宫颈癌组织中的rrm1表达及临床意义

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1、宫颈癌组织中的RRM1表达及临床意义刘爱华（山东省蓬莱市人民医院妇产科山东蓬莱265600）【中图分类号】R737.3【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）22-0231-02【摘要】木文通过研究RRM1在宫颈癌组织中的表达及意义，得出结论RRM1在宫颈癌组织中的表达明显升高，可以作为宫颈癌的一项新的辅助诊断指标。RRM1在宫颈癌组织中的表达与宫颈癌组织分化的高低有关，提示RRM1表达的增多可能在宫颈恶性肿瘤的进展中起一定作用。【关键词】宫颈癌RRM1Westernblot宫颈癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，其发生被认为是与原癌基

2、因激活和/或抑癌基因失活相关的多步骤的发展过程。RRM1基因属于新近发现的肿瘤抑制基因。木实验应用Westernblot方法，检测RRM1在正常宫颈和宫颈癌组织中的表达变化，探讨其在宫颈癌发生与发展中的作用。1材料与方法1.1标木及其来源35例新鲜宫颈癌组织标木取自青岛大学医学院附属医院妇科2009年1月至2010年7月因宫颈癌行手术治疗的患者，临床分期按国际妇产科联盟（FIGO）2000年修订的标准，I期15例，II期12例，III期8例。宫颈癌病理分级按WHO的分级标准，高分化11例，中分化11例，低分化13例。另取因子宫肌瘤行宫颈切除手术患者的正常

3、宫颈组织10例，新鲜标木冻存于-80°C超低温冰箱备用。1.2RRM1蛋白表达水平的检测取冻存组织匀浆，提取总蛋白，并用BCA蛋白测定试剂盒（Biorad公司）进行蛋白定量。上样50μg总蛋白、10%SDS-PAGE分离后电转移至硝酸纤维素膜上，用含5%脱脂奶粉的封闭液封闭lh，加入1:250稀释的兔抗人RRM1多克隆抗体（购于北京博奥森生物技术有限公司），4°C孵育过夜。加入辣根过氧化物酶偶联的鼠抗兔二抗（购于北京傅奥森生物技术有限公司）（1:1000）室温孵育lh。加入SuperSignalWestFemto化学发光剂并曝光。应用NIHImag

4、eJ图像分析软件对WesternBlot结果进行分析，以β-actin蛋白的含量作为参照，分析RRM1蛋白的相对表达量。1.3统计学方法应用SPSS13.0分析软件包对数据进行处理。数据间比较采用t检验法及方差分析进行分析，以P≤0.05为差异有统汁学意义。2结果2.1宫颈癌组织中RRM1mRNA和蛋白的表达RRM1蛋白质在宫颈癌组织中的表达明显高于正常宫颈组织，差异有统计学意义(P<0.05)o2.2RRM1蛋白表达与宫颈癌临床病理指标的关系进一步分析发现，RRM1蛋白在宫颈癌组织中的表达与宫颈癌的临床分期及冇无淋巴结转无明显相关

5、性(P>0.05),但与癌细胞分化程度显著相关(P<0.05)oRRM1蛋白在高分化组的表达明显低于中、低分化组(P<0.05)；随着分化程度的降低，RRM1表达升高。3讨论宫颈癌是全球妇女中发病率仅次于乳腺癌而占第2位的恶性肿瘤，宫颈癌的早期症状不明显，一旦出现症状，多已达中晚期。宫颈癌的早期发现、高危人群筛查、如何提高疗效及患者的生存质量是目前面临的一个重要课题。近年来，研究发现DNA修复和复制的缺陷是细胞发生癌变的重要机制[1】。如果核苷酸损伤未得到及吋、冇效的修复可引起基因不稳定性的增加，这即是引起肿瘤的原因，所以可以推断DNA

6、修复能力与癌症发生之间存在一定的关系。RRM1是最近被广泛关注的一个基因，在DNA修复及恶性肿瘤的进展、恶性转移和肿瘤耐药等众多细胞活动中扮演着重要角色。本研究采用Westernblot方法检测RRM1蛋白在宫颈癌中的表达，结果显示，RRM1蛋白在宫颈癌中的表达程度明显高于正常宫颈组织；这与艿他研究者在非小细胞肺癌中的研究结果相似[2,3];表明宫颈癌组织中存在基因损伤使DNA修复基因的表达增加。RRM1在宫颈癌组织中高表达提示瘤内DNA损伤严重。因此，本研究结果表明RRM1表达的增多与宫颈癌的发生有关，可以作为宫颈癌的一项新的辅助诊断指标。RRM1表达

7、与宫颈癌病理分级密切相关，随着宫颈癌分化程度的降低，RRM1表达却增多，这表明RRM1表达的增多可能在宫颈恶性肿瘤的进展中起•-定作用。参考文献[lJBhoumikA,TakahashiS,BreitweiserW,etal.ATM-dependentphosphorylationofATF2isrequiredfortheDNAdamageresponse[J].MolCell.2005,18(5):577-587.[2】陈芹,周彩存，张颉.ERCC1、RRM1和BRCA1在非小细胞肺癌中的表达及预后意义[J].肿瘤,2007,27(9):719-72

8、2.[3]Zheng2,ChenT,LiX,etal.,DNAsynthesis