青海地区几种锦鸡儿属植物中总黄酮含量的测定

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1、青海地区几种锦鸡儿属植物中总黄酮含量的测定【摘要】　　目的测定青海地区几种锦鸡儿属植物中总黄酮的含量。方法采用分光光度法，以芦丁为对照品，并利用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色方法，对青海地区几种锦鸡儿属植物中的总黄酮含量进行测定。结果在最大吸收波长510nm处芦丁测定的线性方程是A=12.737C－0.0035，相关系数r=0.9996(n=7),测得方法的平均回收率为99.2%（n=6），RSD=1.05%。结论该方法的测定结果准确可靠、快速、重复性好。【关键词】锦鸡儿属总黄酮分光光度法　　Abstract：ObjectiveTodetermine

2、thetotalflavonoidcontentofCaraganaFabr.plantfromdifferentareasinQinghaiprovince.Methodsples,spectrophotometrymethodandthecolourmethodofsodiumnitrite—aluminiumnitrate—sodiumhydroxideinethetotalflavonoidcontentintheplantofCaraganaFabr.fromdifferentareasinQinghaiprovince.ResultsThecalib

3、rationcurveofrutinat510nmethodisreliable,accurate,quickandreproducible.　　Keyetry　　豆科（Leguminosae）锦鸡儿属CaraganaFabr.植物，为落叶灌木，全世界约有一百多种，主要分布于亚洲和欧洲的干旱和半干旱地区，是温带亚洲的代表属之一。我国锦鸡儿属植物有62种，9变种12变型，主要产于西北、华北、东北、西南等干旱地区和荒漠地带；青海产20种，3变种和1变型〔1,2〕。该属植物药用部位为其根、根皮和花，根和花的药用作用主要是祛风止痛、活血散瘀、补气益肾、滋阴健脾等，治疗头

4、晕腰酸、妇女气虚白带、耳鸣眼花、肺虚久咳、小儿疳积、风湿性关节炎等疾病。近年来临床研究报道，该属植物对抗炎、治疗高血压病也有明显效果，而且还具有较强的抗癌及抗病毒的活性〔3～8〕。由于该属植物资源丰富、分布广泛，而且具有较强的药理活性，但目前研究的品种还是较少，因此，为全面利用该属植物资源并且充分开发其药用价值，给合理选取该属植物用药品种提供可靠的参考依据，本文建立了锦鸡儿属植物中总黄酮含量的分析方法，并首次对青海省几种锦鸡儿属植物中的总黄酮含量进行了测定。　　1器材　　1.1仪器与试剂　　722型可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；恒温水浴锅（金坛恒丰

5、仪器有限公司）；分析天平(上海良平精密仪器仪表有限公司)；常用玻璃仪器等。对照品芦丁(中国药品生物品检定所)，实验中试剂均为分析纯。　　1.2样品采集　　2007-08在青海省境内采集锦鸡儿属植物，由青海省藏药研究所多杰研究员鉴定。将采集药材的根茎部分去除杂质、切断，阴干，粉碎后过80目筛作为试验药材。　　2方法　　2.1芦丁对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品0.0250g，75%乙醇溶解并定容至100ml容量瓶中稀释至刻度，即得芦丁对照品储备液，使用时稀释成所需浓度即可。　　2.2锦鸡儿属植物中总黄酮提取方法的确定准确称取粉碎过筛后的锦鸡儿属植物样品10g于烧

6、瓶中，加入100ml石油醚回流40min进行脱脂，弃去滤液，再加入100ml75%的乙醇，回流提取30min共3次，弃去滤渣，合并滤液后进行减压浓缩，用75%乙醇定容至250ml量瓶中，即得药材中总黄酮的提取物〔9～11〕。　　3结果　　3.1最大吸收波长的确定取芦丁对照品溶液4ml采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色方法，在470～560nm波长范围内测定溶液的吸光度，结果得出该溶液在510nm处有最大吸光度值，由此可以选择510nm作为实验的检测波长。　　3.2实验测定条件的选择　　3.2.1氢氧化钠溶液用量的选择精密吸取芦丁对照品溶液2ml各4份

7、,分别置于25ml容量瓶中,各加5%亚硝酸钠溶液1.0ml，再加10%硝酸铝1.0ml，然后分别加入10%氢氧化钠5,10，15，20ml，再用75%乙醇溶液稀释至刻度,摇匀，分别在510nm处测定其吸光度（见表1）。由此选择氢氧化钠溶液的用量为10%NaOH10ml。表1不同氢氧化钠用量时芦丁标准溶液的吸光度（略）　　3.2.2硝酸铝溶液用量的选择在装有芦丁对照品溶液的4个25ml容量瓶中,各加5%亚硝酸钠溶液1.0ml，再分别加入10%硝酸铝溶液0.5，1.0，1.5，2.0ml，然后分别加入10%氢氧化钠10ml，定容,分别在510nm处测定其吸光度，结果

8、见表2。由此选择硝酸铝溶