植物激素脱落酸透过诱导乙烯之生物合成抑制拟南芥主根生长

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1、植物激素脱落酸透过诱导乙烯之生物合成抑制拟南芥主根生长第一章文献综述1.1ABA的研究进展脱落酸（abscisicacid,ABA)是一个15碳的倍半蔽稀化合物，广泛存在于植物界。1961年首次从成熟的棉铃中分离出一种能促进叶柄脱落的物质结晶，命名为脱落素I，但没有鉴定该物质的化学结构（LiuandCamsdagger，1961);1963年，美国艾迪科特等从棉花幼铃中分离出一种物质结晶，可以使叶柄加速脱落，称为脱落素II(Ohkumaetal.,1963)；同年，英国韦尔林等从欧亚槭树叶片中提纯出一种能使生长中的幼苗和芽休眠的物质,命名为休眠素(Eaglesand

2、bJ突变体：T-DNA插入突变体（Col背景)，Salk_002104,购自美国俄亥俄州立大学的拟南芥生物资源中心；突变体：以野生型材料中的Col为背景，经过EMS诱变处理、蹄选获得由郭红卫教授实验室提供；e/r/心突变体：以野生型材料中的Col为背景，经过EMS诱变处理、蹄选获得，由郭红卫教授实验室提供；etol突变体：以野生型材料中的Col为背景，经过EMS诱变处理、蹄选获得，由郭红卫教授实验室提供；突变体：T-DNA插入突变体（Col背景)，CS24601,购自美国俄亥俄州立大学的拟南芥生物资源中心；CS16647：T-DNA插入突变体（Col背景)，acsl

3、-1acs2-lacs4-lacs5-2acs6-lacs7-l,购自美国俄亥俄州立大学的拟南芥生物资源中心；CS16649：T-DNA插入突变体（Col背景)，acs2-lacs4-lacs5-2acs6-lacs7-lacs9-l,购自美国俄亥俄州立大学的拟南芥生物资源中心；CS16650：T-DNA插入突变体(Col背景)，acsl-1acs2-lacs4-lacs5-2acs6-lacs7-lacs9-l,购自美国俄亥俄州立大学的拟南芥生物资源中心；2.2常用培养基和溶液的配制植物培养用MS培养基（1L):称取4.43gMS粉，20g蔗糖，用1MKOH调pH

4、值至5.8-6.0,ddHjO定容至1L,加8g琼脂粉，12rC高压灭菌15min。如果配制添加ABA、AVG或AgNOj的培养基，需要将灭菌的MS培养基冷却至5°C左右，然后添加相应的母液到所需浓度，混匀，倒培养皿；大肠杆菌培养用LB培养基（1L):称取10g蛋白腺，5g酵母提取物，lOgNaCl,定容至1L(如果是固体培养基加琼脂粉15g),12rC高压灭菌15min;农杆菌培养用YEB培养基（1L):称取Ig酵母提取物，5g牛肉粉，5g蛋白胨，5g蔗糖，0.5gMgS04-7H20,ddHaO定容至1L(如果是固体培养基加琼脂粉15g)，12°

5、C高压灭菌15min;大肠杆菌、农杆菌转化用SOC液体培养基（1L):蛋白膝20g，酵母提取物5g,MgCl20.95g，NaCl0.5g,KCl0.186g；12°C高温灭菌15min后冷却至50°C左右，加入20mLlM葡萄糖溶液（0.22Jim滤器过滤除菌)。...第三章实验结果与分析.......433.1ABA不敏感突变体的筛选及图位克隆.......433.2乙烯合成和信号转导的抑制剂均可削弱.......483.3ABA诱导拟南芥幼苗的乙烯合成.......513.4ABA通过ACC合酶影响乙烯合成.......523.5ABA对ACC

6、合酶转录水平的影响.......533.6蛋白激酶CPK4和CPK11参与ABA诱导乙烯合成的过程.......553.7ABA诱导蛋白激酶CPK4和CPK11.......563.8PP2C蛋白磷酸酶ABI1和ABI2.......593.9ACS6的CDPKs磷酸化不影响其ACS酶活性.......603.10ACS6的CDPK和MAPK识别位点的磷酸化状态.......623.11体外模拟CDPK磷酸化状态的转基因植株.......643.12ACS6各转基因植株的表型分析.......65第四章讨论分析与未来展望.......694.1实验分析与讨论....

7、...694.2未来展望.......72第四章讨论分析与未来展望4.1实验分析与讨论ABA抑制根生长的作用早已被人们熟知，但是多年来对于这一常见表象下面暗含的分子机理和调控模式仍然一知半解。为了填补这项空白，我们实验室多年来致力于这方面的研究，并取得了一定的进展。通过主根在含ABA培养基上的生长表型来筛选突变体，获得了许多ABA敏感或不敏感的突变体。由于ABA调控种子萌发与调控根生长的机制有所不同，因此这一筛选体系会筛到一些参与ABA信号途径的新成员，其中既包括新的基因也包括已知的参与其他信号途径的组分（Liuetal.，2010;ianetal.,2000)