survivin在胆管癌组织中的表达及其与veg

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1、Survivin在胆管癌组织中的表达及其与VEG【摘要】目的：探讨凋亡抑制蛋白Survivin在胆管癌组织中的表达及其与血管内皮生长因子(vascularendothelialgroaandexploreitsrelationmunohistochemicaltechiqueaandnormalbileducttissues.51samplesofcholangiocarcinomaJanuary2003toDecember2005,andservedasthetestgroup,and10samplesofnormalbileducttissuesascontrolgroup.Result

2、s:1)Theexpressionrateofsurvivinincholangiocarcinomaalbileducttissuearkablelysignificant(P<0.01).TheexpressionofSurvivinincholangiocarcinomaordifferentiation,tumorlocationandlymphnodemetastasis(P>0.05).2)TheexpressionrateofVEGFincholangiocarcinomaalbileducttissueaphnodemetastasis(P<0.05),bu

3、tnotordifferentiation,tumorlocation(P>0.05).VEGFexpressionofthepatientsphnodemetastasisphnodemetastasis.3)TheexpressionofbothsurvivinandVEGF,andesample.Conclusion:SurvivinandVEGFmayplayanimportantroleintumorgenesis,tumorprogression,infiltrationandmetastasisofcholangiocarcinoma,andaterelationinan

4、giogenesis.　　【KEYa·Survivin·Vascularendothelialgromunohistochemistry　　胆管癌是一种严重威胁人类健康的恶性肿瘤，发病率有逐渐增加的趋势[1]。随着分子生物学的发展，人们已能在基因水平上了解癌基因及相关因子的表达与肿瘤的发生、发展的关系。Survivin是新近发现的一种凋亡抑制基因，属于凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisprotein,IAP)家族的新成员，在肿瘤形成过程中与细胞凋亡的抑制、细胞增生及血管生成密切相关，是肿瘤预后不良的标志。血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowth

5、factor，VEGF)是一种公认的最重要和最强的促血管生成因子，其在多种肿瘤中高表达，并与肿瘤的浸润、转移和预后不良密切相关。本研究应用SP免疫组织化学方法检测胆管癌组织中Survivin和VEGF的表达，并探讨二者在胆管癌发生、发展和转移过程中的作用。　　1　资料与方法　　1.1　一般资料　选取山东大学齐鲁医院普外科2003年1月—2005年12月临床资料完整的51例胆管癌根治切除术后存档蜡块为实验组，所有组织均经病理组织学诊断为胆管癌，其中男37例，女14例;年龄35～74岁，平均年龄56.1岁;高分化10例，中分化25例，低分化16例;胆管腺癌48例，黏液腺癌1例，黏液细胞癌1例，鳞

6、癌1例;有淋巴结转移21例，无淋巴结转移30例。另取同期10例胆管结石手术患者的经病理组织学检查证实为无癌变的正常胆管组织作对照组。　　1.2　主要试剂　兔抗人Survivin多克隆抗体、兔抗人VEGF多克隆抗体和即用型免疫组织化学超敏VltrasensitiveTMSP试剂盒均购自福建迈新生物技术开发有限公司。　　1.3　实验方法　采用VltrasensitiveTMSP免疫组织化学染色法，所有标本均用10%甲醛固定，石蜡包埋，连续切片3张，厚度为4μm。常规脱蜡、水化，抗原修复，内源性过氧化物酶阻断10min，非免疫性山羊血清室温下孵育10min。一抗室温下孵育60min，二抗室温下孵育

7、10min，链霉素抗生素物素-过氧化物酶溶液室温下孵育10min。DAB溶液显色5min，苏木精复染，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。　　1.4　结果判断　Survivin表达以细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性细胞;在400倍光学显微镜下至少观察5个视野，阳性细胞数>5%定为阳性表达，≤5%为阴性表达。VEGF表达以细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性细胞;阳性细胞数>10%定为阳性表达，≤10%为阴