醋炙对延胡索成分及镇痛作用的影响

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1、醋炙对延胡索成分及镇痛作用的影响陆城宇，孙莹洁，黄蓉，蔡群（南京中医药大学药学院13中药1，江苏南京）摘要：目的采用外表一点法比较醋炙前后延胡索中延胡索乙素的含量及其对小鼠镇痛效果的影响。方法采用HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，,流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液（85:15）(三乙胺调节pH=6.0)，等度洗脱；流速为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为280nm。结果醋炙品中延胡索乙素含量明显高于生品且醋炙延胡索止痛效果最好。结论延胡索醋制后大量生物碱和醋酸反应生成生物碱盐提高煎出量，

2、但本实验中对小鼠的止痛作用并未有明显体现。关键词：延胡索;炮制;延胡索乙素;中药延胡索为罂粟科植物延胡索CorydalisyanhusuoW.T.Wang的干燥块茎，又名元胡、玄胡，延胡索味辛、苦，性温，归肝、脾经，具有活血、利气、止痛的功能。为理气止痛、活血化瘀的要药，常用于血瘀气滞所致机体各部位疼痛，主要有效成分为生物碱，延胡索在中医临床使用中多用醋制品【1】。实验采用HPLC法测定了延胡索生品及醋煮炮制品中的延胡索乙素的含量，比较炮制前后的生物碱含量变化和镇痛实验，验证中医临床使用中多用延胡索醋制品

3、及醋煮法炮制的理由。1材料Agilent1100高效液相色谱仪、延胡索饮片、镇江产米醋、真空干燥箱、延胡索乙素标准品、高速离心机、炒锅、锅铲、搪瓷盘、切药刀、标准筛（50目，即3号筛）、研钵、万分之一电子天平、容量瓶（10ml、5ml）、移液管（25ml、50ml）、烧杯、玻璃漏斗、锥形瓶、量筒、微量进样器、流动相过滤装置、台式天平、秒表、注射器、灌胃针、超声仪、小鼠笼等，所用试剂均符合各条件下规定。2方法与结果2.1醋煮延胡索的制备取净延胡索50g，加醋（10ml）浸润。加水200ml于煮锅内，先用大火

4、煮沸，然后加入延胡索及醋液于锅内（锅内液体要平药面），调小火煮40min后，调大火收水，煮至醋液被吸尽，无硬心时取出，干燥，捣碎成颗粒状。(每100kg延胡索，用醋20kg)1.1延胡索乙素含量测定1.1.1色谱条件色谱柱：C18色谱柱；检测波长280nm；流速:1.0mL/min；柱温:30℃；进样量:10μL；流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(三乙胺调pH至6.0)【2】；梯度方式：等度洗脱。理论塔板数按延胡索乙素计应不低于3000。2.2.2对照品溶液的制备精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1

5、ml含46ug的溶液，即得。2.2.3供试品溶液的制备取延胡索生品和醋炙品，打粉，过3号筛，用万分之一电子天平称得：延胡索生品1.0005g，醋炙延胡索1.0017g。将其分别置于100ml具塞磨口锥形瓶中，用移液管精密加水50ml，称定重量为：生品部分150.3g，醋炙部分142.0g，将其置于超声仪中超声30min，称重，加水补足失重，摇匀，滤纸滤过，用25ml移液管精密移取续滤液25ml，置于蒸发皿中蒸干，残渣加水溶解，转移至10ml容量瓶中定容，分别吸取生品和对照品溶液若干，置于高速离心器中，以1

6、2000r/min，离心3分钟，完毕后，各吸取至微量进样器中。2.2.4测定法分别精密吸取生品与对照品10ul，注入HPLC，测定，即得。按干燥品计算，分别计算延胡索生品和醋炙品中延胡索乙素的百分含量。如表1样品组样品取样量（g）延胡索乙素含量（%）生延胡索1.00054.05%醋延胡索1.00175.29%表12镇痛实验比较2.1样品液的制备：称取延胡索生品及炮制品各10g，水煎煮1次(150ml水)，每次微沸30min，脱脂棉过滤，滤液浓缩至40mL，备用。（每毫升含有0.25g药物）1.1实验方法：

7、化学刺激法-扭体法:取健康雄性6只小白鼠，体重18～34g，随分为3组，对照组灌服等体积生理盐水，给药组分别灌以生品、醋煮延胡索水煎液0.6mL/只，40min后，各鼠腹腔注射O.7%醋酸0.1mL/10g【3】，观察并记录15min内小鼠产生扭体反应的次数(见表2)，延胡索不同炮制品镇痛作用结果与生理盐水组比较镇痛效果（见表3）。组号组别12345678对照组17251733241013171372278151422生延胡索组98883115411981419678醋延胡索组77161836008814

8、3810550表2样品组给药剂量ml/只数量（n）0-15min平均扭体次数对照组0.61616.5000±3.2917生延胡索组0.6168.6250±0.9406醋延胡索组0.6169.0625±5.8975表3（粗炙组与对照组比较,△P<0.05；与生品组比较,P<0.05；醋炙组与生品组比较，△P>0.05;）4讨论4.1延胡索是临床常用活血止痛中药，延胡索含多种生物碱，其中主要含延胡索甲素、乙素、及丑素等生物碱成分，