三七总皂苷对肝纤维化小鼠血清中转化生长因子

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1、三七总皂苷对肝纤维化小鼠血清中转化生长因子作者：余万桂，张恒文，贺尚荣，晏年春【关键词】三七　　摘要：目的观察三七总皂苷对肝纤维化小鼠血清中TGFβ1及IL1的影响，探讨三七总皂苷抗肝纤维化可能的免疫学机理。方法用CCl4复制小鼠中毒性肝纤维化模型，同时给与三七总皂苷治疗，酶联免疫吸附实验(ELISA法)测定血清中TGFβ1及IL1的水平，并行肝脏病理组织切片检测。结果三七总皂苷能显著降低肝纤维化小鼠血清中TGFβl及IL1的水平，减轻肝纤维化程度。结论三七总皂苷具有抗肝纤维化作用，其机理可能与降低血清中TGβp1及IL1的水平有关。　　关键词：三七总皂苷；肝纤维化；转化生长因子β1；白介素

2、1；小鼠　　EffectsofPanaxnotoginsengSaponinsonTGFβ1andIL1inMiceSeruminmiceodelofCCl4inducedliverfibrosisiceandthey1evelofTGFβ1andIL1inedandobservedtissuepatho1ogy.ResultsItsignificantlydecreased1evelofTGFβ1andIL1inserument，andthe1iverfibrosisproved.ConclusionPNShasreversaleffectsonmiceaybecorrelatedleve

3、lofTGFβlandIL1.　　Keyl加橄榄油（化学醇）80ml混合而成。四氯化碳由重庆东方试剂厂出品，橄榄油由上海化学试剂站分装厂出品。　　1.4主要仪器酶标仪（MK3型，LabxystemDragon公司生产）；SHZ82型水浴箱为江苏省太仓医疗器械厂产品。　　2方法　　2.1造模与分组实验共设为3组：空白对照组(对照组，n=12)：颈部皮下注射橄榄油5ml/kg，5d1次，正常饮水，饲与全价颗粒饲料。肝纤维化模型组(模型组，n=12)：颈部皮下注射20%的CCl4橄榄油溶液5ml/kg，1次/5d，直到实验结束，共持续6周［5］，正常饮水，饲与全价颗粒饲料。三七治疗组(治疗组，n=

4、12)：在预实验取得最佳剂量后，造模的同时给予三七总皂苷皮下注射，30mg/kg,1次/d，其余同肝纤维化模型组。　　2.2观察指标及其测定方法　　2.2.1对小鼠一般情况及体重的观察每天观察小鼠的一般症状，饮食变化，行为及毛发变化。　　2.2.2TGFβ1、ILl的检测实验结束后，各组小鼠断头取血，分离出血清，酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定血清中TGFβ1及IL1的水平，具体操作均按试剂盒说明。　　2.2.3病理形态学观察　　常规HE染色观察肝组织学变化，将肝纤维化分为0～4级［6］,0级：无纤维化；I级：纤维结缔组织仅局限于汇管区或汇管区扩大，有向小许发展的趋势；Ⅱ级：纤维结缔组织

5、增生进入肝小叶2/3并有与工级同样的改变；Ⅲ级：纤维结缔组织进入肝小叶达中央静脉周围；Ⅳ级：纤维结缔组织在全小叶多处弥漫性增生，假小叶形成，并有与Ⅲ级同样的改变。　　2.3统计学处理肝纤维化分级结果比较采用等级资料的秩和检验，两均数比较采用t检验。P<0.05为有统计学意义。　　3结果　　3.1小鼠一般情况　　对照组处死前均存活，每只体重增加(9.6±3.4)g，模型组死亡4只，至6周末处死前，每只体重增加(2.6±2.0)g，显著低于对照组(P＜0.01)。三七治疗组实验中死亡1只，每只体重增加(6.6±2.8)g，显著高于模型组(P<0.01)。死亡者未列入统计。　　3.2各

6、组小鼠肝组织病理学变化模型组肝细胞有较广泛的点状坏死，伴炎症细胞浸润，肝细胞增生较为明显，汇管区结缔组织增生。治疗组，肝组织切片检测可见修复的肝细胞索，炎症细胞浸润轻于模型组。见表1。表1各组小鼠肝纤维化病理学分级及评分（略）　　3.3各组小鼠血清中TGFβ1，IL1的水平模型组小鼠血清TGFβ1，IL1显著地高于对照组，治疗组小鼠血清TGFβ1，IL1显著地低于模型组。见表2。表2各组小鼠血清中TGFβ1，IL1测定结果（略）　　4讨论　　本研究以CCl4复制小鼠肝纤维化动物模型，使肝细胞发生变性坏死，通过炎症肝脏结缔组织增生，分割肝小叶，最后导致肝硬变。肝纤维化的实质是由于胶原和其他细胞

7、外基质(ECM)的合成与降解失衡，导致ECM在肝内过量沉积［6］。　　ECM的沉积和降解间的平衡由多种细胞因子调控，其中TGFβ1及IL1的调控作用尤为关键。TGFβ1在肝纤维化中的主要作用是促进ECM合成并抑制其降解，也有间接促HSC增殖作用［3］。肝纤维化患者TGFβ1水平升高，其升高与肝纤维化严重程度一致［4］。IL1主要由单核巨噬细胞分泌，作用于人的贮脂细胞、纤维母细胞、增加胶原合成，Dolar等［7