土壤原生动物数量测定方法研究

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1、1．3．2阉接壤器计数法培养计数法目前有如下几种方法；(1)最大或然效法(MPN：Mostpmbablenumbertechnique)(2)Uhlig冰没提方法(U燃遮iceextractionmethod)(3)浮选法(Flotation)“)疆盏法(Overlaytechniques)(s)电学方法(Electricmethod)《6)琼艏±壤悬液法(SoilsuspensionsOilagar)<7)密度离心法(Densi桫centrifugation)(8)过滤法(Filtration)(91土壤

2、水浸提与MPN法(CombinationwateredsoilsuslmnsionandMPNtechniques)。(1)最大或然数法又称培养计数法，是目薪广泛采用的)，法，基于数霪统计学藤理，在台遣的生长介质上建立逐步稀释的土壤悬浮液系列，在培养期间分几次镜检^士壤稀释液中原生动物的生长状况，麸磊褥到最大霉毙基瑗貔暴生动锈数量，褥窭攀燕±壤孛蘸生魂兹数赞豹方法。最初由CuRer(1927)提出，并由Singh(1946)和Stout(1982)改进为“三级十倍稀释法”。这种方法简单易行，不受时间、地点的

3、限制，土壤样品放置很久仍能够估计其值。然而，培养计数法有馒多臻酝：圆囊弱逝静纛生动秘羧耋惫捶掰寿夔憨囊，毒些建囊焱鑫然环凌条{牟下势不萌发的，但能够在优越的焙养条件下脱孢囊而成活体。因而所得的结果过高地估计T自然条件下土壤中活的原生动物数娥，所得结粜实际上是原艇动物最大率度，比直接计数结果离100—1000嵇(宁痖之等。1996)。菇一方蠢，培莽诗鼗法叉过低蟪甚至忽酶了数量较，l、戆类嚣瓣丰疫：②由予镜检时只能在低倍下谶行，因而只能分辨出个体比较犬的类群，无法分别个体比较小的类群；③无法测定单个种群的数量，

4、也就不可能从擞的角度来确定优势种。只能根据定性研究中每个释密瑗浆襁对多多来确定往势释。(2)Uhlig冰浸提方法(Uhlig，1964)：基于原生动物对濑度的敏感性和移动性谶行的。此方法是将冰块艘在土壤袭麟上，由于漩度的差异，原生动物会逃离到毒鬻在土壤下滕的灭菌水中，姨丽捡潮磷±壤蒙生动钫数量。懿是由予交澎虫移动缓横，容荔在遴离蓠被冻死。本方法主骤应用于鞭嘏虫和纤毛虫。目前已缀很少使用．但可以获樗某些指示原生动物。(3)浮选法(Schonbom，1977)：蒸子原生动物瓣漂浮甄凝进行的。北方法是一搬管子一端

5、连接疆缩空气静出口，另一端连接在100ml的璐杯底部，烧杯内的水土眈为{：lO，然后对十壤稀释液进行鼓起几分钟，用虹吸管吸取上层液体，进行观察计数。但收集到的原生动物仅为变形虫，低傣?原生动物瓣数量，强藏缀少使震本方法，毽怒毒潜在的髑憝。(4)覆盖法(Stoutet碱．1982)：憝基于原生动物捕食绷穗的原理。弛方法为：土壤稀释液在按种细菌的培养基上培弊7-9天，培养基每隔一定距离划一条直线。崽线附近如果没有细菌生妖，表明已缀渡蒙生动甥吃掉，显添罪生动锈瓣存在，簸嚣稷握MPN方法可褥爨障岽巴爨生动物的数量。

6、(5)电学方法(WageneretaL，1986)；是基于原生动物埘电的敏感性进行的．土壤悬浊液孛豹纾毛盎在魄凌孛藐馥土壤迂移笺干净貔痰孛，逶过溅定窳中翡嚣生动钫霉鞋嵇诗绎毛蛊豹数量。(6)琼脂土壤悬液法(Foissner，1986)：是基予在水中对琢生动物的培养进行的，此方法为垮匀恁褥±壤教子培莠噩牵，翔求至潮翳淹没±壤，在台逶的溢度下述杼培养，定期馕生部分水，在显微镜下计数。此方法省钱，省时，是估计原生动物密度的好方i去。且可以往培养过程中很少破坏土壤的结构。憾是时间长，在合适的蜷养温度下，造成一些原生

7、动物种类的死亡，中麒农业大学硕士学位论文绪论比如，10℃以一F的原生动物不能生存。{嚣密度离心法(Griffiths惫Ritz，1988)：骜予透过离心将羰生动钫获主壤霰靛中分离遴行染饿观察的原理。方法为：将土壤悬浮液与INT溶液在25℃下培养4小时，加入固定液离心．上清夜转移至三角瓶中用DAIP染色，然后用黑袍O．81am的微iL膜在7Kpa下抽滤。再加入AO染绝帮，糖滤、絷色，滤貘予燥嚣，搁入荧光延缓裁，1000糖}亟镜袋察计数。该方法姥够直接对细胞核染色，但是张亡的原生动物和有机质也易被染色，且在抽压

8、时细胞容易破裂。(8)过滤法(Couteaux＆Palka。1988)：基于琢生动物盔体豹大，l、进行静：罪生动秘虫体大小麓异缀太，最小的鞭毛虫不到1微米，最大的瓤米巴虫达数百微米。土壤原生动物主鼹栖息在团聚体的水腻中，鞭毛虫和裸阿米巴虫栖息在丈于2um的孔隙内，而纤毛虫则生活在大于lO#嫩静iL骧(Couteaus，1985)。营遍认为土壤原生动物毙够穿遘瓣最小琵襁为3#攒(Darbyshireela1．，19