17β雌二醇对人桡动脉舒张作用的体外实验

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1、17β雌二醇对人桡动脉舒张作用的体外实验苏海川，赵玉红，韦耿泽，陈军，李陕区【摘要】目的：研究17β雌二醇（17βestradiol,E2）对人桡动脉(RA)的舒张作用及其机制.方法：采用离体血管灌流的方法，观察E2对人RA的舒张作用以及NO合成酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(NωnitroLargininemethylester,LNAME)，8BrcGMP和鸟苷酸环化酶抑制剂美蓝(MB)对这一过程的影响.结果：观察到E2(0.1~100μmol/L)可剂量依赖性地舒张血管且具有内皮依赖性；8BrcGMP(0.1~1×103μmol/L)也可引起剂量

2、依赖性的血管舒张效应.10μmol/LMB使E2舒张人RA的作用完全消失.10μmol/LLNAME能部分抑制E2舒张TA的作用.结论：E2对RA的急性舒张作用具有内皮依赖性.此作用是E2通过非基因组方式使血管内皮细胞分泌NO、进而可能引起血管平滑肌细胞内的cGMP水平升高实现的.【关键词】雌二醇；桡动脉；一氧化氮；环GMP　0引言　　绝经前妇女心血管疾病发病率明显低于同龄男性和绝经后妇女，说明雌激素具有很强的心血管保护作用〔1〕.动物研究表明，雌激素能够通过非基因组途径快速舒张血管，雌激素的快速舒血管作用可能是雌激素促进了血管内皮细胞释放NO，进而抑制平滑肌细胞

3、的收缩〔2〕.有报道，雌激素可以直接抑制血管平滑肌细胞的收缩作用，产生舒血管作用〔3〕.然而，雌激素作用于血管的确切机制还未完全清楚，雌激素对人动脉的作用及其机制也少见报道.我们采用离体灌流人桡动脉环，观察雌激素对保留内皮和去内皮血管的急性舒张作用，并进一步研究这种舒张血管的作用机制.　　1材料和方法　　1.1材料人桡动脉由西京医院心血管外科取材自10例行冠状动脉旁路移植术的男性患者，年龄45～65(55±8)岁.17β雌二醇、左旋硝基精氨酸甲酯(NωnitroLargininemethylester,LNAME)、美蓝（MB）、8BrcGMP、去甲肾上

4、腺素（NE）（美国Sigma公司）.RM6280多道智能生理记录及分析处理系统（第四军医大学生物医学工程系）.　　1.2方法　　1.2.1主要药物配制17β雌二醇用DMSO配制成10mmol/L的原液，实验前用Krebs液稀释成工作液.LNAME,MB用去离子水配成10mol/L原液，实验时加入Krebs液，工作浓度为10μmol/L.8BrcGMP直接用Krebs液配成工作液（0.1~1000μmol/L）.Krebs液成分（mmol/L）：NaCl118,KCl4.75,CaCl22.54,KH2PO41.19,MgSO41.19,NaHCO32

5、5,葡萄糖10，充以含950mL/LO2和50mL/LCO2的混合气，用HCl调pH至7.2～7.4.　　1.2.2离体血管环灌流将游离的RA放入到预冷、充以含950mL/LO2和50mL/LCO2Krebs液中，仔细去除血管上的脂肪及结缔组织，将动脉剪成2～3mm的小段，然后将血管环套在不锈钢小钩上，放入37℃,充以含950mL/LO2和50mL/LCO2的Krebs液中，并连接在张力传感器上.给血管环加0.5g的前负荷，在Krebs液中平衡至少120min以上，在此过程中，孵育血管环的液体每15min换1次，并使前负荷维持在0.5g.加入10μmol/L的

6、NE检测标本活性（收缩幅度小于500mg者弃去），然后冲洗使血管张力恢复到基线.稳定30min后重复给予NE，待血管收缩达到稳定值时逐步增加E2的浓度（0.1～100μmol/L）.去内皮采用细钢丝插入血管腔中滚动完成.用10μmol/L的乙酰胆碱（Ach）对血管环是否有舒张反应作为判断血管内皮是否完整的标准.　　统计学处理：血管环的例数n等于提供血管的患者数.以NE对血管环收缩的最大效应为100%.制作累积浓度舒张反应曲线，求出最大舒张反应值（Rmax）和血管最大舒张的半数有效浓度（EC50）.统计学处理采用组间t检验，P0.05为差异显著.　　2结果　　2.1

7、E2对人桡动脉的作用人桡动脉血管环用1μmol/L的NE产生张力，待稳定后加入E2(0.1～100μmol/L).数据用1μmol/LNE预收缩的血管舒张到未加药前的百分数表示.NE使保留内皮或去内皮的HIMA收缩后，E2可引起剂量依赖性的舒张效应，且具有内皮依赖性(图1).　　图1E2对人桡动脉舒张的量效关系（略）　　2.28BrcGMP对人桡动脉的作用人桡动脉血管环用1μmol/LNE产生张力，待稳定后，加入8BrcGMP(0.1～1000μmol/L).数据用1μmol/LNE预收缩的血管舒张到未加药前的百分数表示.NE使RA收缩后，8BrcG