练习25dna重组技术的基本工具冯小勇

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1、2016〜2017学年度高二生物（选修）随堂练习二十五DNA重组技术的基本工具组卷：冯小勇审核：陈红霞班级姓名学号（重组技术的操作工具重组技术的基本工具是、、。限,其含义是。连接酶一一“分子缝合针”接酶作用于两个DNA片段，连接形成（化学键），其中E-coliDNA奎合DNA的，T4DNA连接酶既可缝合DNA的黏性末端，又可［A的o注入受体细胞的载体一一“分子运输车”的种类。它是一种裸露的、结构简单、独立于细菌染色体之外，并能够自我DNA分子。菌体的衍生物。物痫毒。仁的特点在细胞內0个或多个切割位点，便

2、于供源DNA插入。基因，供重组DNA的鉴定和选择。笑突破A重组技术的工具之限制酶酶及其切割方式生物（细菌和霉菌）质：蛋白质匕作用，所以可重复利用目于DNA的切割获取目的基因和运载体的切割t异性，即限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，特定位点错切：产生两个相同的黏性末端式平切：形成无黏性末端的平口提醒：①切割的化学键为键。②在切割目的基因和运载体时要求用同一种限制酶，目的是产生③将一个基因从DNA分子上切割下来，需要2个限制酶，同时产生A2.限制酶在原核生物中的作用原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但

3、是，生物在长期的进化过程中形奴的防御机制，以防止外來病原物的佼害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源［会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中JDNA使之失效，从而达到保护自身的目的。3.限制酶不切割自身DNA的原因细菌中限制酶之所以不切断自身DNA，是因为微生物在长期的进化过程中形成］防御机制，对于外源入侵的DNA可将其降解掉。生物在长期演化过程中，含有某种其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化醮将甲基转毛列的碱基上，使限制酶不能将其切开

4、。问题思考：当某种限制酶识别的特定序列中发生基因突变时，该限制酶还能货吗？C二、DNA连接酶分类：根据酶的来源不同，可分为两类：一类是从巾分离得到的，称为:另一类是从中分璋为O两种DNA连接酶的比较：（1）相同点：都缝合键。（2）区别：E•coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的之间连接起来，链DNA片段之间进行连接；而T.DNA连接酶既可以“缝合”双链Df的，又可以“缝合”双链DNA片段的。但连接平末端&较o三、目的基因的运输工具——载体1.目的基因的运输工具（1）载体是基因运输工具，在基因操作

5、过程屮，使用载体有两个目的：一是用它作＞将;二是利用它在宿主细胞内对0的基E制。（2）种类：质粒（既存在于细菌中，也存在于真核生物酵母菌中）、入增物、动植物病毒。DNA（萁中质粒为环状DNA分子）决体必须具备三个条件：,以便进行筛选。问题长说，天然载体往往不能同时具备载体必须具备的条件，所以在基因工程屮盂要根据g,对载体进行人工改建。现在所使用的质粒载体儿乎都是经过改建的。况体必须具有多个限制酶切点，而&每种酶的切点最好只有一个。因为某种限制性内iij单一切点，若载体上有一个以上的酶切点，则切割重组后可

6、能丢失某些片段，若丢z制起点区，则进入受体细胞后便不能自主a制。一个载体若只有某种限制酶的一个g后既能把环打开接纳外源DNA片段，又不会丢失自己的片段。〒菌、枯草杆菌、土壤农杆菌等细菌中都有质粒。它存在于细菌的细胞质中，上面一L百个基因，控制着细菌的抗药性、固氮、抗生素合成等性状。由于土壤农杆菌很容田胞，使细胞生有瘤状物。所以科学家培育转基因植物时，常常用土壤农杆菌屮的质与细胞膜上载体的区别，两者的化学本质和作用都不相同。工程叙述正确的是（）3在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成是在细胞内完成的iH乍

7、为运载体［）、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料酶的说法不正确的是（）泛存在于各种生物屮，微生物屮很少分布4酶只能识别一种特定的核昔酸序列S制酶切割DNA的切点不同勺作用主要是用來提取目的基因不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体（）立B、噬菌体C、动植物病毒D、细菌核区的DNA正确的是（）;酶最初是从人体细胞中发现的勺切口一定是GAATTC碱基序列£因工程中唯一用作运载目的基因的运载体Jt体在衔主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”5、20世纪70年代，创立了一种新兴的生物技术一

8、一基闪工程，实施该工程的最终RA、定向提取生物体的DNA分子B、定向地对DNA分子进行人工剪切C、在生物体外对DNA分子进行改造［）、定向地改造生物的遗传性状6、下列关于基因工程的叙述中错误的是（）A、基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向改造生物，培育新品种B、基因工程技木是唯一能冲破远缘杂交不亲和障碍，培育生物新类型的方法C、基因工程的基本工具是：限制性核酸A切酶、DNA连接酶和基因的运载体D、基因工程的研究成果，目前大多需要通过