超声波提取防风色原酮的研究

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1、超声波提取防风色原酮的研究韩忠明，杨荣艳，王云贺，韩梅，孔伟伟，杨利民【摘要】目的优选防风色原酮的超声波提取工艺。方法以升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷的含量为指标,采用正交实验法优选超声波提取防风色原酮的最佳工艺。结果最佳提取条件为料液比为1∶30,超声时间45min,超声温度50℃,超声频率90kHz。结论采用超声波提取技术提取防风色原酮，提取时间短，提取效率高，可用于防风色原酮的提取。【关键词】超声波;防风;色原酮;正交实验;高效液相色谱　　Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractionc

2、onditionsofchromonefromSaposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk.byultrasonicOglucosylcimifugin,cimifugin,5OmethylvisammiosideandsecOglucosylhamaudolizedbyorthogonaltest.ResultsTheoptimalultrasonicconditionein;theextractivetemperatureonefromS.divaricataethodeandhighproducti

3、onyield.　　Keyone;Orthogonaltest;HPLC　　防风Saposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk.为伞形科防风属多年生草本植物,以未抽薹的干燥根入药，是我国常用大宗中药材之一，具有解表祛风、胜湿、止痉功能，用于感冒头疼、风湿痹痛、风疹瘙痒、破伤风等〔1〕治疗。现代药理研究工业化其主要的活性成分为升麻素苷、升麻素、5O甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷等色原酮类以及多糖、挥发油等,具有解热、镇痛、抗炎、抗肿瘤、抗血小板聚集等多种功效〔2～4〕。超声波法提取中药有效成分是近年来发展起来的一种新方法

4、,具有设备简单、操作方便提取时间短、效率高和节能等优点〔5〕。有关超声波提取防风中色原酮的研究已有报道〔6〕,但仅仅以升麻素苷和5O甲基维斯阿米醇苷两种色原酮为指标,而现在评价防风药材则以升麻素苷、升麻素、5O甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷4种色原酮为主要药效物质和质量控制评价指标〔7〕。本文以升麻素苷、升麻素、5O甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷4种色原酮的质量分数为指标,对超声波提取防风中4种色原酮的工艺参数进行了研究,为防风综合开发利用提供有效的提取方法和科学依据。　　1仪器与材料　　DL-1000E超声波清洗器(上海之信仪器有限公司);Ag

5、ilent1100高效液相色谱仪(在线脱气机、四元泵、DAD检测器、手动进样器和Agilent化学工作站);AUY220电子天平(日本岛津)。提取用甲醇为分析纯(北京化工厂)和HPLC用甲醇为色谱纯甲醇(Fisher公司)。　　实验材料系200709末采于白城GAP基地3年生未抽薹防风的根,经吉林农业大学张连学教授鉴定为伞形科柴胡属防风Saposhnikoviadivaricata(Turcz.)Schischk.。对照品由中国药品生物制品检定所提供,升麻素苷、升麻素、5O甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷批号分别为111522，111710，1115

6、23，111714。　　2方法与结果　　2.1防风4种色原酮的HPLC测定　　2.1.1色谱分析条件DiamonsilC18(4.6mm×200mm,5μm)色谱柱;柱温30℃;波长254nm;甲醇-水梯度洗脱：甲醇：0～15min:20%～45%，15～25min:45%～70%;流速1ml·min-1。　　2.1.2供试品溶液的制备防风根经45℃烘干,粉碎过30目筛。精密称取0.3g样品,浸泡2h,按照不同因素-水平进行超声提取,过滤,定容于100ml容量瓶中,过0.45μm滤膜,精密吸取20μl进样,按外标法测定。　　2.1.3混合对照品溶液的

7、配制精密称取经五氧化二磷干燥后的升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷适量,配成浓度为:升麻素苷:0.3mg·ml-1，升麻素:0.04mg·ml-1，5-O-甲基维斯阿米醇苷:0.5mg·ml-1和亥茅酚苷0.02mg·ml-1的混合对照品溶液。分别精密量取0.25，1，2，3，4，5ml,定容于10ml容量瓶中。　　2.1.4标准曲线的制备分别吸取上述对照品溶液20μl按色谱条件进样,测定峰面积。以色谱峰面积为纵坐标(Y),进样量为横坐标(X),绘制标准曲线,计算回归方程。　　升麻素苷:Y=3288.85374X+68.774277

8、(r=0.99985),线性范围:0.15～3μg;　　升麻素:Y=2578.41545X+7.520469