冬虫夏草对抗体形成细胞的作用研究

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1、冬虫夏草对抗体形成细胞的作用研究姜涛，刘蛟，杜镇镇，王志强，宓伟【摘要】　　目的观察冬虫夏草对小鼠抗体形成细胞的作用。方法用100%浓度冬虫夏草浸出液定期给小鼠灌胃，然后进行小鼠抗体产生能力检测、特异玫瑰花环结形成细胞检测（SRFC）、血清IgG检测。结果用药组以上3项免疫学指标均增高。结论冬虫夏草有明显促进抗体形成细胞的作用。【关键词】冬虫夏草；免疫功能；小鼠　　Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofCSSontheantibodycellformationofmice.MethodsThemiceinitrated100%a

2、tion,specificrosettecellformation(SRFC)andserumimmunoglobulinmunefunctionintheSCCgroupprovedremarkablyparedationobviously.　　Keymunefunction；Mouse　　冬虫夏草，始载于《本草纲目拾遗》。因其冬季为虫，夏季为草，故名。为麦角菌科真菌冬虫夏草Cordycepssinensis(Berk.)Sacc，寄生蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。主产于四川阿坝藏族自治州松潘、理县、茂汶羌族自治县、甘孜藏族自治州、德格、道孚、青

3、海玉树、果洛藏族自治州及同德、同仁，云南中甸、德钦、丽江纳西族自治县等地，均为野生。主要功效：益肾补肺，止血化痰，止嗽定喘〔1〕。本实验主要研究冬虫夏草对抗体形成细胞作用，旨在为冬虫夏草的临床应用提供科学依据。　　1器材与方法　　1.1仪器和药物　　　　低温冷冻离心机（Beckman,美国）；美国Multiskan产全自动酶标仪；恒温水浴箱（上海）；电泳仪（上海）；100目不锈钢网。冬虫夏草（购于附属医院中药房），取100g加水1000ml，文火煎煮2h，去渣浓缩为100ml（浓度为100%）备用。　　1.2动物及分组　　取BALB/C纯系小鼠24只，体重18～

4、22g，雌雄各半，随机分为两组，每组12只，Ⅰ组为生理盐水对照组，Ⅱ组为药物实验组。　　1.3方法　　Ⅰ组用生理盐水灌胃，1次/d，0.5ml/(次·只)；Ⅱ组用冬虫夏草液灌胃，1次/d，0.5ml/(次·只)，共灌10次。　　1.4检测项目　　1.4.1定量溶血分光光度测定法（QHS）〔2〕　　本法体外测定B细胞产生分泌抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白量（以OD值表示），其结果可反映机体体液免疫功能。实验第5天分别将5%的绵羊红细胞0.2ml注入各组小鼠腹腔内。第11天颈椎脱臼处死小鼠，常规取脾脏，然后脾细胞计数，调整细胞浓度至1×107/ml，平均每组每只小鼠

5、设3支试管，每管依次加脾细胞悬液，0.2%绵羊红细胞（SRBC），1∶10新鲜豚鼠血清（补体）各1ml混匀。另外分别设补体、脾细胞以及SRBC对照管各3支，置37℃水浴温育1h，2000r/min离心5min。取上清液用96孔细胞培养板于全自动酶标仪450nm波长处测OD值，作为QHS反应值。　　1.4.2特异玫瑰花环形成细胞检测（SRFC）〔3〕　　取脾细胞0.1ml（1×107/ml），1%SRFC0.1ml，小牛血清0.1ml，试管内混匀，4℃放置2h，加结晶紫溶液20μl，计数500个淋巴细胞，求出SRFC/106脾细胞的形成率。　　1.4.3血清IgG

6、检测〔3〕　　采用对流免疫电泳实验，摘除小鼠眼球取血，分离血清，取不同稀释度血清10μl加入阴极端琼脂板孔中，将琼脂板阳极端孔内加入羊抗鼠IgG(1∶32)10μl，将对流免疫电泳通电30min后观察结果，以血清最高稀释度仍有明显沉淀线为准。结果以稀释度表示。　　2结果　　2.1冬虫夏草对抗体形成细胞的影响　　表1结果显示，用药组可促进抗体细胞形成，与对照组相比有显著性差异（P0.05）。表1冬虫夏草对抗体形成细胞的影响(略)　　2.2冬虫夏草对SRFC的影响　　表2结果显示，用药组SRFC产生明显增强，与对照组相比有非常显著性差异（P0.01）。表2冬虫夏草对

7、SRFC的影响(略)　　2.3冬虫夏草对小鼠IgG的影响　　表3结果显示，用药组可明显促进IgG产生，与对照组相比有显著性差异（P0.01）。表3冬虫夏草对小鼠IgG的影响(略)　　3讨论冬虫夏草是临床上常用的中药。现代药理研究证实，冬虫夏草能显著增加小鼠血清溶菌酶的含量，极显著地提高绵羊红细胞的滴度，也能提高巨噬细胞的吞噬功能，提高淋巴细胞转化率和自然玫瑰花环形成率，且能明显增加血清IgG的含量。尚有抗心肌缺血和心律失常的作用、抗应激作用、抗衰老作用、抗炎作用及抗肾衰作用。本研究重点从细胞及分子水平探讨冬虫夏草对抗体形成细胞，IgG分子的影响。实验证明，冬虫夏

8、草能增强小鼠抗体形成（B