抗大鼠肾小球基底膜肾炎模型建立方法的改进

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1、抗大鼠肾小球基底膜肾炎模型建立方法的改进【摘要】目的探讨快速建立抗大鼠肾小球基底膜(glomerularbasementmembrane，GBM)肾炎动物模型的方法。方法30只正常SD大鼠随机分为三组，肾炎模型A、B组和正常对照组。肾炎模型A、B组大鼠一次性尾静脉注射兔抗GBM血清；正常对照组，尾静脉注射等量正常兔血清。肾炎模型A组大鼠尾静脉注射兔抗大鼠GBM血清前一周，通过足垫皮内注射正常兔血清进行预免疫。上述三组大鼠于尾静脉注射兔血清后第2、7、14和21天，检测24h尿蛋白、血肌酐、血尿素氮含量；第21天处死大鼠取肾

2、组织观察肾小球和肾小管的病理变化。结果肾炎模型A、B组，尾静脉注射兔抗大鼠GBM血清后，24h尿蛋白，血肌酐和血尿素氮含量均明显升高(P＜0.01)，A组升高程度均较B组明显(P＜0.05)。光镜检测A组新月体形成率较B组明显升高，肾小管内蛋白管型较B组多，部分肾小球不完全纤维化，B组肾小球未见纤维化。对照组上述指标均无明显变化。结论大鼠注射兔抗GBM血清之前，进行正常兔血清预免疫，可以更快诱导大鼠产生抗GBM肾炎。【关键词】抗GBM肾炎　模型　方法　大鼠【Abstract】ObjectiveToapproachthefa

3、stmethodtoestablishratmodelsofanti-GBMnephritis.Methods30normalratslydividedintonephritisgroupA,nephritisgroupBandcontrolgroup.Theratsinnephritisgroups.TheratsinnephritisgroupAmunizedsubcutaneofnormalrabbitserum7daysbeforetheinjectionofrabbitanti-ratGBMserum.Allra

4、tscreatine,serumureaonthe2ndday,the7thday,the14thdayandthe21stday.Allratsenscreatineandserumurea(P＜0.01),especiallyinnephritisgroupA(P＜0.05).ThereorecrescentsandproteincastsinnephritisgroupAthangroupBandpartoftheglomerulearkedchangesatalltheabovetimepointsincontro

5、lgroup.ConclusionsTheratscanbefastinducedtotheanti-GBMnephritisbypreimmunizingalrabbitserumbeforeinjectingtherabbitanti-ratGBMserum.【Keyodel;method;rat新月体性肾炎是人类肾小球肾炎中常见病、多发病。临床上多数患者起病急、病情凶险、病程迅速、预后较差。该病是一种自身免疫性疾病，其病理特征为大部分肾小球内形成新月体，早期为细胞型新月体，随着炎症发展，细胞型新月体逐渐转变为纤维性新

6、月体，最终可导致整个肾小球纤维化，肾功能丧失。大鼠抗GBM肾炎是利用异种抗大鼠GBM抗体直接诱导发生的具有典型的人类新月体性肾炎病理变化的动物模型。单纯注射抗GBM血清诱导的大鼠抗GBM肾炎，病程发展较慢，形成典型的新月体性肾炎需时较长。本实验在原来的实验基础上有所改变，先对大鼠足底注射正常兔血清进行预免疫，1周后再注射兔抗大鼠GBM血清，建立大鼠抗GBM肾炎模型，探讨一种快速建立典型的新月体性肾炎动物模型的方法，以期为进一步研究人类新月体性肾炎提供实验依据。1材料与方法1.1动物正常健康SD大鼠，190～210g，徐州医

7、学院实验动物中心提供。1.2主要试剂兔抗大鼠GBM血清，本实验室制备，胶原酶、完全福氏佐剂购自上海华美生物工程有限公司。1.3大鼠抗GBM肾炎模型的复制及动物分组处理正常SD大鼠30只，雌雄不限，180～220g，实验前在本实验室饲养4天，以适应环境。在此期间单笼收集大鼠24h尿，测24h尿蛋白含量，心脏穿刺采血收集血清测血肌酐和尿素氮含量，30只大鼠的上述指标均无异常。大鼠随机分为三组，肾炎模型A组、肾炎模型B组及正常对照组，每组10只。肾炎模型A、B组大鼠一次性尾静脉注射兔抗大鼠GBM血清；正常对照组大鼠尾静脉注射等量

8、正常兔血清，剂量均为1ml/100g。肾炎模型A组大鼠尾静脉注射兔抗大鼠GBM血清前1周，足垫皮内注射兔正常血清进行预免疫，正常兔血清与完全福氏佐剂等量混合，总体积为0.4ml。1.4主要观察指标1.4.1生化指标于尾静脉注射兔血清后第2、7、14天和第21天，收集24h尿，采用改良Lo.3讨论人类新月