标准采用Kruger严格精子评分标准，每份标本连续计数200个精子，分别记录头部、体部、尾部畸形精子的百分率和正常形态精子比率。其中头部畸形中将大头畸形和小头畸形分别标记。最后统计精子畸形指数和畸形精子指数。　　1.3统计学方法采用SPSS11.0统计软件进行分析，统计资料以均数±标准差(x±s)表示，各项畸形以百分率表示，均数比较用t检验。P<

8、0.01为差异有统计学意义。　　2结果　　47例非严重少精患者在离心前后分别计数头、体、尾部畸形精子比例，结果如表1所示。正常形态精子比率在离心洗涤前后无显著差异(P>0.01)。头部畸