加减抵当汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏胰岛素受体基因表达

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1、加减抵当汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏胰岛素受体基因表达【摘要】　　［目的］探讨加减抵当汤对IR大鼠肝脏InRmRNA表达的影响。［方法］造模大鼠随机分成正常组、模型组、加减抵当汤高、中、低剂量组、文迪雅组，用RTPCR方法检测加减抵当汤对IR大鼠肝脏InRmRNA表达的影响。［结果］加减抵当汤高、中剂量组能明显上调IR大鼠肝脏InRmRNA的表达（P<005或P<001）。［结论］加减抵当汤能上调InRmRNA的表达，可能是其改善IR的机理之一。【关键词】抵当汤胰岛素抵抗胰岛素受体基因表达　　Abstract:［Objective］Toexpl

2、oretheeffectofmodifiedDidangdecoctiononinsulinreceptorgeneexpressioninliverininsulinresistancerats.［Methods］Theinsulinresistanceratslydividedintothecontrolgroup,themodelcontrolgroup,thehigh,mediumandloodifiedDidangdecoctiongroupsanderasechainreactionodifiedDidangdecoctionontheInRm

3、RNAofliverinrats.［Results］TheInRgeneexpressionlevelediumdoseofmodifiedDidangdecoction（P<005orP<001）.［Conclusion］UpregulationonInRgeneexpressionispossiblyoneofthemechanismsofmodifiedDidangdecoctionintreatinginsulinresistance.　　Keyega公司；RTPCR试剂盒购自TAKARA公司；全自动血液流变仪，LBY/Nb北京

4、普利生集团产品；低温冰箱：BCD216E/B型，青岛海尔电器有限公司产品；凝胶成像分析系统，上海天能科技有限公司产品。PCR循环仪：Tpersonal型，Biometra公司产品。　　14药物加减抵当汤组成：酒制大黄9g,桃仁9g,水蛭6g,黄芪20g；以上各药购自浙江中医药大学附属第一医院，按比例称取后，水煎后浓缩制成每毫升煎液含生药3g，高温消毒灭菌，置于4℃冰箱保存备用。文迪雅：购自浙江中医药大学附属第一医院，粉碎后溶于09%的生理盐水。　　15使用剂量根据临床用药情况，折算成大鼠使用剂量。大、中、小剂量分别是成人（60kg）日用药量的20、

5、10、5倍，并稀释成相同的给药容量。对照组文迪雅取成人（60kg）日用药量的10倍，并稀释成相同的给药容量。　　16处理方法正常组给予常规饲料同时灌服等容量的生理盐水，模型组和中药组给予高脂高糖饮食，模型组同时灌服等容量的生理盐水，中药组同时灌服大、中、小剂量的加减抵当汤中药煎剂，西药对照组给予文迪雅溶解液，共12周。实验结束后禁食12h，腹主静脉取血并取肝组织用于各项检测。　　17指标检测实验结束后，空腹取血，用葡萄糖氧化酶法测葡萄糖（FBS）；放射免疫法测胰岛素（FINS）；计算各自胰岛素敏感指数ISI=ln［1/(FBS×FINS)］；脂酶法测胆

6、固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白（HDLC）、低密度脂蛋白（LDLC）；全自动血流变仪测定全血比黏度（RNA和PPARγmRNA的表达(1)组织RNA提取：依照TrizolReagent使用说明书进行。(2)RTPCR：按RTPCR试剂盒中方法操作,设β肌动蛋白基因（βactin）为内参基因。(3)引物及扩增片段,InR引物:上游：5’GCTGAGCAACCTTACCAA3’下游：5’AAATGTGTACGAACTATC3’扩增产物大小为602bp。PPARγ引物上游：5’CACAAGAGCTGACCCAATGGTTGCTG

7、3’下游：5’CGCAGATCAGCAGACTCTGGGTTC3’扩增产物大小为471bp。βactin上游：5’GTCACCAACTGGGACGAT3’下游：5’GAGGCATACAGGGACAACA3’扩增产物大小为209bp。(4)PCR扩增产物分析：PCR产物电泳完毕后在凝胶扫描仪上观察结果，用目的基因光密度值与βactin光密度值的比值进行半定量分析，得出结果。　　19统计学方法本实验数据处理采用SPSS115统计软件。计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析对各组均数进行显著性检验，P<005时有统计

8、学意义。　　2实验结果　　21空腹血糖（FBS）、胰岛素（FIN