胶原 透明质酸钠复合膜作为组织工程心脏瓣膜支架的组织细胞相容性

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1、胶原透明质酸钠复合膜作为组织工程心脏瓣膜支架的组织细胞相容性　　　　　　　　　　作者：刘兴光汪钢俞世强刘维永张其清卫向阳欧阳辉【关键词】组织工程心脏瓣膜　　【摘要】目的筛选一种新的具有良好组织/细胞相容性、降解时间适合、没有毒性和/或炎症反应的组织工程心脏瓣膜支架材料。方法扫描电镜观察材料的微观结构;将胶原-透明质酸钠复合膜在无菌术下包埋于兔皮下，分别于2、4、6、8、12、14周取出通过大体和HE观察膜片的降解程度和组织反应;取犬大隐静脉分离培养内皮细胞和间质细胞并经免疫组化方法鉴定，选增生活

2、跃的细胞分别种植于膜片上，先后3次共培养7天，倒置显微镜和HE切片光镜观察。结果胶原-透明质酸钠复合膜呈蜂窝海绵样，孔径大小为（112±9）μm。兔皮下包埋实验显示，材料组织相容性好，完全降解时间为12～14周。细胞种植实验显示两种细胞均覆盖于材料表面且间质细胞长入了材料孔隙内。结论大隐静脉内皮细胞和间质细胞是较理想的种子细胞;胶原-透明脂酸钠复合膜有良好的组织/细胞相容性、适合的降解时间和孔隙结构，初步认为是一种可用于组织工程心脏瓣膜支架的生物材料。　　关键词组织工程心脏瓣膜支架材料胶原-透明

3、脂酸钠复合膜组织/细胞相容性【Abstract】ObjectiveTofiltrateakindofpromisingmatrixmaterialsoftissueengineeringofheartvalvethathavegoodHisto/cell-patibilityandappropriatedegradationtimeandnotoxicdegradationand/orinflammatoryreactions.MethodsMicrostructuresicroscopy（SE

4、M）;C-SHApositemembraneplantedsubcutaneouslyinrabbitsinsterileconditionsandextirpatedat2，4，6，8，12，14explantedcaninesaphenousvEinandcharacterizedbyimmunohistoˉchemistry，thenseededactivatedcellsonC-SHAmembrane3timestotallyin7daysrespectivelyandobservedb

5、yinvertedmicroscopandHE.ResultsTheC-SHAmembranelikeahoneybsponge，anditsporositydemonstratˉed>90%，poresizes.Ithadgoodhistopatibilityand12～14e.InˉvertedmicroscopandHEshoembrane，andICsgreonstratespreliminarythatECsandICsofcaninesaphenousvEIncanbeeasi

6、lyobtainedcliniˉcallyasanalternativecellsource;C-SHAmembraneisasuitablebiodegradablescaffoldasmatrixoftissueengiˉneeringofheartvalvethathavegoodHisto/cell-patibilityandappropriatedegradationtimeandmicrostructures.　　Keyatrixmaterialscollagen-sodiumhya

7、luronateacidpositemembranehisto/cell-patibility　　心脏瓣膜置换是心脏外科治疗严重瓣膜病的即定方法，常用的瓣膜替代物有机械瓣、生物瓣和同种瓣三种。这些瓣膜功能良好但也有其固有的不足。始于上世纪90年代中期的组织工程心脏瓣膜利用组织工程学原理和技术，将自体细胞种植在可降解支架材料上培育出的自体心脏瓣膜，具有良好的组织相容性、无免疫原性、耐久性好、不需终生抗凝，而且具有生物活性，能为生长期患儿提供潜在的生长能力，并可修复累加的创伤［1］。在组织工程研究中

8、，寻找能充分发挥组织再生潜力的仿生型细胞外基质-支架材料是重要内容和难点之一。支架材料主要承担瓣膜力学构型和细胞粘附载体的作用，种子细胞种植在支架上黏附、增殖和分泌胞外基质（ECMs）进行组织塑形，同时支架逐渐降解。它不仅影响细胞的生物学行为和培养效率，而且决定着移植后能否与机体很好的适应、结合、修复和替代，是限制组织工程能否真正应用于临床的一个关键因素。笔者研究胶原-透明质酸钠复合膜的微观结构、组织/细胞相容性和降解时间，对其在组织工程心脏瓣膜的应用进行评价和展望。1材料与方法1.1材料胶原-