邻苯二甲酸二丁酯对小鼠骨髓微核和精子形态的影响

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1、邻苯二甲酸二丁酯对小鼠骨髓微核和精子形态的影响【摘要】目的了解邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对微核试验和精子畸形试验的影响。方法将昆明种小鼠随机分为5组，DBP染毒剂量为500mg/kg(低剂量组)，1000mg/kg(中剂量组)和2000mg/kg(高剂量组)，以及阴性对照组(玉米油)和阳性对照组(环磷酰胺，40mg/kg)，每只小鼠计数1000个骨髓嗜多染红细胞(PCE)和每个剂量组的小鼠计数1000个精子的形态。结果中、高剂量组微核率与阴性对照组相比明显升高(P＜0.05)，且各剂量组微核率随染毒浓度的增加而升高，

2、呈现剂量-反应关系(r=0.937，P＜0.01)；中、高剂量组精子畸形率与阴性对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，且各剂量组精子畸形率随染毒浓度的增加而升高，呈剂量-反应关系(r=0.904，P＜0.01)，畸形精子中以无钩为最多，其次是香蕉形、尾折叠、双头，分别为4.5%、3.09%和1.32%，结论DBP染毒在一定剂量下对小鼠骨髓微核试验和精子畸形试验呈现阳性结果。【关键词】邻苯二甲酸二丁酯；微核；精子畸形　　Abstract:ObjectiveToexploreeffectsofdibutylPhth

3、alateonthemicrokemelandspermcellabnomalitiesinmice.Methods40Kunmingstrainmiceasculineparisongroup,log/kg),mediumdosagegroup(1000mg/kg)andhighdosagegroup(2000mg/kg).Themicrokemelandspermcellabnomalitiesicronuclearrateinmediumdosagegroupandhighdosagegroupmalforma

4、tioninmiddlegroupandhighgroupmalformationincreasedindose-dependentmannerinationpresentsthepositiveresultsunderthecertaindosagetothemousemarroicronucleusexperimentandthespermatozoonabnormalexperiment.　　Keyicronucleus；spermshapeabnormalit邻苯二甲酸二丁酯(dibutylphthalate

5、，DBP)是最常用的一类增塑剂，主要用于塑料增塑剂、润滑剂、树脂溶剂、印刷油墨、胶黏剂、化妆品、农药载体等［1］，广泛存在于空气、水体、土壤及生物体内，可通过饮水、食物、皮肤接触(化妆品)和呼吸进入人体。有研究发现在食用油及家庭厨房油烟雾中也含有DBP［2-4］，DBP的健康危害越来越引起人们的重视。目前对DBP的研究多集中在生殖发育毒性，关于DBP的致突变毒性国内报道甚少，本文采用微核试验和精子畸形试验来研究DBP的遗传毒性，了解DBP对小鼠体细胞和生殖细胞的致突变作用。　　1材料与方法　　1.1动物选用宁夏医学院

6、试验动物中心提供的昆明种健康小鼠，雌性20只，雄性60只，体重18～25g。　　1.2主要试剂和仪器邻苯二甲酸二丁酯(分析纯，天津市瑞金特化学品有限公司)；玉米油；环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司0.2g)；生理盐水。眼科剪刀及镊子、吸管、晾片架、注射器、灌胃针及针头、玻片、显微镜、计数器。　　1.3动物分组与处理昆明种小鼠40只，雌雄各20只，随机分为5组进行骨髓细胞微核实验，同时40只雄性小鼠也随机分为5组，进行精子畸形实验。两个试验均设DBP低、中、高染毒组及阳、阴性对照组，DBP用玉米油配制，剂量分别为50

7、0、1000、2000mg/(kg·bg/kg。阳性对照组采用腹腔注射染毒，其余剂量组采用灌胃染毒，注射量为0.20mL/(10g·bsa染色，每只小鼠计数1000个多染红细胞(PCE)中出现的微核细胞数，并计算各组的微核率(有微核的双核细胞数／1000个双核细胞)［5］。　　1.4.3小鼠精子畸形试验　　从小鼠染毒到第35天时，颈椎脱臼处死雄性小鼠，取两侧附睾，在盛有0.5mL生理盐水的平皿中用眼科剪将附睾组织剪碎，用吸管轻轻吹打5～6次，制成精子悬液，用胶头滴管滴一滴于清洁玻片上，均匀推片晾干后，用甲醇固定5mi

8、n，干燥后，用2%伊红水溶液染色至少2h，晾干后于高倍镜下观察；每剂量组小鼠检查完整无重叠的精子1600条，计数不同类型的畸形精子数目，精子畸形率(%)及畸形精子类型构成比［6］。　　1.5统计学方法采用SPSS10.0统计软件建立数据库，本次实验数据采用单因素方差分析。微核、精子畸形出现频率呈现泊松分布，统计时进行平方根反正弦变换(arcsi