高胆固醇血症对心脏电生理特性的影响

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1、高胆固醇血症对心脏电生理特性的影响【关键词】高胆固醇血症　　【Abstract】AIM：Toelucidatetheeffectofhypercholesterolemiaoncardiacelectrophysiology.METHODS:Rabbitslipidined.gCl21;NaH2PO4033;HEPES10;Glucose10;pH值用NaOH调至73;无钙台氏液，02mmol/LCa2+台氏液分别为台氏液中不加CaCl2和加02mmol/LCaCl2.记录钙电流的电极内液成份（mmol/L）：CsCl2120,CaCl21,MgCl25,Na2ATP5,Na2

2、GTP035，EGTA11,HEPES10,Glucose10，pH值用NaOH调至72；细胞外液的成分为18mmol/LCa2+台氏液.　　12方法　　121模型制备动物适应性饲养1pus，Japan）酶法测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）.　　123室颤阈值的测定实验第10周，戊巴比妥钠30mg/kg静脉麻醉，气管插管接呼吸机，沿胸骨左侧缘开胸，暴露心脏并缝制心包吊床，心电监护，记录肢体Ⅱ导联心电图.起搏电极由两支针形电极组成（除针尖外均涂有聚四氟乙烯），直径03mm，两针相距03cm，左心室游离壁刺入2mm深，用XD2A心脏诊疗仪（

3、苏州东方电子仪器厂生产）取间断刺激（100Hz，每次持续刺激1s），强度从1V开始，按递增05V的方法通过起搏电极刺激心脏，以引起心室颤动的最低强度为室颤阈值.　　124单个心室肌细胞分离参照文献［7，8］方法，经静脉麻醉并给予肝素500u/kg,开胸迅速取下心脏，放入4℃生理盐水中，使心脏立即停跳.行主动脉插管，悬挂于Langendorff灌流装置上，用无钙台氏液灌注5min，冲洗掉血液和钙离子，再改用含075g/L胶原酶I、005mmol/L钙离子的台式液灌注40min，取下心尖部心肌，稍吹打,即得单个心肌细胞悬液.分离后的细胞存放在含1g/LBSA和200u/L氨苄青霉素

4、的台氏液中，室温保存备用.实验在37℃下进行.　　125全细胞膜片钳记录采用全细胞膜片钳记录方法，在电压钳制下记录L型钙通道电流（ICa，L）.膜片钳放大器（HEKA,German）同计算机连接.刺激信号及电压输入信号的采集均由软件（Pulse+Pulsefit）控制.　　126动脉粥样硬化检测取主动脉大体标本(从近主动脉弓部到腹腔干分支处)，生理盐水冲洗后沿正中线剪开，铺平，摄像.图像分析仪测定斑块面积及内膜总面积，并计算斑块/内膜面积比.心脏标本置于100mL/L中性缓冲甲醛溶液中浸泡固定1h.常规乙醇脱水，石蜡包埋，将其横断面制成4μｍ厚连续切片行HE染色.　　统计学处理

5、：实验数据以x±s表示，使用SPSS120统计软件，采用t检验比较两组间各参数差异的显著性，方差不齐时采用t′检验，P<005认为有统计学意义.　　2结果　　21血脂检测结果造模期间，动物体质量渐增，第10周时两组间体质量有差异（P＜005).高胆固醇饲养前，两组间各项血脂水平无差异（P>005）.第10周时，高胆固醇饮食组血清TC、TG较对照组均明显增加（P<001）.实验期间所有动物血浆HDLC均保持在正常范围，无显著性变化（P>005，Tab1）.表1两组兔造模前后体质量与血脂指标（略）　　22病理形态学改变肉眼观，高胆固醇饮食组兔主动脉管壁有大量

6、黄白色脂样物向管腔凸出，从主动脉近端到远端，斑块逐渐减轻，而对照组内膜光滑，无斑块形成.高胆固醇饮食组兔主动脉管壁的斑块/内膜面积比为(389±101)%.心脏切片HE染色显示，高胆固醇饮食组冠状动脉管壁亦有粥样斑块形成，其狭窄程度均＜40%，对照组冠状动脉无明显狭窄.　　23心电图指标和室颤阈值高胆固醇饮食组兔心率和QT间期与对照组之间无显著性差异（P＞005）,而高胆固醇饮食组兔的QTc间期明显长于对照组（P＜005），室颤阈值明显低于对照组（P＜005，Tab2).表2两组兔心电图指标和室颤阈值（略）　　24心室肌细胞的膜电容和ICa，L在电压钳方式下，从保持电位-40m

7、V逐步去极化至+60mV，每次增加10mV，持续150ms，引出ICa，L（Fig1），以各激活电位下电流密度对相应电位作图得IV曲线（Fig2）.高脂血症兔心肌细胞的膜电容为［(206±19)pF，n=11］，较对照组［(132±14)pF，n=12］明显增加（P＜001）.在保持电位为10mV时，高脂血症兔心室肌细胞ICa，L峰值密度为［(158±12)pA/pF，n=11］，对照组为［(119±10)pA/pF，n=12］，两者间有显著性差异（P＜001）.　　3讨论　　膜电容是代表细