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1、血小板反应素1在前列腺癌中的表达及与血管生成的关系：牛文斌王春玲秦文波罗振国【摘要】目的探讨各级前列腺癌组织中血小板反应素1(TSP1)的表达及与微血管密度(MVD)的关系。方法采用免疫组织化学(SP)法检测30例前列腺增生组织及26例前列腺癌癌组织中TSP1的表达情况及MVD。结果前列腺增生组织及低分化前列腺癌癌组织中TSP1表达强度及MVD计数分别为(3.7±1.5)、(1.7±1.0)及(6.8±1.9)、(31.0±5.3)。TSP1主要在前列腺增生组织基底细胞层高表达，在前列腺癌组织中低表达并且明
2、显低于前列腺增生组织(P<0.01)。MVD随着前列腺癌病变级别升高而增加，TSP1的表达与MVD呈显著负相关(rs=-0.603,P<0.01)。结论TSP1低表达可能参与了前列腺癌血管生成过程,联合检测TSP1和MVD可能在前列腺癌的早期筛查、诊断、治疗中具有一定意义。【关键词】血小板反应素1;微血管密度;前列腺癌 肿瘤血管生成受促血管生成因子和抑制因子的双重调节。血小板反应素1(thrombospondin1,TSP1)是一种细胞外基质糖蛋白,是血管生成抑制因子之一，与多种肿瘤血管生成关
3、系密切。TSP1在前列腺癌(PCa)中的表达及其与PCa血管生成的相关性研究国内外未见报道。本研究采用免疫组化方法检测TSP1在前列腺增生、PCa中的表达及与微血管密度(MVD)的关系,探讨TSP1与PCa血管生成的关系。 1材料与方法 1.1组织标本 26例PCa手术切除标本和前列腺穿刺活检标本作为研究对象,年龄59～90岁,平均(69.2±6.6)岁。病理类型全部为腺癌。分化程度：高分化6例，中分化12例，低分化8例。临床分期：A期4例,B期6例，C期9例,D期7例。同时选取30例经病理切片证实的良性前
4、列腺增生手术切除标本作为对照,年龄60～86岁,平均(62.7±8.9)岁。 1.2主要试剂 鼠抗人TSP1单克隆抗体购于美国Neomarker公司;鼠抗人CD34单克隆抗体、生物素标记的羊抗鼠免疫球蛋白IgG及SP试剂盒均购自北京中山生物技术公司。 1.3实验方法 TSP1及CD34采用SP法染色,严格按产品说明书进行操作。主要试剂:浓缩型鼠抗人TSP1Ab4单克隆抗体购于美国Neomarker公司,工作浓度为1∶100；即用型鼠抗人CD34单克隆抗体、生物素标记的羊抗鼠免疫球蛋白IgG及SP试剂盒、
5、DAB显色试剂盒均购自北京中山生物技术公司。 1.4结果判定 (1)TSP1表达:细胞质呈现棕黄色染色,明显高于背景(或背景不着色而细胞着色)为阳性细胞。TSP1表达的判定以染色强度和阳性细胞百分率的得分之和进行评估,测定采用双盲法,2人阅片。每张切片高倍镜下随机观察4个高倍视野,阳性细胞百分数(0、～25%、～50%、>50%)及显色强度(未着色、弱、中、强)分别计为0、1、2、3分,取4次的平均值为最终判断结果。两项得分相加:0～2分定为阴性“-”,3～6分定为阳性“+”。(2)MVD的测定:在低倍视
6、野(100倍)下选取肿瘤微血管数量(CD34阳性)最丰富区域,然后在200倍视野范围下计数微血管数，取3个不同视野的均值。 1.5统计学分析 采用SPSS12.0统计软件,组间差异采用单向方差分析检验,相关性分析采用Spearman检验。 2.2TSP1在PCa中的表达 TSP1主要表达于前列腺增生组织基底细胞层细胞质,呈强或中等程度棕黄色着色,围绕腺泡形成一个棕色条带。在PCa组织中，随着病变级别升高TSP1阳性表达逐渐减少,尤其是高分化PCa细胞的胞质着色明显减弱或无着色，TSP1低表达或不表达，T
7、SP1阳性细胞条带缺失(见图1)。TSP1在前列腺增生组织、高分化、中分化和低分化PCa中表达强度分别为(3.7±1.5)、(3.0±1.4)、(1.9±1.2)、(1.7±1.0)，各组之间差异均有统计学意义(均P<0.01)。 2.3TSP1与MVD的关系 Spearman等级相关分析显示,PCa病变中TSP1的表达与MVD呈显著负相关(rs=-0.603,P<0.01)。 3讨论若肿瘤早期血管不能形成，肿瘤则只能停留在几毫米直径的萌芽状态〔1〕。本研究结果表明,与前列腺增生组织相比,PC
8、a中的确存在活跃的血管生成,且随着病理分期的增高,血管增生活跃,MVD值逐渐增高,说明MVD可以较好地反映PCa患者的病期进展。此结论与国内外文献报道一致〔2〕。提示MVD与PCa的临床分期和侵袭转移密切相关。TSP1是一种细胞外基质糖蛋白〔3〕,是一种内源性的血管生成抑制因子，具有调节血小板聚集、细胞黏附、运动、生长的功能,能
