SlNAC7提高转基因拟南芥抗逆性及机制分析

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1、分类号：学校代码：10165密级：学号：201511000889硕士学位论文SlNAC7提高转基因拟南芥抗逆性及机制分析作者姓名：单红艳学科、专业：植物学研究方向：植物分子生物学与基因工程导师姓名：李秋莉教授2018年04月辽宁师范大学硕士学位论文ISlNAC7提高转基因拟南芥抗逆性及机制分析摘要NAC（NAM，ATAF1/2，CUC2）转录因子在植物的生长发育和应对非生物胁迫过程中具有重要的作用。实验室前期克隆了盐生植物辽宁碱蓬的一个NAC转录因子基因（SlNAC7）。本论文以实验室前期获得的两个转SlNAC7基因拟南芥（L1、

2、L2）、野生型拟南芥（WT）和转空载体拟南芥（pBI121-GUS）为材料，对其进行非生物胁迫处理，分析转SlNAC7基因拟南芥的抗逆性及其抗逆机制分析。主要结果如下：1、正常培养条件下，对转SlNAC7基因拟南芥、野生型拟南芥和转空载体拟南芥进行鲜重测量，发现转SlNAC7基因拟南芥的平均每株鲜重均高于野生型拟南芥和转空载体拟南芥。2、非生物胁迫条件下，对转SlNAC7基因拟南芥、野生型拟南芥和转空载体拟南芥进行种子萌发率、根长、存活率、气孔开闭、叶绿素荧光、相对电导率、脯氨酸含量、丙二醛含量和抗氧化酶活性指标的检测并进行抗逆性

3、分析。种子萌发率结果显示，非生物胁迫下转SlNAC7基因拟南芥的种子萌发率要明显优于野生型拟南芥和转空载体拟南芥。根长、存活率和气孔开闭情况结果显示，非生物胁迫下转SlNAC7基因拟南芥植株幼苗的生长状态要明显优于野生型拟南芥和转空载体拟南芥。电导率结果显示，非生物胁迫下转SlNAC7基因拟南芥的细胞膜被破坏程度要小于野生型拟南芥和转空载体拟南芥。叶绿素荧光结果显示，在非生物胁迫下转SlNAC7基因拟南芥可提高自身的光合能力。脯氨酸含量、丙二醛含量和抗氧化酶活性结果显示，非生物胁迫下转SlNAC7基因拟南芥可通过提高抗氧化性和细胞

4、膜的稳定性，从而提高转基因拟南芥对胁迫环境的耐受性。3、根据转基因拟南芥抗逆性分析的结果，选择胁迫相关基因和发育相关基因WRKY22、WRKY59、MYB96、MYB105、BHLH100、RD29A和RD29B进行实时荧光定量PCR分析。结果显示，这些基因在转SlNAC7基因拟南芥中均上调表达，表明这些基因可能受SlNAC7的调控，与转基因拟南芥耐逆性的提高有关。关键词：NAC转录因子；转基因拟南芥；非生物胁迫；抗逆性II辽宁师范大学硕士学位论文AnalysisofstresstoleranceofSlNAC7transgeni

5、cArabidopsisanditsmechanismsAbstractNAC(NAM,ATAF1/2,CUC2)transcriptionfactorsplayanimportantroleinplantgrowthanddevelopmentandinresponsetoabioticstress.ANACtranscriptionalfactor(SlNAC7)gene(NAC)wasclonedintheearlylaboratoryofthesaltedplant.TwoSlNAC7transgenicArabidops

6、iswiththepreviousobtained(L1,L2),wildtypeArabidopsis(WT)andemptyvector(pBI121-GUS)ofArabidopsisthalianaasmaterial,theabioticstresstreatment,analysisofSlNAC7transgenicArabidopsisresistanceandresistancemechanismanalysis.Themainresultsareasfollows:1.Undernormalculturecon

7、ditions,freshweightoftransgenicArabidopsisthaliana,wildArabidopsisthalianaandtransferredArabidopsiswasmeasured.ItwasfoundthattheaveragefreshweightoftransgenicSlNAC7ArabidopsiswashigherthanthatofArabidopsisthalianaandArabidopsisthalianainSlNAC7.2.Underabioticstresscond

8、itions,theSlNAC7transgenicArabidopsis,wildtypeArabidopsisandtransgenicvectorofArabidopsisseedgerminationrate,rootlengthandsu