不同树龄厚朴根皮中酚的分离与含量测定

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1、不同树龄厚朴根皮中酚的分离与含量测定【摘要】　　目的测定都江堰市不同树龄厚朴根皮中所含厚朴酚、和厚朴酚含量，试图为厚朴质量评价、遗传改良及合理采收提供理论依据。方法应用高效液相色谱法测定，色谱柱为NucleosilC18（5μm）键合相填充柱；流动相为甲醇-水（78∶22）；流速为1ml·min-1，检测波长为294nm，柱温为20℃。结果厚朴酚含量在树龄25年时达到最大值为9.2%，和厚朴酚含量在树龄30年左右时达到最大值为7.96%。结论根皮中厚朴酚、和厚朴酚的含量均与植物的生长发育年龄有关。厚朴药材的最佳采收期应在20～30年间。【关键词】厚朴；厚朴酚；和厚朴酚；含量　　Abstrac

2、t:ObjectiveTodeterminethecontentsofmagnololandhonokiolfromdifferentagesofMagnoliaofficinalisrootsinDujiangyanbyHPLCmethodandtoprovideatheoreticbasicforqualityassessment,geicimprovementandrationalpickingofmagnoliaofficinalis.MethodsNucleosilC18(5μm,250mm×4.6mm)obilephaseconsistedofmethanol,.Thetempe

3、ratureofcolumnagnololagnololandhonokiolrelateetoreapis20to30agesofthetree.　　Keyagnolol）、和厚朴酚（honokiol）以及β-桉叶油醇（β-eudesmol）等［2，3］。厚朴酚、和厚朴酚含量的高低是衡量厚朴质量的一个重要标准。《中国药典》2005年版规定药用厚朴所含有效成分厚朴酚、和厚朴酚总量不得少于2.0%［2］。由于厚朴一般需生长15～20年才能剥皮供药用，而剥皮后树即死亡，供药长期供不应求，导致药材过度和不适当采收，人工栽培成为该药材的主要来源，药材质量很不稳定。　　都江堰市拥有特殊的地理环境、优良

4、的厚朴种源，人工栽培条件得天独厚。据四川药检所统计现人工种植厚朴近6670ha。本文根据栽培时间和“树皮年轮测定树龄法”［4］，测定厚朴树龄后，利用高效液相色谱法测定都江堰不同树龄厚朴根皮中厚朴酚与和厚朴酚的含量，分析这两种有效成分的动态分布规律，为厚朴的合理采收和质量控制提供理论依据，对都江堰厚朴种植的规范化提供一定的参考。　　1仪器与材料　　1.1仪器日本岛津LC-10ATVP型高效液相色谱仪；SPD-M10AVP型紫外可见检测器；VP-OPS型色谱柱；CTO-10AS型柱温箱。　　1.2材料不同树龄厚朴的根采自川朴的主产区都江堰市虹口乡并进行分类学鉴定。样品采收按厚朴常规采收法，剥取不

5、同植株的根皮阴干，用微型粉碎机粉碎后过40目筛，60℃下于红外干燥箱中干燥4h，移入干燥器中保存，即得实验样品。10年以下树龄的厚朴为人工栽培林，树龄以播种时间推算，10年以上树龄的厚朴采用徒手切片法制备样品横切片，染色后显微镜下观察，根据纤维束环带的数目确定其年龄。厚朴酚、和厚朴酚标准品由河南省药品检验所提供，甲醇为色谱纯，水为重蒸水。　　2方法与结果　　2.1样品及对照标准品溶液的制备　　2.1.1样品溶液的制备精密称取1～12号样品0.2g置具塞锥形瓶中，加入25ml甲醇，摇匀，密塞浸渍72h，移取提取液5ml，摇匀，定容于25ml容量瓶中即得。　　2.1.2对照标准品溶液的制备精密称

6、取厚朴酚标准品4.0mg与和厚朴酚标准品2.4mg，分别置于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀即得。　　2.2色谱条件色谱柱为NucleosilC18（键合相填充柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为甲醇-水（78∶22）；流速为1ml·min-1，检测波长为294nm，柱温为20℃。　　2.3样品测定分别精密吸取样品及对照标准品溶液各10μm，在上述色谱条件下注入高效液相色谱仪，测定，以外标法计算样品中厚朴酚及和厚朴酚含量。结果见表1。根据实验结果绘出都江堰不同树龄厚朴根皮中厚朴酚、和厚朴酚及总酚含量的分布曲线，见图1～3。表1不同树龄厚朴根中酚的含量（略）　　3讨论如图1、图2

7、所示，根皮中厚朴酚、和厚朴酚的含量均与植物的生长发育年龄有关。树龄25年以下的厚朴，厚朴酚与和厚朴酚的含量随树龄的增大而增加，但厚朴酚含量增加较快，和厚朴酚含量增加缓慢，均在25年左右达到最高值；树龄25年以上，厚朴酚与和厚朴酚含量呈下降趋势，说明厚朴次生代谢已经由盛而衰。厚朴质量优劣是以总酚作标准区分的。从图3可以看出，厚朴药材的最佳采收期应在20～30年间。厚朴质量也与其来源部位有关，来源于同株厚朴不同部