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1、检测HBV和HCV重叠感染患者血清中IL作者:时红波,李秀惠,谢立,闫丽,辛咏梅,贺立香【关键词】乙型肝炎病毒;,丙型肝炎病毒;,重叠感染;,白细胞介素6;,γ干扰素 [摘要]目的:初步探讨血清IL6及IFNγ的水平与HBV和HCV重叠感染的关系。方法:采用双抗体夹心ELISA法,检测HBV和HCV重叠感染患者血清IL6及IFNγ的水平,同时检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素(TBil)的水平。结果:HBV和HCV重叠感染患者血清IL6的水平明显高于HBV或HCV单纯感染患者(P<001)。与正常对照相比较,HBV和HCV重叠感染急性期患者仅IFNγ水平升高(
2、P<001),慢性期患者仅IL6水平升高(P<001);而重型肝炎和肝硬化患者IL6及IFNγ的水平均显著升高(P<001)。HBV和HCV重叠感染患者血清IL6、IFNγ的水平与ALT、TBil的水平呈正相关(P<001)。结论:HBV和HCV重叠感染的发病和转归与IL6及IFNγ分泌的异常有极其密切的关系。 [关键词]乙型肝炎病毒;丙型肝炎病毒;重叠感染;白细胞介素6;γ干扰素 自1989年抗HCV抗体的检测方法建立以来,HBV、HCV两种嗜肝病毒重叠感染的问题日益引起人们的重视。有研究表明,在HBV感染的患者中,约有10%以上的患者重叠HC
3、V感染。重叠感染者的病情不论从肝脏组织学损伤还是临床表现上都较单纯感染者为重,且易发展为进行性肝功能衰竭,发展成肝癌的危险性也明显升高[1],但具体的作用机制尚不清楚。本实验中,通过检测HBV和HCV重叠感染患者血清IL6及IFNγ水平,探讨这两种细胞因子与HBV和HCV重叠感染的关系,为临床免疫治疗及预后判断提供理论依据。 1对象和方法 1.1研究对象103例肝炎患者均为2003-06~2005-06本院收治的门诊及住院患者,诊断依据为2000年西安第10次全国传染病寄生虫病学术会议修订的标准。包括:HBV和HCV重叠感染患者50例(其中急性肝炎5例,慢性肝炎20例,
4、重型肝炎15例,肝炎后肝硬化10例)、单纯HBV感染患者23例(其中急性肝炎2例,慢性肝炎10例,重型肝炎6例,肝炎后肝硬化5例)及单纯HCV感染患者30例(其中急性肝炎1例,慢性肝炎21例,肝炎后肝硬化8例)。正常健康体检者10例(无肝病病史,肝功能正常,乙肝和丙肝血清学标志阴性)。 1.2方法清晨采集空腹患者和正常健康体检者的静脉血,以3500r/min离心10min,分离血清,于-20℃冰箱保存。血清IL6及IFNγ水平的检测采用双抗体夹心ELISA法,严格按照IL6及IFNγ检测试剂盒(购自上海西塘生物科技有限公司)的说明书进行操作,结果均以ng/L表示。血清AL
5、T(丙氨酸转氨酶)及TBil(总胆红素)的水平采用全自动生化分析仪(RocheP800)检测(试剂盒购自Roche公司),检测结果分别以U/L和mg/dL表示。所有数据均以(x±s)表示,两组间均数比较用t检验。血清IL6、IFNγ的水平与ALT、TBil水平的关系,采用直线相关分析。所有数据的统计学处理采用SPSS11.5统计软件。 2结果 2.1重叠与单纯感染患者血清IL6及IFNγ水平的比较HBV、HCV单纯感染患者及HBV和HCV重叠感染患者血清IL6、IFNγ水平,均明显高于正常对照组(P<001)。HBV和HCV重叠感染患者血清IL6的水平明显高于单纯
6、HBV或HCV感染患者(P<0.01);但重叠感染患者血清IFNγ的水平与单纯感染患者没有统计学意义(P>0.05,表1)。 表1113例标本的血清IL6及IFNγ水平检测结果(略) bP<0.01vs正常对照组;dP<0.01vs单纯HBV感染组;fP<0.01vs单纯HCV感染组. 2.2重叠感染患者血清IL6及IFNγ的水平与病情的关系重型肝炎、肝硬化及慢性肝炎组血清IL6的水平均明显高于正常对照组(P<001),急性肝炎组血清IL6的水平与正常对照组无统计学意义,重型肝炎和肝硬化组血清IL6的水平明显高于慢性肝炎组(P<
7、;001)。重型肝炎、肝硬化及急性肝炎组血清IFNγ的水平均明显高于正常对照组(P<001),慢性肝炎组血清IFNγ的水平与正常对照无统计学意义,重型肝炎组血清IFNγ的水平高于急性肝炎组(P<005,表2)。 表2各种类型HBV和HCV重叠感染患者IL6及IFNγ水平(略) bP<0.01vs正常对照组;dP<0.01vs慢性肝炎组;eP<0.05vs急性肝炎组. 2.3重叠感染患者血清IL6、IFNγ的水平与ALT、TBil的相关性HBV和HCV重叠感染患者血清IL6及I