新型新杀虫剂的高通量筛选方法研究

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1、第49卷第12期 Vol．49No.12湖北农业科学2010年12月Dec．，2010HubeiAgriculturalSciences新型新杀虫剂的高通量筛选方法研究张志刚，杨自文，王开梅，柯少勇，梁英，张遵霞（湖北省生物农药工程研究中心湖北省农业科技创新中心生物农药分中心，武汉 ／430064）摘要：试验针对化学合成的新化合物筛选及活性评价方法进行了探索，对几类杀虫剂活性进行了对比试验，建立了基于人工叶片表面涂布及使用挥发性有机溶剂的高通量筛选和活性评价方法。并采用该方法对个系列的化学合成化合物和微生物源先导化合物及其化学合成衍生物样品共个进行了筛选

2、4773。结果表明，该筛选方法能稳定、高效地对化学合成的新化合物进行杀虫活性筛选和活性评价。关键词：新杀虫活性化合物；有机化学合成；挥发性有机溶剂；人工叶片；表面涂布法；筛选中图分类号：TQ450．2文献标识码：A文章编号：0439－8114（2010）12－3045-03High-throughputScreenofNewInsecticidalCompoundsagainstPlutellaxylostellaandCottonBollwormZHANGZhi－gang，YANGZhi－wen，WANGKai－mei，KEShao－yong，LIAN

3、GYing，ZHANGZun－xia（HubeiBiopesticideEngineeringResearchCenter／TheBranchCenterofBiopesiticide，HubeiAgriculturalScientificandTechnologicalInnovationCenter，Wuhan430064，China）Abstract：Thescreenandevaluationofnewinsecticidalcompoundwerefocusedinthispaper．Anewhigh－throughputscreeningme

4、thodbasedontheartificialleafsurfacecoatingwithvolatileorganicsolventswasestablishedaftercomparingthedifferentcompounds．700newinsecticidalcompoundsfromchemosythesisandseveralinsecticideshadbeentestedbythismethod．Theresultsindicatedthatthismethodwasstableandhighlyefficientforscreen

5、ingeffectiveinsecticidalcompounds．Keywords：newinsecticidalcompound；chemosynthesis；volatilesolvent；artificialleaf；surfacespread；screening以水作为为主要溶剂的常规实验室内筛选方法，用于有机化学合成获得的新化合物进行的筛选1材料与方法存在许多的问题。其工作量大、重复性差、样品需量1．1试验材料大等问题大大限制了筛选通量，而且有机化学合成1．1．1小菜蛾和棉铃虫卵及初孵幼虫本次试验获得的新化合物的作用机理未知，溶解特性复杂所用

6、小菜蛾、棉铃虫卵及初孵幼虫由湖北省生物农。能否建立一种高通量筛选方法就成为新型杀虫剂药工程研究中心养虫室提供。虫卵经过0．05％创制的关键。本研究通过以挥发性的有机溶剂替代NaClO消毒处理20s，并从产卵布上清洗下来，收集常用的水作为溶剂，解决了影响试验结果的关键因备用；幼虫在直径30cm的标本缸中孵化，培养温度素—样品的均匀分布。电子微量取样器和连续为28℃，相对温度大于——90％。［1］移液设备的使用以及微型化的筛选模式，提高了工1．1．2人工叶片由琼脂及人工饲料填充入培养作效率，增加了筛选通量，初筛样品需要量也减少皿、96孔组织培养板和24孔组织

7、培养板制备而成。至5mg。通过实际筛选的检验和优化，从样品处理1．1．3常用溶剂及标准样品化学试剂：丙酮、甲到结果分析的整个流程已经趋于成熟。可以对大量醇、乙醇、乙酸乙酯、二甲基亚砜、甘油（溶剂均为市新化合物进行快速筛选，样品用量少，结果稳定，并售分析纯）。杀虫剂标准样品：螺螨酯、氯虫酰胺、吡且能反应出不同杀虫活性化合物的药效差异虫啉、阿素菌素（均为市售分析纯。）。收稿日期：2010－09－09基金项目：湖北省“十一五”重大科技攻关及湖北省农业科技创新中心创新团队项目 （2006AA205A01）作者简介：张志刚（1971－），男，湖北天门人，农艺师，从

8、事微生物农药的研究，（电话）027－59101919（电子信箱 ）yilu98＠