21常规石蜡切片制片规范

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1、常规石蜡切片制片规范1.制片过程中的每一个环节，应确保切片号和蜡块号一致，自始至终不能将号码弄错，一旦发生应重新取材，以防事故发生。2.制片完成后，应在HE切片上及吋粘贴写好木病理科病理号的标签，并认真仔细地核对。3.认真检查制片质量。切片优良率（甲、乙级片所占的比例）^90%,优级率（甲级片所占的比例）＞35%。不合格切片应立即重做。4.制片完成后，技术人员应将所制作的切片连同相应的申请单/记录单、取材工作单等一并移交给病理医师，双方经核对无误后，办理移交签字手续。5.制片工作一般应在取材后2个工作内完成（需要脱钙、脱脂等特殊处理的除外）。6.制片过程中如发生意外情况，有关技

2、术人员和技术室负责人应及吋向病理科主任汇报，并积极设法予以补救。7.具体HE切片制作技术参见《病理组织学常规制片技术》。附：1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下：（1）材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，应迅速固定，以保证原有的形态学结构。(2)组

3、织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cmx2.0cmx0.3cm,以使同定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和冃的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1〜0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的吋间，若制作教学切片厚取0.3〜0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。(3)勿挤压组织块：切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。(4)规范取材部位：要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。(5)选好组织块的切面:根据

4、各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入同定液中。(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。(1)小块组织同定法：这是敁常用的方法，从人体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4〜20,但组织块不宜过大过厚，否则同定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cmx2.0cm><0.3cm。(2)注射、灌注固定法：某

5、些组织块由于体积过人或固定液极难渗入内部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。3.脱水透明标本经过固定和冲洗后，组织中含有较多的水分，必须将组织块内的水分置换出来，这一过程叫做脱水。无论是用石蜡切片，还是用火棉胶切片，都必须除去组织中所含水分，因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容，常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。脱水的步骤是：80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时，此过程可用脱水机自控完成。丙酮也是一种脱水

6、能力很强的脱水剂，但因其脱水能力很强，对组织存剧烈收缩作用，在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于石蜡，还要经过一个能溶于石蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水杨酸甲酯等。4.浸蜡、包埋(1)使石蜡浸入组织中，取代组织中含有的透明剂。(2)包埋：将浸蜡后的组织置于融化的同体石蜡中，石蜡凝同后，组织即被包在其中，称蜡块，此过程称为包埋。5.切片和贴片(1)修整蜡块：可视其组织的大小，在组织边缘约0.1〜0.2cm处，切去余蜡部分，否则易造成组织皱缩不平。(2)准备好切片用具：切片刀、毛笔、眼科镊子(弯)、漂烘温控仪(3)安装蜡块：将修好

7、的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。(4)安装切片刀：将切片刀安装在切片机的刀台上，把刀台上的紧固螺丝旋紧，使切片时不产生振动，能保持一定的切片厚度。(5)切片的厚度:切片机的厚度调节器上刻有0〜50pn或0〜25pm，可任意选择其厚度，石蜡切片的厚度一般在4〜6pm。(6)切片(7)铺片：用眼科镊子镊起蜡带轻轻平铺在40〜45°C的水面上，借水的张力和水的温度，将略皱的蜡带自然展平。(8)贴片、烘片：待切片在恒温水面上充分展平后，将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水，置入60〜65°C恒