微囊藻毒素在大型溞和罗氏沼虾体内的生物累积和传递

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1、上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权

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3、明，微囊藻毒素可以在浮游动物，双壳类，甲壳类和鱼类生物体内积累，甚至在某些水生脊椎动物体内积累，如龟，鸭，水禽等。铜绿微囊藻（Microcystisaeruginosa）产生的微囊藻毒素对人类健康也有潜在的影响。本文系统报道了微囊藻毒素MC-LR在大型溞（Daphniamagna）和罗氏沼虾（Macrobrachiumrosenbergii）体内进行生物累积的情况；证实了微囊藻毒素MC-LR可通过食物链进行传递并在虾体内累积的情况。由于MC-LR在生物样品中的浓度通常很低，干扰物质多，因而本研究建立了一种生物体内微囊藻毒素的检测方法，并通过有效的富集

4、、分离和纯化过程实现高灵敏度、高专属性分析，为虾类健康养殖和食品安全管理提供科学依据。主要研究结果如下：1.采用超高效液相色谱质谱联用技术（UPLC），建立了一种生物体内微囊藻毒素MC-LR的检测方法，并在铜绿微囊藻、大型溞和罗氏沼虾的样品中获得检测结果，适用于研究微囊藻毒素在生物体内的累积、传递和代谢解毒以及对水产品的安全性进行评估。MC-LR的检测结果在1～250ng/mL范围内线性良好。根据动物源性水产品样品的情况，建立了固相萃取前处理方法（SPE法）。此方法都能可靠地完成水产品中MC-LR的检测要求，检测限LOD和定量限LOQ分别为0.007

5、5μg/g和0.01575μg/g较低，回收率在98.4%～103.4%之间：相对标准偏差小于13%。2．大型溞摄食铜绿微囊藻24h时间内MC-LR的平均含量为（1.12±0.12）μg−1g−1，MC-LR分别在10h和16h达到峰值（2.42±0.25）μgg和（2.72±0.09）μg−1g；前6h大型溞体内MC-LR的含量差异不显著（P＞0.05），8h时MC-LR的含量极显著升高（P＜0.01）；10h时达到第一个峰值，之后到12h时MC-LR的含量极显著降低（P＜0.01）；然后又极显著升高（P＜0.01），16h时达到第二个峰值，之后又

6、极显著降低（P＜0.01）。3.罗氏沼虾暴露于微囊藻藻液中24h，MC-LR未能在肌肉样品中检测出，血液样品MC-LR在8h被检测到，含量为0.15±0.004μg/g，其他取样时间点MC-LR未能被检测出。鳃丝中MC-LR的含量在2、8、16和24h依次为（2.16±0.19）、（6.08±0.59）、（3.57±0.44）和（0.89±0.08）μg/g；肝胰腺中MC-LR的含量在2、8、I上海海洋大学硕士学位论文16和24h依次为0.02、（0.06±0.01）、（0.19±0.03）和（0.20±0.04）μg/g；消化道中MC-LR的含量在

7、2、8、16和24h依次为（0.35±0.02）、（0.77±0.07）、（0.69±0.08）和（0.56±0.02）μg/g。MC-LR的含量并不是随着时间的延长而增加，每一种组织累积的含量不同：鳃丝>消化道>肝胰腺。4.罗氏沼虾摄食有毒大型溞8h后，鳃丝、肝胰腺和消化道MC-LR的含量分−1别为（0.05±0.005）、（0.04±0.02）和（0.05±0.01）μgg；16h后肝胰腺和消化道−1MC-LR的含量分别为（0.05±0.01）和（0.14±0.01）μgg；24h后血液、肝胰腺和−1消化道MC-LR的含量分别为（0.02±0.0

8、05）、（0.10±0.02）和（0.40±0.04）μgg。罗氏沼虾肌肉中未检测出MC-LR，肝胰腺和消化