硬膜外导管在大鼠颈静脉置管短期多次采血中的

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1、硬膜外导管在大鼠颈静脉置管短期多次采血中的大鼠生存条件要求简单,饲养成本低,在医学实验中常用于大批量实验动物研究。研究疾病和药物最常见的生物样本就是大鼠血清或血浆。由于大鼠体积较小，在短期内对其进行多次采血会存在一定的困难M,而且还要考虑采血后大鼠能不能存活。因此采用合适的采血方法是获取宝贵血液样本的关键M。汤海涛等0报道应用临床麻醉使用的硬膜外导管进行大鼠颈静脉置管并输液，达到了理想的效果。本实验尝试应用硬膜外导管进行大鼠颈静脉置管后进行短期多次抽血,获得了成功,现将方法报告如下。1材料与方法1.1

2、材料SPF级SD大鼠20只,雄性，体质量250~350g,由湖北省实验动物研究中心提供。常规灭菌手术器械，自制鼠板，医用硬膜外导管、硬膜外导管接头、采血试管,2mL注射器，生理盐水,0.5%碘伏，医用棉签，医用无菌纱布，4-0号线，乙醚。1.2术前准备选择硬膜外导管有多个小孔的原始圆滑头端，剪一段长10cm的导管,硬膜外导管接头连接该段导管尾端，接头再与注射器相连,将导管内和接头预冲生理盐水备用。1.3方法大鼠采用乙醚吸入麻醉（乙醚对所检测项目结果无影响）后，仰卧位固定于鼠板上。剃去大鼠颈部任一侧的被

3、毛，常规消毒手术区域。提起大鼠颈部的皮肤，剪1个0.2~0.3cm的小口，游离皮下组织，钝性分离出长约1.5cm颈静脉血管，在血管下穿过摆放2根44号线,一根结扎颈静脉远心端血管，另一根放置于近心端备用。小心用镊子提起颈静脉的中间部位，使用眼科剪在静脉管壁上向心方向将血管壁全层剪1个“V”形小口，约占静脉周长的1/3~1/2,由助手提起两端结扎线,适当调节插管处颈静脉的粗细和松紧，以减少大鼠出血量，同时便于将导管置入2.5~3cm,推抽与导管末端相连的注射器，可见有血回流且推注顺畅后,44号线结扎固定

4、近心端导管,松紧适宜并把插管缝合在颈部肌肉上，以免导管被拔出。在完成当天多次采血任务后，拔出导管,缝合切口充分止血后，实验大鼠单独喂养。1.4置管后维护在搬动大鼠时动作轻柔，防止人为扯掉插管；由于大鼠苏醒状态易躁动导致管道脱落,在不影响实验结果的情况下可对大鼠进行持续乙醚吸入麻醉，但要注意观察大鼠呼吸和心跳，以防过度麻醉导致大鼠死亡。每次采血完毕，采用临床常用的中心静脉导管维护方法对管道进行彻底冲管和封管处理，防止堵管。2结果20只实验大鼠，1只在麻醉过程中死亡，其余均顺利完成置管,置管成功率为100

5、%。术后1只（5.3%)管道脱落,2只(10.5%)出现堵管现象，18只（94.7%)顺利完成采血任务。术后大鼠均无感染发生，均存活至下次手术。3讨论车兆义等63详细比较了大鼠实验中腹主动脉采血法、眼眶后静脉丛的采血法、心脏穿剌采血方法、尾尖采血方法及颈静脉采血法等各种方法的优缺点，采血方法不同会影响实验的结果。当需要多次采血时，要考虑到选取的方法能否连续多次采血、采集的血样是否溶血影响实验结果、每次米血量是否足够、米血后动物能不能存活等因素。有文献报道使用注射器经皮经颈静脉直接穿剌取血可取得较好的效

6、果M,但是该方法不适用于采血不顺利时严格按照时间要求进行的采血操作。临床上中心静脉置管主要用于危急重症患者的抢救、静脉营养支持、快速补液以及中心静脉压的检测等69。大鼠通过颈静脉完成中心静脉置管后，经过良好的维护和管理，可以达到短期多次采血的目的。使用硬膜外导管进行大鼠颈静脉置管，宜尽量使用原有带侧孔的硬膜外导管头端，此端光滑不易穿破血管壁，可以减少对血管的损伤。若将导管置入端剪成斜面，虽较易置入血管，但因其锐利容易穿破血管，必须对锐利头端进行打磨处理。硬膜外导管一般剪约10cm长度,过短则不便操作，

7、易导致脱管的发生，过长则血液滞留管腔过多,不利于彻底冲管,导致堵管的概率增加。导管置入深度适宜，置入过浅导管容易脱出,置入过深则易致心律失常的发生。本组实验中导管一般置入颈静脉深度为2.5~3cm。术中分离大鼠颈静脉须小心谨慎,彻底分离静脉是顺利完成插管的重要步骤、应尽量去除血管外壁的结缔组织与脂肪组织M。一般分离后较粗的静脉,经过剪切口的剌激，静脉立即收缩变细M,增加了插管的难度。同时硬膜外导管质地较软，在切口处要反复多次尝试插管，易造成血管壁损伤，而血管壁损伤是插管堵塞的原因之一614。本组实验有

8、1只大鼠发生插管时堵塞,可能与此有关。由于大鼠实验前禁食禁水,使大鼠血液浓缩，黏稠度高于平常,发生血栓的可能性增高。为避免肝素抗凝剂对药物浓度的影响，封管液中一般不加入肝素钠。每次采血后应用中心静脉导管封管技术，以生理盐水立即冲管和封管以保持管道通畅。采血时，首先以0mL注射器抽出导管内混有生理盐水的血液0.5mL并舍弃，以避免生理盐水混入血液标本中，再另取一支空注射器采集到足够合乎要求的血液标本，最后用生理盐水0.5mL冲洗导管并封管。所有冲洗、封管均