e 选择素＋g98t, ＋a561c基因多态性与

《e 选择素＋g98t, ＋a561c基因多态性与》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、E选择素＋G98T,＋A561C基因多态性与【摘要】目的：探讨E选择素（Eselectin）＋G98T,＋A561C基因多态性与原发性高血压及左室重构的关系.方法：对105例原发性高血压患者（高血压组）及94健康正常人（对照组）进行Eselectin＋G98T,＋A561C基因多态性检测及超声心动图、血脂水平检测.结果：①Eselectin+A561C各基因型在原发性高血压组和对照组间的分布差异存在统计学意义(P<0.05)；②Eselectin＋G98T基因型在原发性高血压组和对照组间的分布差异无统计学意义(P>0.05);等位基因

2、频率在两组中分布差异亦无统计学意义(P>0.05)；③原发性高血压组内，ACCC基因型更倾向于发生左室肥厚(P<0.05)；④原发性高血压组和对照组Eselectin+G98T位点及+A561C位点各基因型组间血脂水平比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论：Eselectin＋A561C位点单核苷酸多态性与原发性高血压具有相关关系，C等位基因可能是原发性高血压发病的遗传易感基因.C等位基因原发性高血压患者更倾向于出现左室重构.【关键词】E选择素高血压多态现象遗传心室重构0引言原发性高血压是最常见的心血管疾病，由遗传因素和环境

3、因素共同作用产生的，因而对于高血压病分子机制的研究至关重要.E选择素(Eselectin)属于黏附分子(Ams)中的选择素家族(SF),可介导白细胞与内皮细胞起始黏附聚集并刺激白细胞与内皮细胞的相互作用［1］，并且Eselectin本身有促血管生成的作用.1对象和方法1.1对象原发性高血压住院患者105例（高血压组），符合2005年《中国高血压防治指南》高血压诊断标准.同期选取健康体检者94例作为对照组.行超声心动图、肝肾功能、血糖、胸片等检查，排除继发性高血压、糖尿病、冠心病、心瓣膜疾病、先天性心脏病，肝肾功能异常者.原发性高血压组及对照组均排除体

4、质量指数≥28kg/m2者.1.2方法采用酚氯仿法提取人类基因组DNA，采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCRRFLP)的分析方法，检测Eselectin基因+G98T位点及+A561C位点多态性.1.2.1引物设计与合成PCR引物序列根据文献［2］设计,Eselectin+G98T位点上游引物5′TGCCCAAAATCTTAGGATGC3′,下游引物5′AAGCCCAGGGAAGAACACAT3′.Eselectin＋A561C位点上游引物5′AGTAATAGTCCTCCTCATCATG3′，下游引物5′ACCATCTC

5、AAGTGAAGAAAGAG3′.1.2.2PCR扩增PCR扩增体系25μL,模板DNA2μL,上下游引物各1μL,5×Buffer5μuL，TagDNA酶0.5μL，双蒸水补足至25μL.94℃预变性5min,94℃变性30s,59℃退火1min,72℃延伸1min,35个循环,末循环72℃再延伸5min.1.2.3限制性内切酶酶切+G98T位点PCR产物的酶切体系为PCR产物10μL，限制性内切酶HphI2U,10×buffer2μL，灭菌去离子双蒸水10μL.＋A561C位点PCR产物的酶切体系为PCR产物10μL，限制性内切酶PstI10U,10

6、×buffer2μL，灭菌去离子双蒸水10μL.37℃水浴中酶解12～14h.1.2.4电泳判断基因型酶切产物在90V电压下通过25g/L琼脂糖凝胶电泳约40min；EB染色，紫外光透照仪下鉴定拍照.1.2.5血脂、血糖等生化指标测量于全自动生化仪上行TG,TC,LDLC,HDLC,血糖等检测.1.2.6左室质量指数计算彩色多普勒超声心动图仪检测，由专人操作，探头频率2.5MHz，探查深度12～20cm，黑白二维图像时帧频速度25Hz，多普勒取样容积宽度3.0mm，纸速50～100mm/s.测量3个心动周期，取平均值.探测舒张末期左室内径(LVDd)、

7、室间隔(IVST)、左室后壁厚度(LVP）计算采用Devereux公式：LVM=1.04×［（IVSTd+LVDd+LVPI）=LVM/BSA.统计学处理：用SPSS15软件包进行分析.基因型和等位基因频率采用基因计数法计算，研究对象与HardyWeinberg平衡的符合程度、单个基因型及组间等位基因频率比较采用四格表χ2或R×C列联表检验，并以比值比(OR)及其95%可信区间(CI)表示相对风险度.计量资料用x±s表示，各组间均数的比较依据资料的性质，用t检验，以P<0.05为有统计学意义.2结果2.1一般资料两组在性别和年龄上进行了匹配，年龄及

8、性别在高血压组及对照组差异无统计学意义（P>0.05）.TC